2.4 Медиаторы иммунного ответа

Многочисленные исследователи оценивали роль цитокинов в борьбе с инфекцией, вызванной С. neoformans [239, 50, 140]. Макрофаги способны продуцировать широкий спектр провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, IL-1 и IL-12 [82].

51, 222, 24, 158, 160].

В последнее время появились данные о том, что макрофаги имеют различные эффекторные свойства. Так при взаимодействии с определенными инфекционными агентами макрофаги продуцируют IL-12 и IL-18, которые активируют естественные киллеры и Т-лимфоциты к продукции интерферон-γ (IFN-γ). IFN-γ совместно с TNF-α, являясь основными цитокинами, активирующими микробоцидные механизмы макрофагов, индуцируют NO- синтазу макрофагов. Такие макрофаги считаются классически активированными макрофагами, и их главной функцией является очищение организма от патогенов. Роль классически активированных макрофагов в защите организма от внутриклеточных патогенов представлена в нескольких исследованиях [239, 232,

21,46]. Так было установлено, что длительность жизни у мышей, фагоцитарные клетки которых не продуцировали IL-12, после инфицирования криптоккоками была ниже, по сравнению с контрольными мышами [150]. Введение IL-12 мышам снижает пролиферацию грибов в органах и увеличивает выживаемость мышей, инфицированных С. neoformans [66, 131, 117]. Кроме того, была показана роль

другого провоспалительного цитокина, фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), при моделировании экспериментальной криптококковой инфекции. Установлено, что TNF-α повышает фагоцитарную и киллерную активность макрофагов по отношению к C.

Известно, что дифференцировка Т-лимфоцитов в Th2 индуцируется IL-4 и IL-13 [245, 23, 89]. Причем именно эти два тесно связанных цитокина [64, 94] принимают участие в регулировании функциональной активности макрофагов [195]. Принципиальной особенностью данной группы цитокинов является то, что IL-4 и IL-13 вызывают развитие альтернативно активированных макрофагов (aaМФ) [128]. Их значение в характере исхода инфекционного процесса было установлено в экспериментальных исследованиях. Показано, что при заражении мышей Leishmania major [155,38], способность этого внутриклеточного патогена стимулировать трансформацию классически активированных макрофагов (каМФ) в aaMФ была связана с повышением чувствительности эксперементальных животных к инфекции. Особенностью aaМФ является то, что эти макрофаги не продуцируют реактивные промежуточные метаболиты азота, но характеризуются повышенным уровнем аргиназы-1, экспрессией IL-4R, маннозного рецептора

(CD206) и протеина семейства хитиназы YM1, и приобретали этот фенотип после обработки IL-4 и IL-13 in vitro [225, 128].

100,112]. В одной из экспериментальных работ на трансгенных мышах было показано, что повышенная продукция IL-13 у генномодифицированных животных приводила к значительному снижению их резистентности к криптококковой инфекции, о чем свидетельствовало снижение выживаемости мышей и повышение пролиферации грибов в легочной ткани. Следует отметить, что повышенная продукция IL-13 у трансгенных мышей не имела обратной корреляционной связи с функциональной активностью Th1, оцениваемой по продукции IFN-γ. Также в другом исследовании не было установлено влияния IL-

4 и IL-10 на продукцию IFN-γ [100]. Выработка IFN-γ оказалась аналогичной между устойчивыми и восприимчивыми линиями мышей к криптококкозу. Таким образом, был сделан вывод, что Тh2-ассоциированные цитокины имеют большое значение в развитии и исходе криптококкоза легких у экспериментальных животных. Только в отсутствие этих цитокинов, IFN-γ в состоянии оказывать стимулирующее влияние на фунгицидную активность макрофагов. Это обусловлено тем, что кроме рецепторов к TNF-α и IFN-γ, макрофаги экспрессируют IL-4R 2 типа, которые связываются с IL-4 и IL-13 и могут индуцировать развитие aaMФ [100]. Развитие ааМФ, как представляется, может быть маркером предрасположенности к криптококкозу.

хитин, который является важным компонентом клеточной стенки С. neoformans [21], может вызывать повышенную продукцию IL-4 эозинофилами и базофилами, что опосредовало активацию альтернативно активированных макрофагов [63]. Существенно меньше исследований посвящено исследованию способности грибов активировать макрофаги к продукции данного цитокина in vitro.

Во многих экспериментальных исследованиях большое внимание уделялось изучению роли противовоспалительных цитокинов в развитии иммунного ответа при криптококковой инфекции. Известно, что IL-10 продуцируется различными клетками, в том числе альтернативно и классически активированными макрофагами, дендритными клетками, В-лимфоцитами и регуляторными Т- лимфоцитами [111, 129]. Blackstock R. и cоавторы продемонстрировали, что продолжительность жизни генетически модифицированных мышей, клетки которых лишены способности продуцировать IL-10, была больше по сравнению с контрольными мышами после инфицирования С. neoformans [96]. Также установлено, что у мутантных по IL-10 мышей был повышен уровень продукции IL-12, TNF-α и снижен IL-4 [100]. Однако существенно меньше работ посвящено изучению способности криптококков индуцировать продукцию этого цитокина in

vitro.

В последние годы открыто новое семейство IL-17 и изучается их влияние на течение инфекционных процессов, вызванных различными патогенами. IL-17 активируют клетки к защите от внеклеточных микроорганизмов [142] за счет индукции медиаторов воспаления, таких, как TNF-α, IL-1β, IL-6 рассмотрены в [200], а также Г-КСФ, который вызывает хемотаксис нейтрофилов в место инфекции [182,145]. Т-лимфоциты, NКТ-клетки, NK-клетки и нейтрофилы способны вырабатывать IL-17 [210, 142, 146, 147, 168, 148, 144, 143]. Цитокины TGF-β, IL-6 или IL-21 необходимы для индукции Тh17 из наивных CD4+ Т-клеток мышей, а IL-23 поддерживает их пролиферацию. IL-6 способствует дифференцировке Th17, но ингибирует синтез TNF-α и IL-1β [19].

Роль IL-17 в развитии грибковых инфекции противоречива [161, 233].

Показано, что IL-17, способен как повышать резистентность, так и усиливать

чувствительность к различным грибковым патогенам. Нейтрализация моноклональными антителами IL-23 или IL-17 в течение экспериментального диссеминированного кандидоза и кандидоза полости рта, а также при легочном аспергиллезе усугубляла патологию. У этих экспериментальных животных снижалась нейтрофильная инфильтрации, увеличивалось количество грибов в органах и тканях и снижались уровни хемокинов в органах мишенях [254, 233,

272]. IL-17 также связывают с защитой от пневмоцистной инфекции [162]. Противоположные данные показали, что активация Th17 клеток усиливала иммунопатологическое воспаление и замедляла очищение от грибов при экспериментальном криптококкозе, легочном аспергиллезе и кандидозе желудочно-кишечного тракта [149]. При моделировании экспериментальной криптококковой инфекции установлено, что увеличение продукции IL-17А связано со снижением выделения криптококков из органов у экспериментальных мышей после заражения грибами [94, 422, 43]. Выявлено, что добавление IL-17 к макрофагам, инкубированным с C. neoformans in vitro, способствовало снижению пролиферации дрожжей в фагоцитах по сравнению с обработкой их IL-4 и IL-13. Однако нет данных об исследованиях, посвященных изучению влияния разных по вирулентности штаммов грибов к индукции макрофагов к продукции IL-17.