Возбудители кокцидиоза

Таксономия. Возбудителями кокцидиоза человека являются Isospora belli и Isospora hominis, относящиеся к подтипу Protozoa, классу Sporozoa, семейству Eimeriidae.

Морфология и жизненный цикл развития.

У одних видов кокцидий весь цикл их развития происходит в организме одного хозяина, а у других - со сменой хозяев. Так у Isospora belli, паразитирующей только у человека, весь цикл развития происходит в энтероцитах тонкой кишки. Цикл развития I. hominis связан со сменой хозяина: шизогония с образованием крупных цист, содержащих большое число меро- зоитов, происходит в мышцах крупного рогатого скота, а спорогония, заканчивающаяся образованием ооцист, - в тонком кишечнике человека.

Рис. 19. Схематическое изображение ооцист Isospora belli:

а - ооциста с зиготой в центре; б - образование спо- робластов в ооцисте; в - ооциста с двумя спороцистами, содержащими по четыре спорозоита

Ооцисты I. belli бесцветны, эллипсоидной формы или с небольшим характерным сжатием с одного конца, на котором расположено микропиле - отверстие в оболочке, прикрытое крышечкой. Длина их - от 20 до 30 мкм, ширина - от 12 до 16 мкм. Оболочка двухконтурная, гомогенная. Незрелые ооцисты содержат обособленную шарообразную зиготу, расположенную в центре ооцисты (рис. 19). При комнатной температуре в течение 24-72 ч она делится на два споро- бласта, которые после образования оболочек превращаются в две спороцисты шарообразной или несколько вытянутой формы. Длина спороцисты - от 12 до 14 мкм, ширина от - 7 до 9 мкм. В каждой спо-

роцисте образуется четыре спорозоита и остаточное (резидуальное) тело.

Клиника и эпидемиология. Кокцидиоз - инвазионная болезнь, возникающая в результате развития в энтероцитах человека паразитических кокцидий, характеризуется нарушением функций кишечника и явлениями интоксикации. Инкубационный период при кокцидиозе, вызванном I. belli, длится 6-8 дней. Больные жалуются на общую слабость, отсутствие аппетита, тошноту, боли в животе. Стул жидкий с примесью слизи, иногда крови. Острые проявления кокцидиоза связаны с периодом бесполого размножения кокцидий (шизогония) в эпителии тонкой кишки и обычно продолжаются около 2 недель.

С наступлением периода спорогонии острые явления затихают, и в фекалиях появляются ооцисты, выделение которых может проходить от нескольких дней до 1 мес. и более. Заболевание протекает примерно около 1 мес. и обычно заканчивается выздоровлением.

Описаны случаи тяжелого течения кокцидиоза с внезапным началом, бурным течением, повышением температуры до 39 °С, частым (до 20 раз в сутки) жидким стулом с примесью большого количества слизи, гноя и крови, с резко выраженной интоксикацией.

При кокцидиозе, вызванном I. hominis, при котором в кишечнике человека протекает только половой цикл развития кокцидий, клинические симптомы ограничиваются лишь незначительным расстройством функции кишечника. Источником инвазии является крупный рогатый скот.

Попавшие в почву с фекалиями больных людей и животных ооцисты кокцидий могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких месяцев. Факторами передачи возбудителей являются пища, вода и предметы обихода, загрязненные фекалиями, содержащими ооцисты кокцидий. Заражение людей происходит при употреблении плохо проваренного или прожаренного мяса, содержащего цисты кокцидий.

Лабораторная диагностика. Диагноз ставится после обнаружения ооцист в мазках из фекалий больных. Обычно они выделяются в период выздоровления. Если в нативном мазке ооцист не обнаруживают, то рекомендуется использовать флотационные методы обогащения фекалий. Для получения ооцист иногда по дну чашки Петри равномерным слоем распределяют 5-10 г фекалий и орошают их 2%-ным раствором двухромовокислого калия, который препятствует развитию банальной микрофлоры. Чашки оставляют при комнатной температуре, и в положительных случаях через несколько часов или дней в развивающихся ооцистах появляются спороцисты и спорозоиты, по структуре которых определяется вид кокцидий.

Прогноз благоприятный. Осложнений и летальных исходов при кокцидиозе не описано.

Патогенез. При проникновении спорозоитов в клетки эпителия кишечника возникает катаральное воспаление слизистой оболочки, приводящее к расстройству функций кишечника и обильным выделениям слизи, иногда с примесью крови.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Обычные способы профилактики такие же, как при амебиазе и лямблиозе.

Граф 9

При легких формах болезни назначают симптоматическое и общеукрепляющее лечение, а также висмута нитрат по 1 г 3 раза в день. В тяжелых случаях рекомендуется назначение хлориди- на и сульфазина.

Таксономия. Возбудителями криптоспоридиоза являются 6 видов криптоспоридий, паразитирующих у 30 видов хозяев (рыбы, птицы, амфибии, пресмыкающиеся, млекопитающие). Заболевание у человека вызывает Cryptosporidium parvum (от греч. скрытая спора), который, как и другие виды криптоспоридий, отнесен к семейству Cryptosporidiidae, подклассу Coccidiasina, классу Sporozoasida и типу Apicomplexa (от греч. apex - верхушка + комплекс). Такое название эти паразиты получили в связи с тем, что их спорозоиты в переднем конце имеют специальный комплекс микроструктур, с помощью которого они проникают в клетку хозяина и в процессе полового размножения образуют споры (от греч.

Жизненный цикл развития. Развитие криптоспоридий протекает в одном хозяине по схеме жизненного цикла кокци- дий. Начинается оно с освобождения спорозоитов из попавших в организм ооцист и инфицирования ими микроворсинок слизистой оболочки. Последние, вытягиваяясь и слипаясь над ними, образуют паразитоформную вакуоль, где затем формируются половые клетки, которые, сливаясь, образуют зиготы. Они покрываются оболочкой и становятся ооцистами. Образуется структура, которую образно можно назвать «клетка в клетке». Затем паразит начинает питаться и расти. Растущую клетку называют трофозоитом (от греч. trophos - питание). Этот этап жизненного цикла заканчивается выделением с фекалиями ооцист (от греч. oon - яйцо, kistis - пузырь).

В организм животного или человека они попадают с пищей, водой и воздухом. В проксимальных отделах тонкого кишечника из цист при разрушении их оболочки высвобождаются спорозоиты, которые прикрепляются к поверхности эпителиальных клеток кишечника.

Далее паразит приступает к бесполому размножению, и его численность увеличивается во много раз. Бесполое размножение начинается с множественного деления его ядра и цитоплазмы. В результате деления образуется 6-8 мерозоитов (от греч. mera - часть), способных заразить новые эпителиальные клетки хозяина. Часть мерозоитов превращается в женские и мужские половые клетки. Оплодотворенная женская половая клетка (зигота) развивается в ооцисту. Ооцисты криптоспоридий размером 5,4x4,6 мкм имеют шарообразную или овальную форму, стенка их гладкая, бесцветная, тонкая. После деления ядра и

цитоплазмы в них образуются четыре спорозоита. Следует отметить, что формируются два типа ооцист - тонкостенные и толстостенные (рис. 20).

Рис. 20. Криптоспоридии:

а - толстостенная циста; б - тонкостенная циста

разиту длительное время

Из тонкостенных ооцист в кишечнике хозяина высвобождаются спорозоиты, которые поражают эпителиальные клетки.

Толстостенные ооцисты выделяются с фекалиями во внешнюю среду и служат источником заражения людей и животных. Интервал между моментом заражения и началом выделения ооцист колеблется от 5 до 20 дней. Таким образом, организм человека (или животного) является для криптоспоридии одновременно и промежуточным, и окончательным хозяином. Напомним, что организм, в котором происходит бесполое размножение, называется промежуточным хозяином, а хозяин, в организме которого осуществляется половое размножение, - окончательным хозяином.

Клиника и эпидемиология. Инкубационный период крип- тоспоридиоза продолжается от 4 до 14 дней. Основным и наиболее типичным клиническим проявлением криптоспоридиоза является профузная водянистая диарея, продолжающаяся от нескольких дней до 2 недель, по истечении которых она всегда прекращается без лечения. У больных СПИДом диарея протекает тяжелее (в среднем 3-6 л выделений в сутки, реже - до 20). Болезнь может продолжаться несколько месяцев, часто приводит к угрожающему жизни пациента обезвоживанию и нарушению электролитного баланса. Присоединение рвоты увеличивает потерю жидкости и электролитов.

Криптоспоридиоз желчевыводящих путей может проявляться, как холецистит, значительно реже - как гепатит и склерозирующий холангит, т.е. характеризуется лихорадкой, болью в правом подреберье, желтухой, тошнотой, рвотой и диареей.

Бронхолегочный (респираторный) криптоспоридиоз проявляется лихорадкой, лимфаденопатией, длительным кашлем со скудной слизистой, реже слизисто-гнойной мокротой, одыш

кой, цианозом, наличием в мокроте криптоспоридий. У больных СПИДом описана двусторонняя интерстициальная пневмония, обусловленная криптоспоридиями. Ооцисты при этом выявляют в альвеолярных макрофагах.

Инвазии желудочно-кишечного тракта, вызванные криптоспоридиями, зарегистрированы во всех возрастных группах и на всех континентах.

Результаты серологических исследований свидетельствуют, что криптоспоридиоз встречается значительно чаще, чем диагностируется. Так, антитела к криптоспоридиям были обнаружены у 25-35% лиц в индустриально развитых странах и у около 65% - в развивающихся. Такое широкое распространение криптоспоридиоза связано с большим количеством природных резервуаров инфекции, низкой инфицирующей дозой и высокой резистентностью возбудителя к дезинфектантам и противопаразитарным препаратам.

Основной механизм передачи инфекции - фекально-оральный, чаще всего с питьевой водой, контаминированной криптоспоридиями. Это связано с уникальной резистентностью оо- цист к дезинфектантам, особенно к хлорированию. Сохраняясь в окружающей среде, ооцисты криптоспоридий не утрачивают способности к инфицированию в течение 18 мес. при температуре 4 °С. Инфицирующая доза криптоспоридий очень мала. Так, в эксперименте было показано, что развитие инвазии у приматов может наступить даже при попадании одной ооцисты. У здоровых добровольцев клиническая картина криптоспоридиоза развилась в 100% случаев при инфицировании их 1000 ооцистами.

Лабораторная диагностика. В большинстве случаев основана на обнаружении ооцист криптоспоридий в испражнениях и значительно реже - в биоптате слизистой оболочки тонкой кишки. При остром криптоспоридиозе количество ооцист в фекалиях так велико, что можно использовать прямую микроскопию фекалий. В большинстве случаев обычные методы их окраски не позволяют поставить диагноз, так как криптоспоридии либо окрашиваются очень слабо, например при окраске по Граму, либо окрашиваются таким образом, что их невозможно отличить от дрожжеподобных грибов.

При окраске ооцист по Цилю - Нельсену они приобретают красный (или розовый) цвет и хорошо видны на сине-фиолетовом фоне, в который окрашиваются другие микроорганизмы и содержимое кишечника. Однако в некоторых ситуациях, например при хроническом криптоспоридиозе с легким течением, когда концентрация ооцист в кале мала, необходимо использовать методы флотации и концентрации.

Лучшие результаты получают при окрашивании ооцист в мазках по Кестеру. Сначала они фиксируются в смеси Никифорова и затем окрашиваются 5 мин в растворе сафранина. После ополаскивания водой дифференцируются 10 с в 0,1%-ном растворе серной кислоты и докрашиваются 10-15 с в 5%-ном растворе малахитового зеленого. Ооцисты криптоспоридий окрашиваются в бледно-розовый цвет и хорошо выделяются на зеленом фоне.

Разработаны также диагностические серологические тесты - иммунофлюоресцентный и иммуноферментный анализы. Рекомендуется использование молекулярных методов исследования, в частности полимеразной цепной реакции.

Профилактика и лечение. Предупреждение криптоспори- диоза обеспечивается, прежде всего, нейтрализующим воздействием на ооцисты в животноводческих и птицеводческих комплексах, а также в больницах и детских учреждениях. Выраженный обеззараживающий эффект можно получить путем тщательной уборки помещений животноводческих ферм, включая механическое удаление навоза.

Важным мероприятием является целенаправленное исследование материала от больных с острыми кишечными инфекциями на наличие ооцист в фекалиях.

В плане мер личной профилактики с учетом фекальноорального механизма передачи криптоспоридий необходимо тщательное мытье рук, особенно после контакта с животными, употребление только кипяченой воды и термически обработанной пищи.

В профилактике криптоспоридиоза большое внимание уделяется личной и общественной гигиене, в частности коммунальному водоснабжению и качеству питьевой воды: рекомендуется кипятить воду не менее 1 мин или пить бутилированную воду.

Специфическое лечение криптоспоридиоза не разработано. Несколько препаратов проходят тестирование, в частности па- ромомицин и нитазоксадин. При диарейном синдроме назначается специальная диета, нормализующая водно-солевой обмен. У лиц с отсутствием выраженных нарушений иммунного статуса возможны случаи спонтанного выздоровления.

Больным следует назначать полноценную легкоусвояемую пищу без грубой клетчатки. Рекомендуется пероральный прием большого количества жидкости, что нередко является вполне достаточным для лиц, страдающих легкой и даже среднетяжелой формой криптоспоридиоза. Для коррекции водно-электролитного равновесия вводят полиионные солевые растворы.

Некоторые авторы для лечения больных криптоспоридиозом рекомендуют применять фуразолидон. Учитывая частое сочетание криптоспоридиоза с лямблиозом, считается целесообразным назначение им метронидазола и гентамицина. Лицам с иммунодефицитами следует назначать иммуномодулирующие медикаменты (тимозин, тимарин, тималин, метилурацил и др.).