7 Выделение Pseudomonas aeruginose
7.1 Образцы молока или колонии с кровяного агара, при микроскопии которых обнаружены грамотрицательные палочки, высевают на МПА и МПБ, культивируют в термостате при 37оС в течение 24-48 часов.
Появление сине-зеленого окрашивания МПБ и МПА, рост гладях плоских колений с ровными или изрезанными краями указывает на рост синегнойной палочки. Pseudomonas aeruginose вырабатывает сине-зеленый пигмент пиоционин, за счет которого происходит окрашивание питательных сред. Имеются отдельные виды синегнойной палочки, которые не вырабатывают пиоционин. Pseudomonas aeruginose не всегда активно вырабатывает пигмент. Пигментообразованиа можно наблюдать лишь на 2-3 сутки. Поэтому посевы на МПБ и МПА следует дополнительно просматривать через 48-72 часа. Сине-зеленое окрашивание МПБ лучше проявляется, если пробирку с МПБ встряхнуть и обеспечить доступ кислорода.7.2 Из МПБ и МПА делают, мазки и окрашивают их по Граму. Pseudomonas aeruginose представляет собой короткую, тонкую грамотрицательную палочку.
7.3 При обнаружении в мазках грамотрицательных палочек и изменении цвета сред в сине-зеленый ставят реакцию для обнаружения пиоционина. Для этого в пробирку с МПБ добавляют 1 мл хлороформа, пробирку встряхивают - хлороформ приобретает зеленый цвет и опускается на дно.
У пигментообразующих сапрофитных бактерий пигмент в хлороформе не растворяется.
7.4 Принадлежность выделенной культуры к Pseudomonas aeruginose подтверждают следующими признаками. Синегнойная палочка может расти при температуре от +15 до +43°С, способна расти при пересеве в физиологическом растворе, вызывает гидролиз желатины, свертывание молока, не растет на среде Китт-Тароцци, не ферментирует углеводы за исключением глюкозы, индол не образует, выделяет аммиак, гидролизует мочевину. Реакция на каталазу - положительная.
7.5 Для определения патогенности выделенных культур проводят биологическую пробу на 2-3 белых мышах: заражают суточной культурой в дозе 0,3-0,5 мл подкожно, срок наблюдения за животными 3 суток.
7.6 Срок лабораторного исследования - 6 дней.
Еще по теме 7 Выделение Pseudomonas aeruginose:
- Выделение РНК (задача 1)
- Выделение фосфолипидов
- Выделение уридина
- 5 Выделение стрептококков
- Выделение цитидина
- Выделение бактериальной ДНК
- Обезвреживание фекалий и выделенных паразитов
- ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 2 Тема: Выделение ДНК из крови
- 4 Выделение золотистого стафилококка
- Выделение чистых культур
- 9.4. Выделение плазмидной ДНК.
- 8.2. Выделение продуктов ПЦР из агарозного геля.
- Выделение рекомбинантнного белка из биомассы
- ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №3 Тема: Выделение ДНК на сорбент из крови
- Лечение вагинальных выделений, обусловленных раком шейки матки
- Выделение аденозина
- Микрофлора, выделенная у больных с гнойными воспалительными заболеваниями придатков матки.
- Установление строения и идентификация фенольных соединений, выделенных из травы полыни эстрагон.
- Метод пространственно-спектрального выделения ^-ритма