ЛАБОРАТОРНОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ПРОСТЕЙШИХ

Для культивирования простейших применяют бактериологические или химические пробирки, реже колбы Эрленмейера или чашки Петри. Культуры лямблий хорошо развиваются во флаконах, обычно применяемых для инсулина, пенициллина, стрептомицина или других антибиотиков, а также в пробирках из кварцевого стекла.

Подготовка стеклянной посуды производится путем тщательного мытья с мылом, при необходимости — погружения в сернохромовую смесь. Затем посуду многократно ополаскивают в чистой воде и высушивают. Чашки Петри, пастеровские пипетки и стеклянные трубки заворачивают в бумагу, пробирки и колбы закрывают ватными пробками и закрытый конец покрывают бумажным колпачком, который тщателыю завязывают аптечной вязкой или нитью. Стерилизация подготовленной посуды производится в сушильном шкафу при 130—140°.

Среды для культивирования могут быть однофазными — жидкими или плотными, и двухфазными — с плотной подкладкой (свернутый яичный белок, сыворотка крови, агар и др.), на которую наслаивают жидкую часть среды. Главными ингредиентами питательных сред являются нативная сыворотка крови или яичный белок и физиологический раствор с добавлением буферных солей. Для лучшего роста простейших разных видов в среды добавляют различные сахара, аминокислоты, нуклеиновые кислоты, витамины и другие вещества. Для увеличения вязкости в некоторые среды добавляется агар.

Стерилизация сред производится либо в автоклаве при 110— 120° однократно, либо в стерилизаторе Koxa при 100° трехкратно— 3 дня подряд по 1 ч. Нативную сыворотку инактивируют отдельно путем нагревания на водяной бане до 56° в течение 30—60 мин и добавляют к остальной части среды. Коагуляция плотной части среды, сывороточной или яичной, производится при 80°. Реакция среды, как правило, должна быть слегка щелочной (pH 7,0—7,6); pH сред определяют колориметрически либо электрометрически — при помощи рН-метров (потенциометров) .

Большинство видов простейших культивируется на питательных средах при температуре 37° (простейшие кишечника, Trichomonas vaginalis и др.), но некоторые из них лучше растут при температуре 20—26° (лейшмании, трипаносомы). При необходимости длительного сохранения культур без пересева края закрытой ватной пробкой пробирки заливают парафином или на закрытый парафинированной пробкой конец пробирки надевают резиновый колпачок (напальчник, палец резиновой перчатки и т. n.), или же пробирка герметизируется другим путем.