Культивирование трихомонад мочеполовых органов.

Культивирование T. vaginalis представляет особенно ценный метод диагностики трихомониаза у мужчин, атакжехроническихформ этого заболевания у женщин, когда трихомонад в исследуемых выделениях очень мало.

Среда на мясо-пептонном бульоне. K мясо-пеп- тонному бульону (pH = 6,0) добавляют 1% глюкозы и 5—10% инактивированной сыворотки крови человека или лошади. После посева, в целях торможения роста бактерий, в пробирки вносят пенициллин в количестве 300 ЕД и стрептомицин 200ЕД на 1 мл среды. Инкубация производится при 36—37°. Трихомо- нады накапливаются в значительных количествах ко 2—3-му дню после посева, иногда позднее (на 4—6-й день).

Среда Павловой. Способ приготовления ее следующий: растворяют хлористого натрия 4,25 г, двузамещенного фосфорнокислого натрия Na2HPO4^H2O — 0,3 г, однозамещенного фосфорнокислого калия KH2PO4 — 0,23 г в 500 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют в автоклаве, разливают в пробирки по 9,5 мл и после охлаждения добавляют в каждую пробирку по 0,5 мл лошадиной сыворотки.

Среда Джонсона-Трассела является наиболее подходящей как для диагностических целей, так и для длительного культивирования в безбактериальных условиях. Состав среды следующий: пептона — 32 г, arapa—1,6 г, цистеина солянокислого— 2,4 г, мальтозы—1,6 г, печеночного экстракта — 320 мл, раствора Рингера — 960 мл, IN NaOH—11 —13 мл. Смесь такого состава нагревают на водяной бане до расплавления агара, фильтруют в горячем состоянии через фильтровальную бумагу, к фильтрату добавляют 0,7 мл 0,5% раствора метиленовой синьки и доводят pH среды до 5,8—6,0.

Среду разливают в пробирки по 9 мл, закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве. Перед посевом в каждую пробирку доливают по 1 мл стерильной инактивированной сыворотки крови человека или лошади. Для подавления микрофлоры, угнетающей рост трихомонад, в засеваемые пробирки добавляется пенициллин и стрептомицин по 2500 ЕД каждого на 1 мл среды. Максимальный рост трихомонад при 36—37° наблюдается на 2—4-е сутки.

Ha основе указанной среды предложены различные ее модификации (Ю. X. Tepac, 1955; Б. А. Теохаров, 1957; Б. В. Вершинский, 1958) упрощенного состава, широко применяемые в практике. Для культивирования. T. vaginalis предложено также большое число сред другого состава, которые применяются реже. Исследуемые выделения или осадок из культур засевают в количестве 0,3—0,5 мл. Материалы вносят на дно отдельной пипеткой в каждую пробирку со средой. За посевами наблюдают до 10 дней, просматривая пробирки микроскопически на 3, 5, 7 и 10-й день после посева.