11.4. Гибридизация ДНК (РНК), иммобилизованной на мембране.

Предгибридизацию мембраны с перенесенной ДНК (РНК) проводили с использованием гибридизационного буфера при 42 оС в течение 1 час. Гибридизацию проводили в свежем гибридизационном буфере, содержащим радиоактивномеченный зонд из расчета 2 млн.

XX

отмывку проводили раствором 1 SSC - 0.5% SDS, а затем раствором 0.1 SSC - 5% SDS. Степень отмывки тестировали с помощью счетчика Р-частиц "Эксперт", затем фильтр экспонировали с рентгеновской пленкой в кассете с усиливающими экранами при -70 оС. Продолжительность экспозиции составляла от нескольких часов до суток для продуктов ПЦР и от 10 до 30 дней в случае РНК и геномной ДНК.

- 55 -