3.2.7.1 Продукция нитроксид анионов
Клетки перитонеальных макрофагов в концентрации 1х106/мл вносили в лунки 96-луночного планшета в количестве 0,1 мл. Добавляли равный объем среды RPMI с 10% ЭТС без ЛПС (спонтанная продукция) или с ЛПС (стимулированная продукция) в дозе 1 мкг/мл ; инкубировали в течение 18 ч при
37
С в СО2-инкубаторе с 5% содержанием СО2.
(спонтанная и стимулированная продукция) вносили 200 мкл полной среды. Во всех опытах проводилась постановка контроля среды, эксперименты проводились трижды в трех параллельных пробах [199].
Через 48 часов инкубации макрофагов в СО2-инкубаторе, полученный супернатант удаляли из лунок в стерильные 1,5 мл центрифужные пробирки типа Эппендорф и замораживали для последующего определения выработки нитроксид анионов.
В момент постановки реакции, готовили серию стандартов (разведений NaNO2) для построения калибровочной кривой. Полученный ранее супернатант размораживали и центрифугировали, затем 70 мкл каждого стандарта и образца вносили в 96-луночные планшеты, добавляли равный объем реактива Грисса в каждую лунку и инкубировали 15 минут при комнатной температуре. Оценку спектра проводили при 540 нм с использованием планшетного фотометра (HumaReader HS). Для построения стандартной кривой использовали серию разведений NaNO2 в полной культуральной среде. Полученные результаты
выражали в нмоль/106 мф NO2- [199, 277].
Еще по теме 3.2.7.1 Продукция нитроксид анионов:
- 5.2.1 Влияние штаммов C. neoformans разной вирулентности на способность макрофагов к продукции супероксид анионов in vitro
- Определение содержания супероксидного аниона.
- Анионные ионофоры.
- Катионные и анионные антибактериальные средства с другим типом действия
- 3.2.7.2 Продукция супероксиданионов в тесте с нитросиним тетразолием
- 3.2.8 Определение уровня продукции цитокинов макрофагами
- 5. Обеспечение доступности высококачественной продукции
- 9.3.5.1. Основные этапы процесса сертификации продукции
- 1.4. Перспективы отечественного движения за качество продукции
- Процессы жизненного цикла продукции (раздел 7 ГОСТ ISO 9001-2011)
- 3.4. Государственная гигиеническая регламентация и регистрация веществ, материалов, продуктов питания, промышленной продукции
- Гигиеническая экспертиза плодоовощной продукции
- 9.3.5.2. Схемы сертификации продукции и услуг в РФ
- 41. Влияние стресса на кач-во продукции и продуктивность животных.
- 5.2.6. Препараты, растительного происхождения, оказывающие влияние на фагоцитарную активность нейтрофилов, продукцию интерферона.
- 55. Влияние уровня благополучия животных на их продуктивность и качество продукции.
- 1.1. Управление качеством продукции в промышленности экономически развитых стран
- Перечень заболеваний, ассоциированных со снижением продукции слезной жидкости[2].
- 9.3 Противоречие между экономической теорией и бухгалтерским учетом издержек на единицу продукции