3.4. Морфологические преобразования миндалевидного тела головного мозга крыс после хронической интоксикации фенобарбитоном с коррекцией силибором

Неполовозрелые животные. Для выявления корригирующего действия силибора на фоне влияния барбитуратов на нервные клетки ядер основных отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс был поставлен эксперимент, в котором животные одновременно с введением фенобарбитона (30 мг/кг) получали силибор в дозе 80 мг/кг.

При микроскопии препаратов указанной экспериментальной группы (IC) на 7 сутки эксперимента в отличие от контроля у большинства нейронов всех ядер обоих групп МТ головного мозга неполовозрелых крыс выявлены обратимые изменения, как и в группах неполовозрелых животных при влиянии фенобарбитона без коррекции, но в гораздо меньшей степени. При этом определялись: увеличение размеров тела и ядра клеток, гиперхроматоз. Иногда наблюдались клетки с телом округлой формы и нечеткими контурами, ядра которых эктопированы, просветлены, ядрышки чаще расположены в центре, иногда – эксцентрично. Хроматофильное вещество крупнозернистое, равномерно расположено в цитоплазме. В отдельных клетках отмечались признаки острого набухания – вакуолизация цитоплазмы, перицеллюлярный отек. Клетки нейроглии равномерно распределялись в пределах изучаемых ядер и их количество незначительно увеличено.

Полученные при морфометрии данные показали, что в экспериментальной группе животных по сравнению с контрольной на 7 сутки в обоих отделах МТ головного мозга по всем изучаемым показателям нейронов и макроглии изменения не имели существенных различий, то есть были практически одинаковы.

В средние сроки эксперимента (15 суток) неспецифические изменения нервных клеток изучаемых ядер напоминали морфологию, характерную для 7 суток. В этот период также наблюдались гиперхромные клетки и с гидропическими изменениями (набухшие, имеющие вакуоли в цитоплазме).

Полученные при микроскопии визуальные данные подтверждались данными морфометрии. Так, в базо-латеральном отделе МТ статистически достоверный характер носило увеличение площади сечения клеток с 45,71 ± 0,03 до 52,62 ± 0,06 (t = 4,46; Р < 0,05). Изменения других цифровых показателей не достигали достоверных величин. В ядрах кортико-медиального отдела МТ на 15-е сутки наиболее существенные изменения отмечались по следующим показателям: увеличивалась площадь сечения ядер клеток с 4,04 ± 0,01 до 4,1 ± 0,02 (t = 2,39; Р < 0,05), уменьшалось количество

Рис. 3.51. Микрофотография. Кортикальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг при коррекции силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Вакуоляризация цитоплазмы.

3. Утолщение отростков.

Рис. 3.52. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбиталом в дозе 30 мг/кг при коррекции силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Сморщивание.

2. Сателлитоз.

нейронов с 3380,38 ± 2,42 до 3178,45 ± 4,25 (t = 3,40; Р < 0,05) и глиальный индекс с 1,06 ± 0,01 до 0,87 ± 0,03 (t = 3,64; Р < 0,05). По остальным показателям статистически достоверная разница изменений показателей не обнаружена.

Вышеперечисленные морфологические изменения в ядрах основных отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс при воздействии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором были также выражены в более длительный срок эксперимента, то есть на 30 сутки. В ряде нервных клеток изучаемых ядер изменения носили обратимый характер: размеров ядра и ядрышка, их эктопия, гиперхроматоз, набухание, наличие мелких и крупных вакуолей в цитоплазме, перицеллюлярный отек. В то же время чаще встречались и дистрофически измененные нейроны: сморщенные клетки – уменьшенные в размерах, с четкими контурами и вытянутой веретенообразной формой. Ядра последних часто палочковидные, плохо или совсем неразличимы. На отдельных препаратах обнаруживались явления нейронофагии, клетки-тени. Вокруг нервных клеток нередко отмечалось увеличение количества макроглии (рис. 3.53-3.54). Так, на 30 сутки эксперимента в ядрах базо-латерального отдела МТ головного мозга неполовозрелых крыс при влиянии фенобарбитона с коррекцией силибором наблюдалось увеличение площади сечения ядер нервных клеток с 3,66 ± 0,02 до 3,73 ± 0,04 (t = 2,89; Р < 0,05), а со стороны глии – увеличение плотности общей глии с 2241,93 ± 2,62 до 2359,25 ± 5,3 (t = 4,67; Р < 0,05), сателлитной глии с 1044,35 ± 10,72 до 1152,22 ± 5,22 (t = 4,75; Р

Рис. 3.53. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Краевое расположение ядра и ядрышка.

3. Гиперхроматоз.

4. Вакуоляризация цитоплазмы.

Рис. 3.54. Микрофотография. Центральное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Перицеллюлярный отек.

2. Сморщивание нейронов.

3. Клетки-тени.

< 0,05) и глиального индекса с 1,0 ± 0,03 до 1,11 ± 0,56 (t = 2,57; P < 0,05). Указанные изменения являлись статистически достоверными (по остальным показателям изменения были недостоверны). В кортико-медиальном отделе МТ отмечено увеличение площади сечения клеток с 61,22 ± 0,07 до 67,71 ± 0,14 (t = 6,34; Р < 0,05) и их ядер с 4,31 ± 0,02 до 4,41 ± 0,04 (t = 3,57; P < 0,05), уменьшение количества нейронов с 2650,54 ± 6,62 до 2485,23 ± 11,49 (t = 4,735; Р < 0,05). Количество общей глии увеличивалось с 2044,23 ± 2,56 до 2765,7 ± 10,05 (t = 4,937; Р < 0,05), а сателлитной – с 1551,09 ± 2,11 до 1941,55 ± 7,94 (t = 4,15; Р < 0,05). Как видно, по всем вышеперечисленным показателям изменения носят статистически достоверный характер (изменения других изучаемых показателей статистически недостоверны). Таким образом, на 30 сутки эксперимента статистически достоверные изменения цифровых показателей нейронов и глии характерны для всех ядер обоих отделов МТ головного мозга крыс неполовозрелого возраста при действии фенобарбитона с коррекцией силибором. При этом наиболее ранимыми представлялись ядра кортико-медиального отдела, где статистически достоверных изменений цифровых показателей было выявлено больше.

При увеличении сроков эксперимента до 60 суток в нервной ткани изучаемых ядер МТ у неполовозрелых животных при использовании фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором наблюдались клетки с крупнодисперсным хроматофильным веществом, равномерно расположенным в цитоплазме.

Для более глубокого анализа обнаруженных нами в эксперименте морфологических изменений был использован корреляционный анализ. С его

Рис. 3.55. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 60 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Активация и пролиферация глии.

3 Сателлитоз.

помощью выяснялось, как изменялась взаимосвязь показателей, характеризующих состояние ядер основных отделов МТ головного мозга крыс неполовозрелого возраста при воздействии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Анализ включал 2 изучаемых отдела МТ и 9 показателей клеток изучаемой структуры головного мозга.

При исследовании корреляционных связей между ядрами базо-латерального и кортико-медиального отделов МТ головного мозга половозрелых крыс при интоксикации фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором длительностью 7 суток взаимосвязей сильной степени между исследуемыми отделами МТ при указанных условиях эксперимента мы не наблюдали. Взаимосвязь средней силы (0,3 < r < 0,7) отмечалась по показателям плотности общей и сателлитной глии. По остальным показателям наблюдали слабую взаимосвязь (r < 0,3).

На 15 сутки эксперимента сильная корреляционная связь (0,7 < r < 1,0) между отделами МТ была обнаружена только по показателю площади сечения нейронов.

При эксперименте с длительностью влияния фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором 30 суток сильных связей между исследуемыми параметрами, как и в предыдущие сроки эксперимента, выявлено не было. Связи средней силы (0,3 < r < 0,7) были отмечены по показателям плотности нейронов, сателлитной глии, глиального индекса и интерглиального коэффициента. Остальные связи были зафиксированы как слабые.

На 60 сутки эксперимента сильная взаимосвязь (0,7 < r < 1,0) обнаруживалась между ядрами основных отделов МТ головного мозга по площади сечения нейронов, плотности общей и сателлитной глии, а также по показателю интерглиального коэффициента. Средней силы связи (0,3 < r < 0,7) были выявлены по показателям плотности нейронов и глиального индекса. По остальным изучаемым показателям установлена слабая взаимосвязь (r < 0,3).

Сравнивая корреляционные связи ядер отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс контрольных и экспериментальных групп, следует отметить, что происходит изменение силы взаимосвязей, как по количеству, так и по качеству в сторону ослабления в эксперименте.

Анализ корреляционных связей между отделами МТ в данной экспериментальной группе позволяет сделать следующие выводы:

1. воздействие фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором на ядра основных отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс изменяет характер и силу взаимосвязей между основными отделами МТ головного мозга;

2. по сравнению с контрольными группами во все сроки эксперимента изменяется характер и сила взаимосвязей между ядрами обоих отделов МТ в сторону ослабления в экспериментальных группах;

3. сильные взаимосвязи между отделами МТ головного мозга крыс отмечались только при длительности эксперимента 60 суток;

4. средних связей было обнаружено больше, чем сильных, однако, меньше, чем слабых во все сроки эксперимента;

5. также во все сроки эксперимента сохранялись и слабые взаимосвязи между отделами МТ головного мозга.

Половозрелые животные. Как указывалось ранее, для выявления корригирующего действия силибора (70 мг/кг) при влиянии барбитуратов (фенобарбитон в дозе 30 мг/кг) на клетки ядер основных отделов МТ головного мозга использовались в эксперименте и половозрелые животные. Эксперимент длился 7, 15, 30 и 60 суток.

При микроскопии на препаратах указанной экспериментальной группы (IIC) на 7 сутки эксперимента, в отличие от контроля, у большинства нейронов всех ядер обоих групп МТ головного мозга выявлены такие же изменения обратимого характера, как и в группах неполовозрелых животных: увеличение размеров тела и ядра клеток, гиперхроматоз. Однако эти изменения были выявлены гораздо в меньшей степени. При этом тела клеток округлялись, контуры их нечеткие, а ядра в единичных нейронах эктопированы и просветлены. Ядрышки расположены чаще в центре ядра, иногда – эксцентрично. В отдельных клетках отмечаются признаки острого набухания – вакуолизация цитоплазмы, перицеллюлярный отек. Со стороны макроглии отмечается незначительное усиление пролиферативных процессов.

Полученные при морфометрии данные показали, что в экспериментальной группе животных, по сравнению с контрольной, на 7 сутки в обоих отделах МТ головного мозга статистически достоверных изменений цифровых параметров выявлено не было.

В средние сроки эксперимента (15 суток) неспецифические изменения нервных клеток изучаемых ядер МТ по морфологическим характеристикам были сопоставимы с таковыми при эксперименте 7 суток. В данный период наблюдались гиперхромные клетки и с гидропическими изменениями (набухшие, имеющие вакуоли в цитоплазме). Иногда на значительном расстоянии от тел нейронов определялись отростки. Нередко вокруг нейронов группировались (до 5 и более) клетки глии (рис. 3.56-3.57).

Полученные при микроскопии визуальные данные подтверждались данными морфометрии. Так, в базо-латеральном отделе МТ статистически достоверный характер носило увеличение плотности общей глии с 2361,13 ± 3,09 до 2542,35 ± 5,2 (t = 3,46; Р < 0,05) и сателлитной с 829,09 ± 3,39 до 956,5 ± 5,4 (t = 3,31; Р < 0,05). Изменения других цифровых показателей не достигали достоверных величин. В ядрах кортико-медиального отдела МТ на 15-е сутки наиболее существенные изменения отмечались по следующим показателям: увеличивалась площадь клеток с 67,26 ± 0,08 до 74,75 ± 0,13 (t = 3,21; Р < 0,05) и их ядер с 4,76 ± 0,03 до 5,3 ± 0,05 (t = 2,39; Р < 0,05). Отмечалось увеличение количества сателлитной глии с 848,82 ± 2,2 до 934,33 ± 4,26 (t = 3,64; Р < 0,05). По остальным показателям статистически достоверная разница не обнаружена. Таким образом, на 15-е сутки наиболее существенные изменения изучаемых показателей нейронов при влиянии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором происходили только в ядрах кортико-медиального отдела, а глии – в ядрах обоих отделов МТ. Из вышеприведенного следует, что, видимо, наиболее

Рис. 3.56. Микрофотография. Центральное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга половозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Утолщение отростков.

3. Сателлитоз.

Рис. 3.57. Микрофотография. Латеральное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга половозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг и коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Утолщение отростков.

2. Сателлитоз.

ранимыми были ядра кортико-медиального отдела МТ головного мозга крыс неполовозрелого возраста, где появлялись статистически достоверные изменения цифровых показателей и нейронов, и глии.

Вышеперечисленные морфологические изменения в ядрах основных отделов МТ головного мозга крыс при воздействии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором также были выражены и в более длительные сроки эксперимента, то есть на 30 сутки. В ряде нервных клеток изучаемых ядер обоих отделов МТ изменения носили обратимый характер: размеров ядра и ядрышка, их эктопия, околоядерный хроматолиз, набухание, наличие мелких и крупных вакуолей в цитоплазме, перицеллюлярный отек, гиперхроматоз. В то же время накапливались и дистрофически измененные нейроны: сморщенные, уменьшенные в размерах, с четкими контурами и вытянутой веретенообразной формой. Ядра последних часто палочковидные, плохо или совсем неразличимы. Вокруг нервных клеток нередко отмечалось увеличение количества макроглии (рис. 3.58-3.59).

На 30 сутки эксперимента в ядрах базо-латерального отдела МТ головного мозга половозрелых крыс при влиянии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором наблюдалось уменьшение количества нервных клеток с 1561,24 ± 2,89 до 1180,62 ± 9,42 (t = 4,89; Р < 0,05). Со стороны глии – увеличение плотности общей глии с 2236,67 ± 3,64 до 2635,84 ± 6,5 (t = 3,67; Р < 0,05) и глиального индекса с 1,44 ± 0,11 до 2,23 ± 0,48 (t = 2,75; Р < 0,05). Указанные изменения являлись статистически достоверными (по остальным морфометрическим показателям изменения носили недостоверный характер). В кортико-медиальном отделе МТ отмечено увеличение площади нервных клеток с 63,6 ± 0,1 до 71,45 ± 0,2 (t = 4,34; Р < 0,05), уменьшение количества нейронов с 1561,24 ± 4,83 до 1050,88 ± 8,63 (t = 4,735; Р < 0,05), увеличение плотности сателлитной глии с 909,68 ± 3,33 до 1046,84 ± 9 (t = 4,937; Р < 0,05) и глиального индекса с 1,08 ± 0,07 до 1,22 ± 0,08 (t = 3,155; Р < 0,05). Как видно, по всем вышеперечисленным показателям изменения носят статистически достоверный характер (изменения других изучаемых показателей

Рис. 3.58. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга половозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг и коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Гиперхроматоз.

Рис. 3.59. Микрофотография. Латеральное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга половозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг и коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Перицеллюлярный отек.

2. Утолщение отростков.

3. Сморщивание нейронов.

4. Клетки-тени.

статистически недостоверны). Таким образом, на 30 сутки эксперимента статистически достоверные изменения цифровых показателей нейронов и клеток макроглии характерны для ядер обоих отделов МТ головного мозга крыс половозрелого возраста при действии фенобарбитона (30 мг/кг) с коррекцией силибором. При этом наиболее ранимыми представлялись ядра кортико-медиального отдела, где статистически достоверных изменений цифровых показателей было выявлено больше.

При увеличении сроков эксперимента до 60 суток в нервной ткани изучаемых ядер МТ у половозрелых животных наблюдались признаки и репаративного процесса. Морфология нейронов в основном нормализовалась: восстанавливались ядро и ядрышко, отмечалось новообразование нисслевского вещества, исчезали признаки набухания. Со стороны глии отмечались пролиферация и активация, перинейрональный сателлитоз (рис. 3.60). На 60-е сутки в базо-латеральном отделе МТ статистически значимых изменений изучаемых параметров клеток не обнаружено. В кортико-медиальном отделе МТ наблюдалось увеличение количества общей глии с 1658,99 ± 2,63 до 1760,45 ± 7,76 (t = 5,087; Р < 0,05). Вышеуказанные показатели являлись статистически достоверными. По остальным морфометрическим показателям изменения не достигали достоверности.

Для более глубокого анализа обнаруженных нами в эксперименте морфологических изменений был использован корреляционный анализ. С его помощью выяснялось, как изменится взаимосвязь показателей, характеризующих состояние ядер основных отделов МТ головного мозга крыс половозрелого возраста при воздействии фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Анализ включал 2 изучаемых отдела МТ и 9 показателей клеток изучаемой структуры головного мозга.

При исследовании корреляционных связей между ядрами базо-латерального и кортико-медиального отделов МТ головного мозга половозрелых крыс на 7 сутки эксперимента взаимосвязей сильной степени между исследуемыми отделами МТ мы не наблюдали. Взаимосвязь средней

Рис. 3.60. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга половозрелой крысы на 60 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг и коррекцией силибором. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Активация и пролиферация глии.

3 Сателлитоз.

силы (0,3 < r < 0,7) отмечалась по показателю плотности общей глии. По остальным изучаемым показателям наблюдали слабую взаимосвязь (r < 0,3).

Для более глубокого анализа обнаруженных нами в эксперименте морфологических изменений был использован корреляционный анализ. С его помощью выяснялось, как изменится взаимосвязь показателей, характеризую­щих состояние ядер основных отделов МТ головного мозга крыс половозрелого возраста при воздействии фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором. Анализ включал 2 изучаемых отдела МТ и 9 показателей клеток изучаемой структуры головного мозга.

При исследовании корреляционных связей между ядрами базо-латерального и кортико-медиального отделов МТ головного мозга половозрелых крыс на 7 сутки эксперимента взаимосвязей сильной степени между исследуемыми отделами МТ мы не наблюдали. Взаимосвязь средней силы (0,3 < r < 0,7) отмечалась по показателю плотности общей глии. По остальным изучаемым показателям наблюдали слабую взаимосвязь (r < 0,3).

На 15 сутки эксперимента сильная корреляционная связь (0,7 < r < 1,0) обнаружена между отделами МТ только по показателю площади сечения нейронов. Средней силы связи (0,3 < r < 0,7) установлены по показателям плотности общей глии, перинейронального индекса и глиального индекса. По остальным показателям была выявлена слабая взаимосвязь (r < 0,3).

На 30-е сутки эксперимента сильных связей между исследуемыми параметрами выявлено не было. Связи средней силы (0,3 < r < 0,7) были отмечены по показателям плотности нейронов, общей и сателлитной глии, глиального индекса и интерглиального коэффициента. Остальные связи были

зафиксированы как слабые.

На 60 сутки эксперимента сильных взаимосвязей (0,7 < r < 1,0) между ядрами основных отделов МТ головного мозга крыс не обнаружено. Средней силы связи (0,3 < r < 0,7) выявлены по показателям плотности нейронов, глиального индекса и интерглиального коэффициента. По остальным показателям установлена слабая взаимосвязь (r < 0,3).

Сравнивая корреляционные связи ядер отделов МТ головного мозга половозрелых крыс контрольных и экспериментальных групп, можно отметить, что происходит изменение силы взаимосвязей, как по количеству, так и по качеству.

Анализ корреляционных связей позволил сделать следующие выводы:

1. воздействие фенобарбитона в дозе 30 мг/кг с коррекцией силибором на ядра основных отделов МТ головного мозга половозрелых крыс изменяет характер и силу взаимосвязей между обоими отделами изучаемой структуры мозга;

2. по сравнению с контрольными группами во все сроки эксперимента изменяется характер и сила взаимосвязей между ядрами отделов МТ в сторону ослабления в экспериментальных группах;

3. сильные взаимосвязи между отделами МТ головного мозга отмечались при длительности эксперимента 15 и 60 суток;

4. средних связей было обнаружено больше, чем сильных, и слабых на 15 и 30 сутки эксперимента;

5. слабые взаимосвязи между отделами МТ головного мозга сохранялись в каждом сроке эксперимента.