Разработка метода синтеза и получения радиоактивно меченных тритием образцов пептида HLDF-6
Реакцию ВТКИО с газообразным тритием или дейтерием проводили при температуре 120-200оС в твердой смеси, образованной органическим веществом, нанесенным на неорганический носитель, и высокодисперсным катализатором платиновой группы.
Пептид в количестве 1.0 мг растворяли в 1 мл воды и смешивали с 20 мг неорганического носителя. Воду удаляли при уменьшенном давлении при 20°С. Неорганический носитель с нанесенным препаратом смешивали с 10 мг гетерогенного катализатора платиновой группы. В ампулу объемом 10 мл помещали полученную твердую смесь, вакуумировали, заполняли газообразным тритием до давления 250 торр и проводили реакцию ВТКИО при повышенной температуре. Ампулу охлаждали, вакуумировали, продували водородом. Пептид десорбировали 20-процентным водным этанолом. Для удаления лабильного трития меченый пептид еще дважды растворяли в 20-процентном водном этаноле и упаривали досуха. Хроматографическую очистку проводили с помощью ВЭЖХ на колонке Кромасил в градиенте метанола в присутствии 0,1-процентной гептафтормасляной кислоты. Пептид упаривали и растворяли в этаноле. Реакция ВТКИО происходит в твердой фазе на новых кислотных центрах, образующихся под действием спилловер-водо- рода. Изотопный обмен водорода происходит по электрофильному одноцентровому синхронному механизму с образованием в переходном состоянии реакции пятикоординированного углеродного атома, при котором образуется трехцентровая связь между углеродом и обменивающимися водородными атомами. Реакция происходит с сохранением конфигурации асимметрического углеродного атома, что позволяет избежать рацемизации при изотопном обмене. Исследовано взаимодействие пептидов TGENHR и TGeNHR-NH2 с дейтерием и тритием в реакции ВТКИО. Были исследованы влияние состава и соотношения компонентов твердой фазы, выбора гетерогенного катализатора платиновой группы, температуры и длительности реакции на величину выхода и включение изотопов водорода в пептиды TGENHR и TGeNHR-NH2. В результате были найдены условия реакции ВТКИО, позволяющие
Рис. 1. MALDY масс-спектры легкого (Н) и тяжелого (D) пептида TGENHR, меченного дейтерием
получить меченные тритием пептиды [3H]TGENHR и [3H]TGENHR-NH2 с молярной радиоактивностью 60 и 70 Ки/ммоль. Для получения меченных тритием пептидов [3H]TGENHR и [3H]TGENHR-NH2 была использована уникальная цельнопаяная установка по обмену водорода на тритий ОВТ-1 (ИМГ РАН). Изотопомерный состав меченых пептидов изучался в твердофазной реакции с газообразным дейтерием. Реакцией ВТКИО был получен меченный дейтерием пептид [2H]TGENHR, содержащий около 3 атомов дейтерия на молекулу (рис. 1.).
3.
Еще по теме Разработка метода синтеза и получения радиоактивно меченных тритием образцов пептида HLDF-6:
- Исследование фармакокинетики и фармакодинамики амидной формы нейропротекторного пептида HLDF-6 с использованием равномерно меченных изотопами водорода соединений
- Получение стабильно меченных БАВ химическими методами
- 11.3. Получение меченого зонда.
- Разработка промышленного метода получения коэнзимной формы витамина В12
- Биотехнологический способ получения стабильно меченых БАВ
- Получение меченных БАВ и их использование в биологии и медицине
- Получение биологических образцов для специального исследования
- Радиоактивные методы измерения износа
- Метод определения содержания селена в биологических образцах
- Радиоактивность. Параметры радиоактивного распада.
-
Акушерство и гинекология -
Анатомия -
Андрология -
Биология -
Болезни уха, горла и носа -
Валеология -
Ветеринария -
Внутренние болезни -
Военно-полевая медицина -
Восстановительная медицина -
Гастроэнтерология и гепатология -
Гематология -
Геронтология, гериатрия -
Гигиена и санэпидконтроль -
Дерматология -
Диетология -
Здравоохранение -
Иммунология и аллергология -
Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация -
Инфекционные заболевания -
Информационные технологии в медицине -
История медицины -
Кардиология -
Клинические методы диагностики -
Кожные и венерические болезни -
Комплементарная медицина -
Лучевая диагностика, лучевая терапия -
Маммология -
Медицина катастроф -
Медицинская паразитология -
Медицинская этика -
Медицинские приборы -
Медицинское право -
Наследственные болезни -
Неврология и нейрохирургия -
Нефрология -
Онкология -
Организация системы здравоохранения -
Оториноларингология -
Офтальмология -
Патофизиология -
Педиатрия -
Приборы медицинского назначения -
Психиатрия -
Психология -
Пульмонология -
Стоматология -
Судебная медицина -
Токсикология -
Травматология -
Фармакология и фармацевтика -
Физиология -
Фтизиатрия -
Хирургия -
Эмбриология и гистология -
Эпидемиология -