Трансформация
17. К аликвоте (100 мкл) свежеразмороженных компетентных клеток добавьте 1/2 объёма лигазной смеси.
15. Инкубируйте 30 мин во льду.
18. Инкубируйте 1 мин при 42°С (heat-shock).
Внимание! Используйте для этой процедуры водяной термостат. Сухой термостат не годится.
19. Поместите в лед на 5-10 мин.
20. Добавьте 300 мкл теплой среды LB без антибиотика, инкубируйте 45 мин в сухом термостате при 37°С для подращивания бактерий.
21. Рассейте клетки на чашки Петри с 1,5% LB-агаром с ампициллином (50 мкг/мл). Распределите клетки по среде шпателем (тщательно разотрите), подсушите чашки 5-10 мин с открытой крышкой, после чего поставьте на ночь в термостат на
37°С.
Внимание! В термостате чашки Петри следует размещать дном кверху, чтобы капли конденсирующейся жидкости оказались на крышке, а не на поверхности агара.
Еще по теме Трансформация:
- Трансформация
- Трансформации энергии.
- 9.3. Трансформация клеток Escherichia coli.
- Реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ)
- б.Трансформация продуктов разрыва кольца в полупродукты цикла Кребса.
- Естественная и антропогенная трансформация Прикаспийского песчаного очага чумы.
- Патогенез
- Получение бета-ЦД методами контролируемой конверсии
- Генетические аспекты детской онкологии
- 341. Ангиоиммунобластная Т-клеточная лимфома.
- Инактивация генов-супрессоров
- ГЛАВАЗ ВЛИЯНИЕ ПОЛА И ВОЗРАСТА БОЛЬНЫХ МИБЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ НА ТЕЧЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
- ВЫВОДЫ
- Нарушение усвоения ритма.
- СОДЕРЖАНИЕ
- Терапия малыми дозами цитозара и полихимиотерапия.
- Хронические лейкозы