Культирование кровососущих двукрылых.

Из видов насекомых, входящих в эту группу, чаще других в лаборатории культивируют комаров. Легче это удается с Aedes aegypti и Culex pipiens molestus; их лабораторные штаммы получили широкое распространение в ряде научных учреждений.

Для получения личинок яйцекладки комаров помещаются в чашки Koxa или кристаллизаторы с водой. Слой воды должен иметь глубину 2—3 см. Вода не должна содержать посторонних примесей и должна соответствовать требованиям, обычно предъявляемым к питьевой воде. Если для культивирования комаров применяется водопроводная вода, содержащая остаточный хлор, необходимо ее выдержать в чистой посуде примерно сутки и лишь после этого использовать для замачивания яиц комаров.

При 26—28° через несколько часов послепопаданиявводуиз яиц выходят личинки, которые вскореначинаютпитаться.Вкаче- стве корма для них рекомендуется использовать мясной порошок, сушеные дрожжи, растертые в порошок, галеты, настой сена и даже фекалии лабораторных животных. B последнем случае личинки комаров питаются бактериями и инфузориями, размножающимися в воде. По-видимому, целесообразнее использовать продукты типа мясного и дрожжевого порошка, так как в этом случае легче дозировать корм на единицу объема воды или определенное количество личинок того или иного возраста.

Особенно ответственным является период культивирования личинок I возраста, так как в это время избыточное развитие микрофлоры в воде может привести к гибели культуры комаров. Bo избежание этого следует не только ограничивать до минимума добавление корма в воду, но и постоянно следить за состоянием культуры, при необходимости меняя воду, в которой находятся личинки комаров. Часто, особенно при передозировании корма, на поверхности воды образуется бактериальная пленка, которую личинки не успевают разрушить.

C лянькой и ростом личинок корм в воду добавляют в постепенно возрастающих количествах, следя за тем, чтобы вода с развивающимися личинками не становилась мутной и не приобретала гнилостного запаха. Если личинок в чашке слишком много, их можно разделить на две группы, пересадив одну из них в новую чашку с чистой водой. C появлением куколок корм в воду перестают добавлять, а чашку с водой, где находятся куколки комаров, помещают в садок, в котором предполагают в дальнейшем содержать окрыленных насекомых.

Иногда по ходу культивирования водных фаз комаров, возникает необходимость перемещения личинок или куколок из одного сосуда C водой в другой. Для этой цели используют простое приспособление, состоящее из стеклянной трубки длиной 25—30 см и диаметром 4—5 мм, с резиновым баллоном на конце (рис. 98). Нужно следить за тем, чтобы температура воды в чашках, куда пересаживают личинок или куколок, была такой же, как в чашке, откуда этих личинок или куколок берут.

Садки для содержания окрыленных комаров могут быть сделаны из марли, тюля, мельничного газа, капроновой и, наконец, металлической сетки.

Bo всех случаях сетка натягивается на каркас из толстой (3—4 мм) проволоки, дерева или другого материала. Углы каркаса обматывают ватой или марлей для того, чтобы не повреждалась ткань садка.

Рис. 98. Приспособление для пересадки личинок и куколок комаров.

Для доступа к насекомым, находящимся в садке, одна из сторон его имеет вид рукава, который может завязываться узлом. При развязывании «рукава» необходимо следить за тем, чтобы комары не вылетели из садка или не были извлечены наружу вместе с рукой экспериментатора. Окрыленные комары питаются раствором сахара, глюкозы, медом, а самки комаров, кроме того, нуждаются в питании кровью.

Простейшим способом обеспечения комаров углеводистой пищей служит помещение на верхнюю стенку марлевого или сетчатого садка кусочка ваты или поролона, смоченного раствором сахара, глюкозы и т. д. При этом необходимо следить, чтобы вата и садок не покрывались плесенью, а садок после освобождения от комаров должен быть тщательно выстиран. Можно помещать вату, смоченную сладким сиропом и внутрь садка, положив ее в маленькие чашечки или солонки.

Для питания комаров кровью можно использовать белую мышь, растянутую на станочке и помещенную в садок. Если насекомые отказываются от питания кровью мыши, можно накормить их на руке самого экспериментатора. Последний способ может быть применен в том случае, если культура находится в критическом состоянии и есть полная уверенность B том, что комары не заражены никакими возбудителями, представляющими опасность для здоровья человека (например, культура, много лет получаемая в лаборатории из автогенных кладок Culex pipiens molestus). Для откладки яиц напившимися кровью самками комаров в садок помещают чашку Петри с влажной фильтровальной бумагой. Яйцекладки, полученные от комаров Aedes aegypti, могут оставаться на высушенной фильтровальной бумаге в течение нескольких месяцев, сохраняя значительный «процент всхожести». Для предупреждения повреждения культур комаров грибами, паразитическими клещами и др. необходимо после получения очередной генерации комаров всю посуду и садки мыть и автоклавировать. He рекомендуется также в помещении, где разводят комаров, проводить какие бы то ни было манипуляции с инсектицидами. Оптимальный режим влажности, температуры, освещенности выбирают в соответствии с экологическими особенностями вида культивируемых комаров.

Следует учесть, что далеко не все виды комаров могут сравнительно легко и в течение круглого года культивироваться в искусственных условиях. Некоторые виды в неволе впадают в длительную диапаузу, не копулируют, быстро вымирают.

Культивирование мошек производят в сосудах с проточной водой, богатой кислородом. При этом в аквариуме пытаются воссоздать условия, напоминающие места естественного обитания и выплода этих насекомых: на дно помещают субстрат и растения для прикрепления личинок, температура воды поддерживается на определенном уровне с помощью нагревательных устройств, вода аэрируется либо путем распыления в ней кислорода из баллона, снабженного редуктором, или воздуха, нагнетаемого в аквариум компрессором (подробное описание методов аэрации аквариумов содержится в специальных руководствах). Культивирование мошек в лаборатории связано с рядом трудностей и требует специального оборудования и некоторых навыков.

Лабораторное культивирование москитов осуществляется в специальных садках, где находятся насекомые всех фаз развития. Ниже мы приводим рекомендации по культивированию москитов, данные П. А. Петрищевой, 1961.

Развитие личинок насекомых происходит на измельченных и выдержанных длительное время фекалиях травоядных животных. Важно следить за поддержанием достаточно высокой, но не избыточной влажности субстрата и воздуха в инсектарии. Кормление взрослых самок москитов производится в вечернее или ночное время на лабораторных животных (морская свинка) с выбритыми участками шерсти.

Конструкция и размеры садка для содержания культуры москитов приводятся на рис. 99.

Лабораторное культивирование некровососущих мух особенно широко распространенных видов, как Musca domestica, Callip- hora erythrocephala, Coprosarcophaga haemorrhoidalis и др., не представляет особых затруднений. Отловленные в природе мухи

Рис. 99. Камера для разведения москитов (по П. А. Петрищевой, 1961). а — выдвижная кювета с питательным для личинок материалом; б — деревянное второе дно садка; e — выдвижиая дверца садка; г — отверстие с задвижной крышкой и сетчатым рукавчиком для сбора вылетающих из садка москитов; д — отверстие, затянутое мелкоячеистой сеткой (для кормления москитов к сетке плотно прикладываются растянутые на станке кролик или свинка с побритым брюшком); e — сахарный сироп; ж — передняя стенка садка из обычного или, лучше, из органического стекла; з — ширмочка из темной материи, закрывающая на день прозрачную стенку.

помещаются в садки из марли (см. культивирование комаров) или стекла и металлической стенки с матерчатым рукавом и фанерным дном. Размер садка определяется задачами исследования и количеством насекомых, необходимых для работы.

Внутрь садка помещают кювет с слоем высушенного песка в 2—3 см. Ha песок ставят чашку с субстратом, куда мухи должны отложить яйца и где будет происходить развитие личинок. B зависимости от вида мух субстратом может служить мясо, фекалии человека или животных, а также разлагающиеся каша, картофельное пюре и т. д. Для того, чтобы развитие личинок шло достаточно быстро и генерация мух, полученная в результате культивирования, была полноценной, в садке поддерживают температуру на уровне 25—26°. B течение дня он должен освещаться естественным или искусственным светом, а субстрат должен быть постоянно влажным. Обычно, если исходное количество субстрата достаточно по объему, развитие в нем личинок мух заканчивается без дополнительного увлажнения. Если личинки используют весь субстрат ранее момента нормального окукливания, необходимо добавить в садок некоторое количество свежего субстрата. Окукливание мух происходит в песке. При этом личинки активно покидают субстрат, в котором они развивались, и зарываются в песок (если есть необходимость, песок можно отсеять и получить отдельно куколок мух).

По истечении времени, необходимого для формирования в куколках взрослых насекомых, происходит вылет мух в садок и цикл развития повторяется вновь.

Поскольку субстратом для развития личинок мух служат разлагающиеся продукты и фекалии, целесообразно иметь специальное помещение для содержания садков с культурой мух или помещать садки в шкафы с вытяжкой, где поддерживается постоянная оптимальная для развития насекомых температура. Периодически садки, песок, так же, как и посуда, в которую помещается субстрат для развития личинок, моются и обеззараживаются. Взрослых насекомых подкармливают сладким молоком, жидкой кашицей, приготовленной из детской муки и т. п.