4.1.Основы технологии получения белковых изолятов
Белоксодержащие экстракты клеток промышленных микроорганизмов представлены двум высокомолекулярными фракциями: так называемой «глобулиновой» и водорастворимой альбумн новой, что позволяет в дальнейшем получить два вида белковых изолятов.
Основная часть экстр гируемых белков на 75 % представлена более высокомолекулярными соединениями первой фрак ции с молекулярными массами от 20 до 100 кДа. Доля альбуминовой фракции составляет не боле 25 %. Молекулярные массы входящих в ее состав белков не превышают 20 кДа.Изолят «глобулиновой» фракции характеризуется ограниченной растворимостью белковых сс единений при физиологическом значении pH среды; хорошо растворим в солевых растворах и сильнокислых и щелочных значениях pH. Имеет изоэлектрическую точку в интервале значе-ни pH 4,2-4,7, где белковые молекулы агрегируют с образованием осадка.
Изолят альбуминовой фракции наоборот практически неограниченно растворим в воде пр любых значениях pH среды.
Рис. 21. Технологическая схема получения белковых изолятов из биомассы дрожжей:
1 — бункер; 2, в —реактор; 2а — теплообменник; 3, 5,12,15,17,18 — сборник; 4 — сепаратор; 7 — нутч-фильтр; 8,10 — сборник с рубашкой; 9 — распылительная сушилка; 11 — ультрафильтрационная установка; 13 — сушилка;
14 — фильтр; 16 —ректификационная колонна; 19 — вакуум-сушилъный шкаф
Технологическая схема получения белковых изолятов представлена на рис.21.
Из бункера 1 денукленизированная биомасса микробных клеток поступает в реактор 2, где разбавляется водой до 10 % но сухой массе, после чего полученную суспензию закисляют соляной или ортофосфорной кислотой до pH 1,5-1,7 и при интенсивном перемешивании нагревают острым паром до 140-160 °С. При такой температуре суспензию выдерживают 1-3 мин и в рубашку аппарата подают холодную воду.
Одновременно с этим начинают процесс интенсивного охлаждения суспензии до комнатной температуры путем пропускания реакционной массы через теплообменник типа «труба в трубе». Суспензию собирают в промежуточный сборник 3, откуда насосом направляют на сепаратор 4 и отделяют экстракт белковых веществ от клеточного дебриса. Денуклеинизиро- ванные клетки содержат 25-30 % белковых веществ, включая белки экстракта в сырой массе. Выход белковых веществ составляет 50—55 %. На 75 % они представлены высокомолекулярной фракцией с массой выше 15 к Да.Белковый экстракт, собранный в сборнике 5, далее направляют в осадитель 6, где проводят осаждение «глобулиновой» фракции в изоэлектрической точке. Для этого экстракт охлаждают до температуры 8-12 °С подачей в рубашку аппарата рассола и добавляют 40 % -ный раствор гидроксида натрия до достижения значения pH среды 4,2-4,7. Образующуюся суспензию «глобулиновой» выдерживают на холоду 4-6 ч, достигая степени осаждения белковых веществ 85 %. Полученный осадок «глобулиновой» фракции отделяют на нутч-фильтре 7, промывают холодной кислой водой (pH 4,2-4,7) и выгружают в промежуточный сборник 8, охлаждаемый рассолом. Сырой пастообразный осадок в сборнике 8 при перемешивании якорной мешалкой донейтрализовывают, добавляя в минимальном количестве раствор гидроксида натрия таким образом, чтобы в суспензии белкового раствора pH среды имело значение 6,5-7,0. Подготовленную фракцию «глобулинов» далее высушивают в распылительной сушилке 9 до остаточной влажности 5-7 % . Фильтрат со стадии отделения «глобулинов», содержащий альбуминовую фракцию и низкомолекулярные продукты гидролиза белка, собирают в охлаждаемом рассолом сборнике 10. Из нее раствор белков направляют на концентрирование ультрафильтрацией на установке 11, где его освобождают от солей, кислоты и низкомолекулярных продуктов методом диафильтрации. Очищенный таким образом продукт высушивают распылением в токе горячего воздуха в сушилке 13 до остаточной влажности 5-7 % и также упаковывают, как и «глобулиновую» фракцию.
Около половины образующегося при этом пермеата используют для приготовления кислотного экстрагента в последующем технологическом цикле, а избыток его направляют на очистные сооружения.Качество получаемых белковых продуктов должно удовлетворять требованиям пищевой промышленности, предъявляемым к белковым изолятам. Формально обе фракции белковых веществ с учетом указанных выше ограничений можно использовать в пищевых целях и высушивать в распылительной сушилке. Однако себестоимость альбуминовой фракции выше, чем «глобулиновой». Экономически целесообразно готовить из нее белковый препарат медицинского назначения. В этом случае требования к качеству такого рода препаратам могут быть выше, чем к продукту для пищевых целей. И основным критерием оценки качества микробных белков является содержание в них нетипичных для человека липидов. Такая же ситуация по причине производственного брака может возникнуть и в отношении белковых фракций пищевого назначения. В этих случаях каждая фракция должна быть подвергнута дополнительной переработке с целью удаления липидов.
В производстве белков пищевого и медицинского назначения нежелательные липиды удаляют обработкой сырых или высушенных полупродуктов последовательным промыванием осадков на фильтре 14 этанолом с гидромодулем 1. При этом водно-спиртовые стоки собирают в сборнике 15, откуда их направляют на ректификационную колонну 16. Регенерированный этанол накапливают в сборнике 17, а кубовый остаток — в сборнике 18, откуда его передают на биосинтез кормовых дрожжей или сбрасывают на очистные сооружения. Отжатые на фильтре осадки белковых фракций высушивают при температуре не выше 65 ”С либо в промышленном вакуум-сушильном шкафу 19, либо в пневматической сушилке в токе нагретого азота.
5.
Еще по теме 4.1.Основы технологии получения белковых изолятов:
- Технология получения белковых селенобогащенных БАД на основе дрожжей
- Получение клинических изолятов Enterococcus faecalis
- Переработка денуклеинизированной микробной биомассы с получением продуктов белковой природы
- Технология получения авермектина В1 (абамектина)
- Технологии получения дрожжевой РНК
- Технология получения препаратов БАВ из растений, органов и тканей животных
- Технология получения остеопластического материала
- Технология получения rhBMP-2
- З.З.Технологии получения нуклеозидов при гидролизе микробной РНК
- 2 Методы физико- химического контроля белковых гидролизатов и приготовляемых на их основе питательных сред
- 3.3. Получение красных игристых вин на основе использования иммобилизованных дрожжей
- Биохимические и микробиологические основы получения витамина В12 с помощью метанообразующих бактерий
- Основы технологии культивирования микроорганизмов-продуцентов микробных липидов
- Исследование in vitro биосовместимости матриксов на основе гибридной золь-гель-полимерной системы, содержащей Zr, полученных методом двухфотонной фотополимеризации
- Технология оптической интраоперационной диагностики в нейроонкологии на основе спектроскопического анализа нервных тканей
- 4.1 Происхождение изолятов С. neoformans
- Автоматизация анализа изображений в исследованиях мозга: постановка задач, математические основы, информационные технологии
- Обоснование технологии получения препарата полыни эстрагон - “ Полыни эстрагон настойка”.