2.3.1 Определение концентрации цисплатина методом масс- спектрометрии с индуктивно связанной плазмой
Во время выполнения ВХГП проводился забор образцов перфузата (2 мл) и периферической крови (0,5 мл) у крыс на 10, 20, 30, и 40 минутах от начала перфузии. Пробы перфузата хранились в холодильнике при температуре 0-4оС до момента отправки на анализ (не более суток).
Периферическую кровь сразу после взятия центрифугировали 1200g в течение 20 минут. Полученная плазма замораживалась при -18оС и в морозильной камере доставлялась в лабораторию. Исследование образцов плазмы проводилось в течение суток после их доставки.Перед внесением образца в масс-спектрометр проводили пробоподготовку с использованием микроволновой печи (MARS 5). Автоклав с пробой во вкладыше помещали в микроволновую печь и разлагали в режиме, рекомендованном производителем: подъем температуры до 200 °С в течение 5 мин., выдерживание в течение 5 мин. при 200 °С, охлаждение до 45 °С. Для приготовления проб в автоклав с 5 мл концентрированной азотной кислоты помещалась 100 мкл биообразца (плазма, перфузат). Растворенную пробу разбавляли в 1000 раз 2% азотной кислотой.
В каждую пробу в качестве внутреннего стандарта добавляли раствор индия с целью компенсации погрешности разбавления. Раствор холостой пробы готовили с выполнением всех указанных выше операций.
Количественное измерение содержания цисплатина в пробах выполняли на масс-спектрометре с индуктивно-связанной плазмой ICP-MS X Series II (Рис. 10).
Рис. 10. Прибор ICP-MS X Series II фирмы Thermo Elemental (США)
Расчет концентрации цисплатина в биологических пробах проводился по калибровочным графикам, для построения которых были использованы стандартные растворы цисплатина концентраций 10, 100 и 1000 ppb.
Еще по теме 2.3.1 Определение концентрации цисплатина методом масс- спектрометрии с индуктивно связанной плазмой:
- 5.2. Результаты определения концентрации цисплатина в перфузате и периферической крови во время проведения химиогипертермической перфузии
- 2.4 Идентификация Candida spp. методом MALDI-TOF масс- спектрометрии
- 3.2 Сравнение результатов видовой идентификации Candida spp. методами ДНК-секвенирования и MALDI-TOF масс-спектрометрии
- 3.3 Сравнениерезультатов видовой идентификации штаммов Candida spp. методами MALDI-TOF масс-спектрометрии и тест-системой
- 5.2 Исследование концентрации Гливека в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и тандемной массспектрометрии (LC-MC / MC)
- Концентрация фибронектина в плазме обследованных больных
- Определение концентрации белка A-SAA и CA125 в сыворотках крови методом иммуноферментного анализа
- Физико-химические свойства, методы определения концентрации тилозина
- Расчетные методы определения временных допустимых концентраций химических соединений в различных средах
- Многомерный анализ результатов ИК-спектрометрии и определение критериев Махаланобиса и Бартлетта
- Определение уровня аутоантител к коллагенам I, II, III, IV и V типов в плазме крови
- Определение хемилюминесценции плазмы крови и гомогенатов тонкой кишки и печени
- Определение уровня свободных цитокинов в сыворотках/плазме крови и супернатантах МЛПК
- Определение концентрации сывороточной супероксиддисмутазы