2.7. Оценка эффективности КЛС-04 в сравнении с тантум верде, диклофенаком и дексаметазоном на экспериментальной модели острого шейного лимфаденита

По результатам разработки и валидации экспериментальной модели острого шейного лимфаденита было выбрано введение самкам крыс линии Вистар в лимфатический узел водного рствора ЛПС в дозе 0,1 мг/кг.

Для оценки эффективности КЛС-04 проводили оценку показателей С- реактивного белка, TNF-α и INF-γ, биометрическую оценку разницы массы пораженного и интактного лимфатических узлов, патоморфологическую оценку ткани лимфатических узлов.

Эксперимент был выполнен на 100 крысах-самках линии Вистар. Было сформировано 10 экспериментальных групп по 10 животных в каждой группе.

В качестве препаратов сравнения были выбраны зарегистрированные на территории РФ препараты тантум верде, диклофенак и дексаметазон, обладающие выраженным противовоспалительным эффектом.

Расчет доз и путь введения препаратов:

Тантум верде

В 30 мл готовой лекарственной формы тантум верде содержится 176 доз.

Одна доза (один впрыск) тантум верде составляет 0,17 мл, в которой содержится 255 мкг действующего вещества. В качестве терапевтической дозы для одного животного со средней массой 250 г было выбрано введение 0,2 мл тантум верде, терапевтическая доза для крыс составила 1,2 мг/кг.

Путь введения - распыление на заднюю стенку глотки, аналогично пути применения в клинической практике.

Диклофенак

Максимальная терапевтическая доза препарата сравнения диклофенак для человека, массой 70 кг - составляет 150 мг в сутки. На 1 кг веса человека 150/70= 2 мг/кг. С учетом метаболического коэффициента максимальная терапевтическая доза для крысы составляет: 2 ? 39 / 7 = 11 мг/кг.

Путь введения - внутрижелудочно, аналогично пути применения в клинической практике (пероральному).

Дексаметазон

Средняя суточная доза дексаметазона для взрослых составляет 60 мг.

На 1 кг веса человека = 60/70 = 0,9 мг/кг, для крысы = 0,9*39/7 = 5 мг/кг.

Путь введения - внутримышечно, аналогично пути применения в клинической практике.

КЛС-04

Для выявления широты терапевтического действия был изучен диапазон доз КЛС-04: 0,4; 0,8; 1,6, 3,2 и 6,4 мг/кг, учитывая, что раствор КЛС-04 имеет концентрацию 0,1%, объемы для введения составили 0,1; 0,2; 0,4; 0,8 и 1,6 мл соответственно (таблица 9).

Путь введения - распыление на заднюю стенку глотки, аналогично планируемому пути применения в клинической практике.

Исследуемый препарат и препараты сравнения вводили животным один раз в сутки, на протяжении 10-ти дней до индукции лимфаденита и 3 дня после. Таблица 9

Дизайн исследования по оценке эффективности КЛС-04 в сравнении с тантум верде, диклофенаком и дексаметазоном на экспериментальной модели острого шейного лимфаденита на самках крыс линии Вистар

После эвтаназии экспериментальных животных все интактные и пораженные лимфатические узлы были взвешены, затем от 5 животных из каждой экспериментальной группы лимфатические узлы были подвержены лиофильному

высушиванию для оценки противоотечного эффекта исследуемых препаратов, затем снова были взвешены. От оставшихся 5 животных из каждой экспериментальной группы лимфатические узлы были зафиксированы в 10% нейтральном формалине и подвергнуты гистологическому исследованию.

Введение препаратов осуществляли с помощью специального шприца и зонда для эндотрахеального введения (IA-1C-M Penn-Century Inc., USA) (рисунок 9).

Рисунок 9 - Ааэрозоллер модель IA-1C-M

Интактным и контрольным животным вводили физиологический раствор в объеме 0,5 мл.