Химические методы получения накопительных культур

Для каждого вида или группы бактерий разработаны селективные питательные среды, содержащие вещества, более или менее эффективно подавляющие рост сопутствующей микрофлоры и не влияющие на рост искомого микроорганизма.

Селективные среды могут быть жидкими, плотными, полужидкими. Жидкие селективные среды еще называют средами обогащения, или накопительными. При их использовании параллельно исследуемый материал высевают на среду обогащения, например для выделения сальмонелл на среды Раппопорт или Кауфмана и на какую-либо плотную среду: Эндо, Плоскирева и т.д. При отсутствии колоний сальмонелл на плотных средах и наличии роста в среде обогащения, с присутствием типичных по морфологическим и тинкториальным свойствам клеток из среды обогащения делают дробный высев на плотную среду в чашках Петри. Такой подход позволяет увеличить чистоту изоляции искомого микроорганизма из исследуемого материала. К тому же надо учитывать, что в большинстве случаев жидкие среды превосходят по чувствительности плотные. Посев материала на достаточно эффективные плотные среды такого типа позволяет обычно получить изолированные колонии искомого микроорганизма с присутствием гораздо меньшего количества колоний контаминантов, чем при посеве на обычные плотные питательные среды.

Многие питательные среды для первичного культивирования сочетают в себе характеристики селективных и дифференциально-диагностических. В некоторых случаях прибегают к обработке материала перед посевом на питательные среды химическими веществами, уничтожающими сопутствующую микрофлору, еще на этой стадии микробиологического исследования (например, при диагностике микобактериозов, микоплазмозов и т.д.).

Рецепты питательных сред с селективными добавками приведены в действующих технических нормативных правовых актах при рассмотрении вопросов микробиологической диагностики конкретных бактериозов. Например, для выделения культур стафилококков используют среды с повышенным содержанием натрия хлорида, натрия теллурита, фенилэтанола; стрептококков — среды с азидом натрия, теллуритом калия, антибиотиками (налидиксовая кислота, полимиксин, неомицин); энтерококков – среды с желочью, ацетатом таллия; микобактерий туберкулеза – обработка материала в растворе щелочи и N-ацетил-альфа-цистеина, растворе кислот, добавление в среды трифениловых красителей (малахитовый зеленый); сальмонелл – добавление в среды натрия селенита и т.д.