7.3. Метилчувствительная ПЦР со специфическими праймерами.

Обработанную метилчувствительными рестриктазами геномную ДНК (50-100 нг) амплифицировали с использованием ген-специфических праймеров (табл. 2). Реакцию проводили в конечном объеме 25 мкл в следующих условиях: 1 буфер для ПЦР, 2 мМ MgCl2, 200 мкМ каждого из четырех дезоксинуклеотид-трифосфатов, 10 пмоль каждого праймера и 1 ед. акт. Taq ДНК-полимеразы ("НИИ Биоорганической химии", Россия). Амплификация проходила при следующем режиме: 94°C 15 сек, соответствующая для пары праймеров (см. табл. 2) 30 сек, 72^ 40-60 сек, - 30-35 циклов. В случае праймеров к гену /З3Л-адаптина реакцию проводили в присутствии 5% формамида. Выявление продуктов ПЦР проводили методом электрофореза в агарозном геле.