Как избежать контаминации и деградации РНК и ДНК
Даже небольшие количества посторонней ДНК или РНК- матрицы могут привести к образованию неспецифичного продукта в ходе синтеза кДНК. Рекомендуем:
1) по возможности смешивать реагенты для синтеза кДНК в зоне, отделенной от мест выделения ДНК и РНК и анализа продуктов ПЦР;
2) использовать для работы наконечники для автоматических пипеток, имеющие аэрозольный фильтр;
3) для мониторинга уровня контаминации включать отрицательный контроль (в реакцию вместо ДНК- или РНК- матрицы добавлять стерильную воду) в каждый эксперимент.
Для исключения деградации ДНК и РНК в ходе работы необходимо:
1) осуществлять работы с РНК в стерильных перчатках, не чихать и не разговаривать над открытой пробиркой;
2) для работы с РНК и ДНК использовать стерильные расходные материалы (пробирки, наконечники для пипеток);
3) использовать стерильную, свободную от ДНКазной и РНКазной активности, воду (например, свежую воду mQ).
3.1.2.