ИММУНОАНАЛИЗ СЫВОРОТОК ПАЦИЕНТОВ С РАКОМ КИШЕЧНИКА И ЗДОРОВЫХ ПАЦИЕНТОВ НА ГЛИКОЧИПАХ

Бутвиловская В.И.1, Поплетаева С. Б.1, Зубцова Ж.И.1, Зубцов Д.1,

Шилова Н.В.2, Бовин Н.В.2, Рубина А.Ю.1

1Институт Молекулярной Биологии им.В.А.Энгельгардта РАН;

2Институт Биоорганической Химии им.М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, г.Москва

Задача исследования: Создать биологический микрочип (биочип), с иммобилизованными онкоассоциированными сахаридами для диагностики рака кишечника.

Материал и методы: По технологии, разработанной в ИМБ РАН, изготовлена серия биочипов, гелевые элементы которых содержали иммобилизованные сахариды, ассоциированные с раком кишечника (Р1, Tn, LeY, TF, SiaTn, SiaLeA, Mb4Gn). Суммарный уровень иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM) в сыворотках крови (100 здоровых доноров и 30 пациентов с раком кишечника) к указанным выше сахаридам определяли методом иммуноанализа с флуоресцентной регистрацией сигнала на биочипах. Регистрацию и расчет интенсивности флуоресцентного сигнала от каждой ячейки проводили с помощью флуоресцентного анализатора биочипов (ИМБ РАН). В группе больных раком кишечника также измеряли концентрации онкомаркеров РЭА и СА 19-9 методом ИФА с использованием наборов «CanAg-Fujirebio».

Результаты: Определена норма содержания иммуноглобулинов в сыворотке здоровых доноров для каждого онкоассоциированного сахарида. Показано, что для сывороток пациентов с раком кишечника превышение концентрации уровня антител над нормой хотя бы по одному онкоассоциированному сахариду наблюдается в 21 случае из 30. В тех же образцах сывороток крови методом ИФА измерена концентрация СА 19-9 и РЭА и показано, что из 30 онкологических сывороток только в 5 случаях наблюдается превышение концентраций РЭА или СА 19-9 по сравнению с нормой.

Выводы: Определение уровня иммуноглобулинов к онкоассоциированным сахаридам в формате биочипа может быть рекомендовано для дополнительной диагностики рака кишечника совместно с определением концентрации РЭА и СА 19-9 в сыворотке пациента.