Выделение уридина
Схема выделения уридина представлена на рис. 11.
Маточный раствор, образующийся после выделения гуанозина, содержит аденозин, уридин, цитидин и остаточное количество гуанозина.
Он из сборника 17 поступает на ионообменную колонну 19, заполненную катионитом КУ-2-8 в Н+-форме. При этом происходит сорбция протонированных в кислой среде аденозина, гуанозина и цитидина, а незаряженный уридин выходит из свободного объема колонны. Уридинсодержащий раствор собирают в сборнике 21. На катионите также сорбируются мешающие примеси, в частности пигменты и ионы металлов. Оптимальной является сорбция 0,6-0,7 моль нуклеотидов на 1 дм3 смолы, что является хорошим показателем ионного обмена.Уридинсодержащий раствор, собранный в сборнике 21, защелачивают 40 %-ным раствором гидроксида натрия до pH 11,0 и пропускают через ионообменную колонну 22, заполненную анионитом в ОН-форме. Наилучшие показатели процесса достигаются при использовании анионита марки АРА-5п (емкость по уридину 0,36 моль/дм3), тогда как у анионитов марок АВ-17-2п или АВ- 17-8 емкость по уридину составляет соответственно 0,23 или 0,27 моль/дм3.
Сорбированный уридин элюируют с колонны 0,5 М раствором уксусной кислоты. Элюат собирают в сборнике 23. Анионит регенерируют 2 % -ным раствором гидроксида натрия с последующей промывкой водой. Все стоки собирают в сборнике 20 и передают на очистные сооружения.
Уридинсодержащий элюат из сборника 23 направляют на вакуум-выпарную установку 24, где его концентрируют до содержания уридина 1000 г/л.
Упаренный раствор поступает в реактор 25, где его охлаждают до температуры 4-6 °С, добавляют 9-кратный объем этанола из сборника 16 и выдерживают на холоду 10-12 ч. При этом происходит кристаллизация уридина на 93-95 %. Суспензия уридина поступает на нутч-фильтр 26, водноспиртовой фильтрат передают в сборник 13 (рис. 10) на регенерацию. Кристаллы уридина промывают на фильтре равным объемом этанола. После этого влажный осадок уридина помещают в ваку- ум-сушильный шкаф 27, где его высушивают до остаточной влажности не более 10 % . Выход уридина составляет 72 % от его содержания в РНК, а содержание основного вещества — 97-98 % .
3.4.3.
Еще по теме Выделение уридина:
- Выделение РНК (задача 1)
- Выделение фосфолипидов
- 5 Выделение стрептококков
- Выделение цитидина
- Выделение бактериальной ДНК
- Обезвреживание фекалий и выделенных паразитов
- ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 2 Тема: Выделение ДНК из крови
- 4 Выделение золотистого стафилококка
- Выделение чистых культур
- 9.4. Выделение плазмидной ДНК.
- 8.2. Выделение продуктов ПЦР из агарозного геля.
- Выделение рекомбинантнного белка из биомассы
- ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №3 Тема: Выделение ДНК на сорбент из крови
- Лечение вагинальных выделений, обусловленных раком шейки матки
- Выделение аденозина
- Микрофлора, выделенная у больных с гнойными воспалительными заболеваниями придатков матки.
- Установление строения и идентификация фенольных соединений, выделенных из травы полыни эстрагон.
- Метод пространственно-спектрального выделения ^-ритма