Технологическая схема стадий подготовки посевного материала и культивирования продуцента тилозина

Принципиальная технологическая схема микробиологического производства тилозина для ста­дий подготовки посевного материала и культивирования показана на рис. 7.

Питательную среду для культивирования микроорганизмов в аппаратах готовят в смесителях 8 и 9, где все компоненты среды из сборников 4, 5 та 6 вносят в воду, подаваемую из сборника 10, тща­тельно перемешивают, при необходимости заваривают, и корректируют значение pH с помощью титрующего раствора из сборника 7.

Воздух, подаваемый в инокулятор, посевной аппарат и ферментер, проходит через головной фильтр 18, индивидуальные воздушные фильтры 19, 23 и 27, а отработанный воздух — через фильтры на выходе из аппаратов 21, 25 и 32.

Косяки 1-й и 2-й генерации, лиофильно высушенные образцы культур, предварительно засе­янные на косяки или вегетативную культуру, хранившуюся при температуре + 5 °С, рассевают на чашки Петри 1 с агаризованной средой. После проверки в колбах на качалке активности от­дельных моноизолятов, выросших на чашках Петри 1, высокоактивную вегетативную культуру штамма-продуцента, предназначенную для выращивания в аппаратах, хранят при температуре + 5 °С в пробирках или матрацах 2.

В начале производственного цикла ферментации проводят рассев вегетативной культуры в колбы для выращивания на качалке 3 материала, которым засевают инокуляторы. Из инокулято- ра производят засев посевного аппарата, а из него — ферментера.

Культивирование штаммов-продуцентов в колбах, инокуляторе и посевном аппарате ведут при температуре 28-30 °С, в ферментере — при температуре 28 ± 1 °С. Время выращивания посевного материала в колбах, инокуляторе и посевном аппарате составляет 1—2 суток, в течение которых происходит значительное увеличение концентрации биомассы продуцентов.

Время культивирования в ферментере определяется динамикой накопления тилозина в культуральной жидкости. По ходу процесса в ферментер из сборников 10 л 28 через стерилиза­торы 11 и 30 л мерники 12, 29 и 31 при необходимости подают пеногаситель, растительное мас­ло и воду. Процесс культивирования останавливают, когда практически прекращается биосин­тез тилозина.

Культуральную жидкость из ферментера перекачивают в приемную емкость, откуда она посту­пает на обработку. Кроме тилозина культуральная жидкость содержит некоторые количества дру­гих веществ, синтезированных микроорганизмами, биомассу продуцентов и неутилизированные остатки питательных веществ.

Простейшая технология обработки культуральной жидкости состоит в ее упаривании и вы­сушивании содержащихся в ней веществ. Соответствующий продукт содержит несколько про­центов тилозина. Более сложные технологии позволяют либо увеличить содержание тилозина в продуктах, либо выделить тилозин в чистом виде, обычно в виде солей винной или фосфорной кислоты.

Дополнительная литература

1. Вторичный метаболизм Str. fradiae и регуляция биосинтеза тилозина циклическим АМФ // РЖ. 04Р1, Биотехнология. Отд. вып. / ВИНИТИ. — 1995. — № 3. — 21 стр. — Реф ст.: TataM., Menawat A.S. Cyclic AMP regulacion of tylosin biosynthesis and secondary metabolisms in Str. fradiae // Biotechnol. and Bioeng. — 1994. — 44. — Ns 3. — P. 283-290.

2. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. Учебник. 5-е дополненное изд./М.: Изд-во МГУ, 1994. — 512 стр.

3. Сгибнева С.В., Чурбанов В.Г., Юдакова Е.Н. и др. Изучение влияния биохимических показате­лей культуральной жидкости продуцента тилозина на свойства обезвоженного концентрата. Би­отехнология. — 1991. — № 2. — 30-33 стр.

Контрольные вопросы

1. Каков механизм действия антибиотика тилозина?

2. Для каких целей используется тилозин?

3. Расскажите о физико-химических свойствах и методах определения тилозина.

4. Перечислите товарные формы тилозина.

5. Какие микроорганизмы продуцируют тилозин и каковы особенности поддержания штаммов продуцентов ?

6. При каких условиях культивируют продуцентов тилозина?

7. Расскажите об особенностях технологии производства тилозина.