3.4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА ФРЕШНОС В СРАВНЕНИИ С ВИБРОЦИЛОМ И АКВАМАРИСОМ НА МОДЕЛИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОСТРОГО РИНОСИНУСИТА

На основании проведенных исследований по разработке и валидации экспериментальной модели острого риносинусита (раздел 3.3) в качестве экспериментальной модели была выбрана модель асептического воспаления носовых ходов с помощью дозированного закапывания экспериментальным животным водного раствора формалина в дозе 12 мг/кг.

В исследовании было использовано 70 крыс-самок линии Вистар. Было сформировано 7 экспериментальных групп, по 10 животных в каждой группе (таблица 39).

В качестве препаратов сравнения были использованы лекарственные средства, зарегистрированные на территории РФ аквамарис и виброцил.

Таблица 37

Дизайн исследования по оценке эффективности препарата фрешнос в сравнении с виброцилом и аквамарисом на экспериментальной модели острого риносинусита

на самках крыс линии Вистар

Через сутки после введения в носовые ходы формалина, аналогично исследованиям по разработке и валидации экспериментальной модели (раздел 3.3) у экспериментальных животных были отмечены выраженные клинические проявления острого риносинусита: затрудненное дыхание, чихание, покраснение слизистой оболочки и кожи вокруг наружных носовых ходов, мокнутие шерсти вокруг носовых ходов, выделения из носа серозного или гнойного характера.

Лечение экспериментальных животных осуществлялось по лечебной схеме, с первого по седьмой день после введения формалина. На фоне лечения у всех экспериментальных животных наблюдалось снижение интенсивности клинических проявлений острого риносинусита в динамике (таблица 38).

Для оценки специфической фармакологической активности препарата фрешнос в дозах 10, 20 и 30 мкл/100 г массы тела в сравнении с препаратами аквамарис (50 мкл/100 г массы тела) и виброцил (50 мкл/100 г массы тела) была проведена макроскопическая оценка изменений слизистой оболочки носовых ходов и гистологическая и гистохимическая оценка влияния препаратов на количество бокаловидных клеток, а также оценка степени выраженности инфильтрации слизистой оболочки и подслизистого слоя мононуклеарами и лейкоцитами.

Макроскопическая характеристика изменений слизистой оболочки носовых ходов экспериментальных животных

Носовые ходы интактных животных не имели макроскопических признаков воспаления, были свободны от содержимого, слизистая бледно-розовая, блестящая, гладкая (таблица 39).

При макроскопической оценке форм воспаления было показано, что острый ринит у крыс проявлялся как слизистый и слизисто-гнойный катар носовых ходов (таблица 39).

В контрольной группе у 20% животных из группы наблюдался слизистый катар, а у 80% животных - более тяжелая форма воспаления, слизисто-гнойный катар носовых ходов, что характеризует картину острого гнойного ринита.

124

Таблица 38

Клинические проявления острого риносинусита у экспериментальных животных, n=10

Таблица 39

Сравнительная макроскопическая характеристика изменений слизистой

носовых ходов у крыс различных групп, %, n=10

На фоне применения препарата сравнения аквамарис, обладающего свойствами снижать вязкость слизи, нормализовать работу бокаловидных клеток слизистой оболочки носа, стимулировать работу мерцательного эпителия, улучшать эвакуацию слизи, способствовать выведению инородных частиц вызывающих аллергию, нормализовать мукоцилиарный клиренс, стимулировать местный иммунитет, оказывать антибактериальное действие у 40% животных из группы были выявлены макроскопические признаки слизистого катара и у 60% - слизисто-гнойного катара, что позволяет сделать вывод о низкой эффективности препарата на данной модели. Следует отметить, что проявление наиболее тяжелой формы воспаления - слизисто-гнойного катара было на 20% ниже, чем в контрольной группе животных.

При использовании второго препарата сравнения виброцил макроскопическая картина изменений у экспериментальных животных была аналогична контрольной группе, что свидетельствует об отсутствии у данного

препарата эффективности в отношении клинических проявлений острого риносинусита.

Исследуемый препарат фрешнос оказал достаточно выраженное противовоспалительное действие во всех экспериментальных группах.

В дозе 10 мкл/100 г массы тела исследуемый препарат оказал незначительно выраженный противовоспалительный эффект: носовые ходы у 20% животных не имели признаков воспаления, у 40% животных имелись признаки слизистого катара и у 40% - слизисто-гнойного катара (таблица 39).

В группе, получавшей препарат фрешнос в дозе 20 мкл/100 г массы тела, признаки слизисто-гнойного катара определялись у 30% животных, слизистого катара - у 40%. У 30% животных этой группы носовые ходы были свободны, слизистая без макроскопически определяемых патологических изменений.

При использовании препарат фрешнос в дозе 30 мкл/100 г массы тела носовые ходы только у 20% животных содержали мутноватую слизь с серо­желтым оттенком, а слизистая оболочка была шероховатая, полнокровная, что соответствовало картине слизисто-гнойного катара. У 80% животных этой группы носовые ходы были свободны, слизистая бледно-розовая, блестящая, гладкая.

Таким образом, представленные данные макроскопического исследования свидетельствуют о том, что исследуемый препарат фрешнос оказывает выраженный дозозависимый противовоспалительный эффект в отношении экспериментальной патологии. Максимальный эффект был отмечен при использовании препарата фрешнос в дозе 30 мкл/100 г массы тела.

Микроскопическая характеристика изменений слизистой оболочки носовых ходов у крыс различных групп

Носовые ходы интактных животных не имели микроскопических признаков воспаления (рисунок 35)

Основные процессы, характеризующие поражение носовых ходов (полнокровие слизистой оболочки, очаговый некроз эпителия) были четко представлены у крыс контрольной группы (рисунок 36).

Рисунок 35 - Крыса интактной группы.

Слизистая носа с незначительным количеством бокаловидных клеток. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим. Увеличение 200

Рисунок 36 - Крыса контрольной группы.

Слизистая носа с выраженной гиперплазией бокаловидных клеток и выраженной воспалительной инфильтрацией. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим.

Увеличение 200

Гистологическая картина

слизистой носовых ходов у животных,

получавших исследуемый препарат фрешнос (рисунок 39-41), не отличалась от таковой у интактных животных. При этом применение препарата в дозе 30 мкл/100 г массы тела оказало наиболее выраженное действие, ввиду уменьшения инфильтрации мононуклеарами слизистой, что говорит о завершении воспалительного процесса.

Рисунок 37 - Крыса, получавшая аквамарис. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим. Увеличение 200

Рисунок 38 - Крыса, получавшая виброцил. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим.

Увеличение 200

Рисунок 39 - Крыса, получавшая Фрешнос в дозе 10 мкл/100 г массы тела. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим. Увеличение 200

Рисунок 40 - Крыса, получавшая Фрешнос в дозе 20 мкл/100 г массы тела. Окраска гематоксилином и эозином с докраской альциановым синим. Увеличение 200

Рисунок 41 - Крыса, получавшая Фрешнос в дозе 30 мкл/100 г массы тела.

При микроскопической оценке экссудативных форм катарального воспаления, которые развивались у животных при остром риносинусите, оценивалось количество бокаловидных клеток, содержавших кислую слизь (таблица 40).

Таблица 40

Количество бокаловидных клеток на 1 мм² слизистой оболочки носовой

перегородки у крыс разных групп, M±m, n=10

Примечание:

в дозах 20 и 30 мкл/100 г массы тела, количество бокаловидных клеток было идентично уровню интактных животных.

Была проведена оценка характера воспаления и степени выраженности инфильтрации лейкоцитами слизистой оболочки и подслизистого слоя носовых ходов крыс (таблица 41).

Инфильтрация клеточными элементами при воспалении характеризует неспецифические факторы защиты слизистых. По данным гистологического исследования слизистой оболочки носовых ходов крыс интактной группы инфильтрации лейкоцитами обнаружено не было.

Таблица 41

Сравнительная микроскопическая характеристика изменений слизистой носовых

ходов у крыс различных групп в баллах, M±m, n=10

Примечание:

**- отличие статистически значимо по сравнению с контрольной группой по критерию Стьюдента, при р