Выделение веществ из травы полыни эстрагон (тархун), культивируемой в Самарской области.

Из травы полыни эстрагон методом колоночной хроматографии нами были выделены и изучены 7 соединений: вещество 1, вещество 2, вещество 3, вещество 4, вещество 6, вещество 7 [55, 120, 152, 155, 186].

Эффективного разделения и очистки веществ в методе колоночной хроматографии удалось достичь чередованием сорбентов - силикагель, полиамид, сефадекс LH-20 - и соответствующих растворителей (табл. 5- 12). Контроль за элюированием веществ вели с помощью ТСХ-анализа на пластинках “Силуфол - 254 УФ”, ’’Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ”, “Сорбфил ПТСХ-А-А-УФ” в различных хроматографических системах (A-G).

Измельченное до размеров частиц 7 мм воздушно-сухое сырье (100,0 г) подвергали исчерпывающему экстрагированию 70 %-ным спиртом, сочетая при этом способ мацерации (24 ч) с последующей термической экстракцией (с обратным холодильником) при температуре 85-90 °С в течение 30 мин. Водно-спиртовые экстракты упаривали под вакуумом до густого остатка (около 100 мл), который смешивали с 40 г силикагеля, высушивали и вносили в колонку (8x4 см), заполненную силикагелем в виде взвеси в гексане. Вещества элюировали гексаном, смесью гексан- хлороформ в соотношении 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 80:20, 50:50, 40:60, 20:80, а затем хлороформом и смесью хлороформ-этанол в соотношении 99:1, 98:2, 97:3, 95:5, 90:10, 80:20, 70:30. Контроль за элюированием веществ осуществляли хроматографированием на пластинках “Силуфол УФ 254” в системе А, В. Из упаренных элюатов (колонка 1) всего было получено 70 фракции, соединения которых после предварительного ТСХ-

анализа подвергались дальнейшей очистке рехроматографией {вещество 2

- на колонке № 2 - табл. 6; вещество 3 - на колонке № 2 и колонке № 3 - табл.

- на колонке № 2 и колонке № 3 - табл. 10; вещество 8 - на колонке № 2 и колонке № 3 - табл. 11).

Для выделения вещества 1 оказалось достаточно колонки № 1 на силикагеле (табл. 5). Окончательную очистку вещества осуществляли перекристаллизацией веществ из этилового спирта [71, 155].

Таблица 5

Условия выделения вещества (1) из травы полыни эстрагон

Выделение вещества 2 проводили посредством колоночной хроматографии путем чередования сорбентов: силикагель и полиамид (табл. 6). Окончательную очистку данного соединения достигли в результате перекристаллизации его после колонки № 2 из водного спирта.

Таблица 6

Условия выделения вещества (2) из травы полыни эстрагон

Вещество 3 был получен с помощью колонки № 1 и дальнейшей рехроматографии на полиамиде и силикагеле.

проводили перекристаллизацией вещества из водного спирта после колонки № 3 (табл. 7).

Таблица 7

Условия выделения вещества (3) из травы полыни эстрагон

Препаративное выделение вещества 4 осуществлялось на колонке № 1 с последующей рехроматографией на полиамиде и силикагеле (табл. 8). Полную очистку вещества 4 проводили путем кристаллизации из смеси растворителей ХЛФ-гексан.

Таблица 8

Условия выделения вещества 4 из травы полыни эстрагон

Вещество 5 получено в условиях кислотного гидролиза вещества 1 (таблица 9).

Таблица 9

Условия выделения вещества 5 из травы полыни эстрагон

Фенилпропаноид - вещество 7 [186] получен путем постановки 3-х хроматографических колонок: колонка № 1 - (силикагель), колонка № 2 - (сефадекс LH-20), колонка № 3 - (полиамид) (табл. 8). Полная очистка вещества достигнута перекристаллизацией из этилового спирта.

Таблица 10

Условия выделения вещества (7) из травы полыни эстрагон

Условия выделения фенолкарбоновой кислоты - вещества 8 представлена в табл.

Таблица 11

Условия выделения вещества 8 из травы полыни эстрагон

Для выделения вещества 6 из травы полыни эстрагон нами было исследовано эфирное масло растения. Эфирное масло полыни эстрагон получают методом перегонки с водяным паром. К 100,0 травы полыни эстрагон, заготовленной в 2002 г. на базе Средне-Волжской зональной опытной станции ВИЛАР (пос. Антоновка, Самарская область.), измельченной до размера частиц 7 мм, приливают 900 мл воды очищенной. Выход чистого эфирного масла после отделения его от дистиллята составил 0,34 мл. Эфирное масло из дистиллята, представляющего собой водно-масляную эмульсию (V=250 мл), получали методом высаливания (NaCl) с последующим извлечением эфирного масла диэтиловым эфиром, фильтрованием с безводным Na2SO4 и упариванием под вакуумом (отгонкой растворителя).

С целью сравнения компонентного состава нами проводилось хроматографирование исследование чистого эфирного масла и эфирного масла, выделенного из дистиллята, полученного вышеуказаным способом. Метод ТСХ-анализа показал идентичность обеих субстанций по

качественному составу. В связи с этим, нами были объединены два изучаемых образца эфирного масла (с целью увеличения массы вещества) и исследованы методом колоночной хроматографии на сорбентах: силикагеле и сефадексе LH-20 (табл. 12).

Таблица 12

Условия выделения вещества (6) из травы полыни эстрагон

Выводы

Методом колоночной хроматографии путем чередования сорбентов и соответствующих растворителей нами были выделены следующие соединения: флавоноиды - вещество 1 (Rf = 0,4), вещество 2 (Rf = 0,6), вещество 3 (Rf = 0,8), вещество 4 (Rf = 0,9), фенилпропаноиды - вещество 6 (Rf = 0,95), вещество 7 (Rf =0,48), фенолкарбоновая кислота - вещество 8 (Rf = 0,78). Вещество 5 (Rf =0,95) получено методом кислотного гидролиза и является новым агликоном, ранее неописанным в литературе.

3.7.