Количественное определение содержания суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон методом спектрофотометрии

С целью количественного определения суммы флавоноидов в траве и настойке тархуна изучена возможность использования методов прямой и дифференциальной спектрофотометрии [55, 152].

Исходы из вышепроведенных исследований (глава 4, табл.

Количественное определение суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон

С целью количественного определения суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон изучена возможность использования методов прямой и дифференциальной спектрофотометрии [152, 154].

Изучение УФ-спектров извлечений из травы полыни эстрагон (рис. 28) показало, что в кривой поглощения имеется максимум поглощения при длине волны около 290 нм, характерный для флаванонов (рис. 28, кривая поглощения 1). При использовании данной аналитической длины волны (прямая спектрофотометрия) имеет место вклад сопутствующих веществ в оптическую плотность анализируемых растворов, что выражается в завышении результатов анализа (5,30 % в пересчете на ГСО пиностробин).

Содержание суммы флавоноидов (X) в траве тархуна в пересчете на пиностробин (стандартный образец, близкий по спектральным характеристикам к пиноцембрину) абсолютно сухое сырье рассчитано по формуле:

D х V х Vi х V₂ х 100 х 100 D х 40 х 25 х 25 х 100 х 100

Х =------------------------------------------------- =--------------------------------------- ,

тх700х 5х (100-W) т х700х 5х (100-W)

где D - оптическая плотность раствора Б;

V - объем экстракта; мл

Vi - объем раствора А; мл

V2 - объем раствора Б; мл m - масса сырья в граммах;

W - потеря в массе при высушивании;

700 - удельный коэффициент поглощения пиностробина.

С целью изучения возможности использования дифференциальной

спектрофотометрии нами изучены УФ-спектры исходного раствора (рис.

2). Результаты исследования показывают, что в качестве аналитической длины волны может быть использован максимум поглощения при 404 нм (рис. 28, кривая поглощения 3), обусловленный комплексом эстрагонозида и других флавоноидов с А1С1з, причем в качестве стандартного образца в методике количественного определения флавоноидов целесообразно использовать ГСО рутин, имеющий максимум поглощения (412 нм) (рис. 28, кривая поглощения 4), близкий с таковым эстрагонозида.

УФ-спектры растворов извлечений из травы полыни эстрагон (1-3) и ГСО рутина (4)

—•—Опыт1

—•— Опыт 2 (с AICI3)

......... Опыт 3 с (AICI3)

--------- Опыт 4 (рутин с AICI3)

--------- Опыт 5 (раствор

пиностробина)

Рис. 28.

Обозначения:

По оси ординат - оптическая плотность;

По оси абсцисс - длина волны, нм.

1 - раствор извлечения на фоне 95 % этилового спирта (1:5000);

2 - раствор извлечения в присутствии А1С1з на фоне 95 % этилового спирта (1:5000);

3 - дифференциальная кривая поглощения (раствор извлечения в присутствии А1С1з на фоне извлечения, 1:1000);

4 - дифференциальная кривая поглощения 0,0016 % раствора ГСО рутина (+А1С1з на фоне раствора ГСО рутина).

Результаты количественной оценки содержания суммы флавоноидов в пяти различных образцах сырья, заложенных на хранение в течение 3-х лет, показал, что этот показатель колеблется в пределах от 1,1 % до 1,50 % (табл. 15). Следовательно, в качестве нижнего предела можно рекомендовать показатель 1 % (в пересчете на рутин).

Таблица 15

Содержание суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон, определенное методом дифференциальной УФ-спектрофотометрии

Результаты проведенных спектрофотометрических исследований исследований позволяют предложить методику количественного определения суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в траве полыни эстрагон.

Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл 70 % этилового спирта и взвешивают. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Затем содержимое колбы охлаждают, доводят массу колбы с

по

содержимым до первоначальной, фильтруют через бумажный фильтр с красной полосой.

1 мл извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 2 % -го раствора А1С1з, доводят объем раствора до метки 95 % этиловым спиртом (раствор А комплекса) и через 30 мин измеряют оптическую плотность при длине волны 404 нм. В качестве раствора сравнения используют раствор А, полученный аналогичным образом, но без добавления раствора А1С1₃.

Параллельно проводят опыты с ГСО рутина, имеющий близкий максимум поглощения (408 нм), используя точную навеску (около 20 мг), которую растворяют в 50 мл 70 % этилового спирта (раствор А).

Методика приготовления раствора ГСО рутина.

0,02 г (точная навеска) ГСО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют вещество в 40 мл 70 % этилового спирта и раствор доводят до метки.

Содержание суммы флавоноидов (X) в траве тархуна в пересчете на рутин (стандартный образец, близкий по спектральным характеристикам к флавоноидам) абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле:

DxmoxV х Vi х 100 х 100 х 1 Dxm