Качественный анализ препаратов (настой, настойка) и эфирного масла полыни эстрагон

Методом ТСХ-анализа нами изучены разрабатываемые лекарственные препараты {настой, настойка} и эфирное масло травы полыни эстрагон (рис. 31). Получение эфирного масла полыни эстрагон осуществляли в соответствии с фармакопейным методом 1 (метод Гинзберга) [31].

Изучаемые лекарственные средства хроматографировали в системе А на пластинках “Силуфол УФ-254”, а также ’’Сорбфил ПТСХ-П-А- УФ”, “Сорбфил ПТСХ-А-А-УФ”. Детекцию веществ осуществляли просматриванием пластинок в видимом свете, и в УФ-свете (при длине волны Х=254 нм, Х=366 нм) и последующим проявлением раствором

диазобензолсульфокислоты (ДСК). Все цвета веществ, представленных на хроматограмме, соответствует окраске после обработки реактивом ДСК (рис. 31). В качестве свиделелей использовали индивидуальные вещества, выделенные из сырья исследуемого растения: эстрагонозид, тархунозид, наригенин, пиноцембрин, метилэвгенол, цикориевая кислота, п-гидроксибензойная кислота [4, 67, 71].

С помощью ТСХ-анализа обнаружены основные вещества настоя и настойки полыни эстрагон: флавоноиды - эстрагонозид (Rf = 0,48), тархунозид (Rf = 0,6J, нарингенин (Rf = 0,8), пиноцембрин (Rf = 0,9), фенилпропаноиды - метилэвгенол (Rf = 0,95), цикориевая кислота (Rf = 0,4), а также фенолкарбоновая кислота - п-гидроксибензойная кислота. Настой и настойка полыни эстрагон идентичны по качественному составу флавоноидов и фенилпропаноидов, однако визуальная оценка хроматограммы показала, что зона адбсорбции пиноцембрина у настоя меньше, чем у настойки (рис. 31). Диагностическим признаком препаратов полыни эстрагон являются флавоноиды - эстрагонозид (1) пиноцембрин (4).

Доминирующим соединением эфирного масла полыни эстрагон является бесцветное вещество метилэвгенол (Rf=0,95), флуоресцирующее фиолетовым свечением в УФ-свете при длине волны 254 нм. На хроматограмме также обнаруживаются соединения, флуоресцирующие голубым свечением в УФ-свете при длине волны 366 нм: вещество с Rf= 0,92 и R_f= 0,97 (рис.

Результаты проведенных исследований позволяют предложить методику качественного анализа, разработанную для травы полыни эстрагон.

Подлинность. На линию старта пластинки “Силуфол” или “Сорбфил- ПТСХ-П-А-УФ” микропипеткой наносят 10 мкл настоя и 10 мкл настойки

Сравнительный ТСХ-анализ препаратов на основе

Условия хроматографирования: "Силуфол УФ- 254”, система растворителей: хлороформ-метанол-вода. 26:14:3.

Детекция: УФ-свет -1=254 нм и 1=366 нм; раствор ДСК.

1- водно-спиртовое извлечение полыни эстрагон

2- настой полыни эстрагон

3- настойка полыни эстрагон

4- индивидуальное вещество эстрагонозид

5- индивидуальное вещество тархунозид

6- индивидуальное вещество п-гидроксибензойная кислота

7- индивидуальное вещество нарингенин

8- индивидуальное вещество пиноцембрин

9- эфирное масло полыни эстрагон

Рис. 31

полыни эстрагон. В качестве стандартов использовали индивидуальные вещества, выделенные нами из сырья исследуемого растения: эстрагонозид, пиноцембрин, тархунозид, нарингенин, цикориевую кислоту и п-гидроксибензойную кислоту.

Хроматографическую пластинку помещают в камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ - метиловый спирт - вода (26:14:3) и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей пройдет около 13 см (силуфол) или 8 см (сорбфил), пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в УФ- свете при длине волны 254 нм и 366 нм. На хроматограмме основные вещества настойки полыни эстрагон обнаруживаются в виде пятен фиолетового свечения. На хроматограмме допускается наличие пятен ярко-голубого свечения, соответствующих веществам кумариновой и фенилпропаноидной природы. При проявлении хроматограммы щелочным раствором диазобензолсулъфокислоты (ДСК) и нагревании хроматографической пластинки при температуре 100-105 °С происходит окрашивание доминирующих компонентов в

соответствующий цвет (рис.

Тест пригодности хроматографической системы.

На линию старта пластинки пластинки “Силуфол УФ-254”,

“Сорбфил-ПТСХ-П-А-УФ” или “Сорбфил-ПТСХ-А-А-УФ”

микропипеткой наносят 10 мл 0,5 % спиртовых растворов эстрагонозида, пиноцембрина, тархунозида, нарингенина, цикориевой кислоты и п- гидроксибензойной кислоты; хроматографическую пластинку помещают в камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 часов, смесью хлороформ - метиловый спирт - вода (26:14:3) и хроматографируют восходящим способом. На хроматограмме при просмотре в УФ-свете при длине волны 254 нм должны обнаруживаться 6 пятен фиолетового цвета.

Примечание. Подготовка хроматографических пластинок. Пластинки “Силуфол УФ-254” 15 х 15 см, “Сорбфил-ПТСХ-П-А-

УФ” или “Сорбфил-ПТСХ-А-А-УФ” (ТУ 26-11-17-89) перед использованием активируют в сушильном шкафу при 100-105 °С в течение 1ч.

Следовательно, результаты проведенных исследований позволяют сделать следующие выводы:

1. При помощи метода тонкослойной хроматографии нами был разработан качественный анализ препаратов (настой, настойка) полыни эстрагон, позволяющий обнаруживать два доминирующих флавоноида растения - эстрагонозид (1) в виде желтого пятна с Rf = 0,48 и пиноцембрин (4) в виде ярко-оранжевого пятна с Rf= 0,9.

2. Метод ТСХ-анализа позволяет обнаружить основной компонент эфирного масла полыни эстрагон - метилэвгенол.

3. Разработанная нами методика качественного ТСХ-анализа препаратов полыни эстрагон рекомендована для включения в проект фармакопейной статьи (ФСП) на новое лекарственное средство “Полыни эстрагон настойка”.

5.3.