<<
>>

4.1.Основы технологии получения белковых изолятов

Белоксодержащие экстракты клеток промышленных микроорганизмов представлены двум высокомолекулярными фракциями: так называемой «глобулиновой» и водорастворимой альбумн новой, что позволяет в дальнейшем получить два вида белковых изолятов.

Основная часть экстр гируемых белков на 75 % представлена более высокомолекулярными соединениями первой фрак ции с молекулярными массами от 20 до 100 кДа. Доля альбуминовой фракции составляет не боле 25 %. Молекулярные массы входящих в ее состав белков не превышают 20 кДа.

Изолят «глобулиновой» фракции характеризуется ограниченной растворимостью белковых сс единений при физиологическом значении pH среды; хорошо растворим в солевых растворах и сильнокислых и щелочных значениях pH. Имеет изоэлектрическую точку в интервале значе-ни pH 4,2-4,7, где белковые молекулы агрегируют с образованием осадка.

Изолят альбуминовой фракции наоборот практически неограниченно растворим в воде пр любых значениях pH среды.

Рис. 21. Технологическая схема получения белковых изолятов из биомассы дрожжей:

1 — бункер; 2, в —реактор; 2а — теплообменник; 3, 5,12,15,17,18 — сборник; 4 — сепаратор; 7 — нутч-фильтр; 8,10 — сборник с рубашкой; 9 — распылительная сушилка; 11 — ультрафильтрационная установка; 13 — сушилка;

14 — фильтр; 16 —ректификационная колонна; 19 — вакуум-сушилъный шкаф

Технологическая схема получения белковых изолятов представлена на рис.21.

Из бункера 1 денукленизированная биомасса микробных клеток поступает в реактор 2, где раз­бавляется водой до 10 % но сухой массе, после чего полученную суспензию закисляют соляной или ортофосфорной кислотой до pH 1,5-1,7 и при интенсивном перемешивании нагревают острым па­ром до 140-160 °С. При такой температуре суспензию выдерживают 1-3 мин и в рубашку аппара­та подают холодную воду.

Одновременно с этим начинают процесс интенсивного охлаждения сус­пензии до комнатной температуры путем пропускания реакционной массы через теплообменник типа «труба в трубе». Суспензию собирают в промежуточный сборник 3, откуда насосом направля­ют на сепаратор 4 и отделяют экстракт белковых веществ от клеточного дебриса. Денуклеинизиро- ванные клетки содержат 25-30 % белковых веществ, включая белки экстракта в сырой массе. Вы­ход белковых веществ составляет 50—55 %. На 75 % они представлены высокомолекулярной фрак­цией с массой выше 15 к Да.

Белковый экстракт, собранный в сборнике 5, далее направляют в осадитель 6, где проводят осаждение «глобулиновой» фракции в изоэлектрической точке. Для этого экстракт охлаждают до температуры 8-12 °С подачей в рубашку аппарата рассола и добавляют 40 % -ный раствор гидрок­сида натрия до достижения значения pH среды 4,2-4,7. Образующуюся суспензию «глобулино­вой» выдерживают на холоду 4-6 ч, достигая степени осаждения белковых веществ 85 %. Полу­ченный осадок «глобулиновой» фракции отделяют на нутч-фильтре 7, промывают холодной кис­лой водой (pH 4,2-4,7) и выгружают в промежуточный сборник 8, охлаждаемый рассолом. Сырой пастообразный осадок в сборнике 8 при перемешивании якорной мешалкой донейтрализовывают, добавляя в минимальном количестве раствор гидроксида натрия таким образом, чтобы в суспензии белкового раствора pH среды имело значение 6,5-7,0. Подготовленную фракцию «глобулинов» да­лее высушивают в распылительной сушилке 9 до остаточной влажности 5-7 % . Фильтрат со ста­дии отделения «глобулинов», содержащий альбуминовую фракцию и низкомолекулярные про­дукты гидролиза белка, собирают в охлаждаемом рассолом сборнике 10. Из нее раствор белков нап­равляют на концентрирование ультрафильтрацией на установке 11, где его освобождают от солей, кислоты и низкомолекулярных продуктов методом диафильтрации. Очищенный таким образом продукт высушивают распылением в токе горячего воздуха в сушилке 13 до остаточной влажнос­ти 5-7 % и также упаковывают, как и «глобулиновую» фракцию.

Около половины образующегося при этом пермеата используют для приготовления кислотного экстрагента в последующем техно­логическом цикле, а избыток его направляют на очистные сооружения.

Качество получаемых белковых продуктов должно удовлетворять требованиям пищевой промышленности, предъявляемым к белковым изолятам. Формально обе фракции белковых ве­ществ с учетом указанных выше ограничений можно использовать в пищевых целях и высушивать в распылительной сушилке. Однако себестоимость альбуминовой фракции выше, чем «глобулино­вой». Экономически целесообразно готовить из нее белковый препарат медицинского назначения. В этом случае требования к качеству такого рода препаратам могут быть выше, чем к продукту для пищевых целей. И основным критерием оценки качества микробных белков является содержание в них нетипичных для человека липидов. Такая же ситуация по причине производственного брака может возникнуть и в отношении белковых фракций пищевого назначения. В этих случаях каж­дая фракция должна быть подвергнута дополнительной переработке с целью удаления липидов.

В производстве белков пищевого и медицинского назначения нежелательные липиды удаляют обработкой сырых или высушенных полупродуктов последовательным промыванием осадков на фильтре 14 этанолом с гидромодулем 1. При этом водно-спиртовые стоки собирают в сборнике 15, откуда их направляют на ректификационную колонну 16. Регенерированный этанол накапливают в сборнике 17, а кубовый остаток — в сборнике 18, откуда его передают на биосинтез кормовых дрожжей или сбрасывают на очистные сооружения. Отжатые на фильтре осадки белковых фрак­ций высушивают при температуре не выше 65 ”С либо в промышленном вакуум-сушильном шкафу 19, либо в пневматической сушилке в токе нагретого азота.

5.

<< | >>
Источник: И.М. Грачева. Биотехнология биологически активных веществ. Учебное пособие для студентов высших учебных заведений./ Под редакцией д. б. н., проф. МГУШ1И.М. Грачевой ид.т.н., проф. МГУШІЛ.А. Ивановой. — М., Издательство НПО «Элевар»,2006. — 453 с.. 2006

Еще по теме 4.1.Основы технологии получения белковых изолятов:

  1. Технология получения белковых селенобогащенных БАД на основе дрожжей
  2. Получение клинических изолятов Enterococcus faecalis
  3. Переработка денуклеинизированной микробной биомассы с получением продуктов белковой природы
  4. Технология получения авермектина В1 (абамектина)
  5. Технологии получения дрожжевой РНК
  6. Технология получения препаратов БАВ из растений, органов и тканей животных
  7. Технология получения остеопластического материала
  8. Технология получения rhBMP-2
  9. З.З.Технологии получения нуклеозидов при гидролизе микробной РНК
  10. 2 Методы физико- химического контроля белковых гидролизатов и приготовляемых на их основе питательных сред
  11. 3.3. Получение красных игристых вин на основе использования иммобилизованных дрожжей
  12. Биохимические и микробиологические основы получения витамина В12 с помощью метанообразующих бактерий
  13. Основы технологии культивирования микроорганизмов-продуцентов микробных липидов
  14. Исследование in vitro биосовместимости матриксов на основе гибридной золь-гель-полимерной системы, содержащей Zr, полученных методом двухфотонной фотополимеризации
  15. Технология оптической интраоперационной диагностики в нейроонкологии на основе спектроскопического анализа нервных тканей
  16. 4.1 Происхождение изолятов С. neoformans
  17. Автоматизация анализа изображений в исследованиях мозга: постановка задач, математические основы, информационные технологии
  18. Обоснование технологии получения препарата полыни эстрагон - “ Полыни эстрагон настойка”.
- Акушерство и гинекология - Анатомия - Андрология - Биология - Болезни уха, горла и носа - Валеология - Ветеринария - Внутренние болезни - Военно-полевая медицина - Восстановительная медицина - Гастроэнтерология и гепатология - Гематология - Геронтология, гериатрия - Гигиена и санэпидконтроль - Дерматология - Диетология - Здравоохранение - Иммунология и аллергология - Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация - Инфекционные заболевания - Информационные технологии в медицине - История медицины - Кардиология - Клинические методы диагностики - Кожные и венерические болезни - Комплементарная медицина - Лучевая диагностика, лучевая терапия - Маммология - Медицина катастроф - Медицинская паразитология - Медицинская этика - Медицинские приборы - Медицинское право - Наследственные болезни - Неврология и нейрохирургия - Нефрология - Онкология - Организация системы здравоохранения - Оториноларингология - Офтальмология - Патофизиология - Педиатрия - Приборы медицинского назначения - Психиатрия - Психология - Пульмонология - Стоматология - Судебная медицина - Токсикология - Травматология - Фармакология и фармацевтика - Физиология - Фтизиатрия - Хирургия - Эмбриология и гистология - Эпидемиология -