Иммуноферментные методы диагностики ремоделирования нервной ткани

Для повышения объективности оценки реактивности ткани спинного мозга в ответ на травму нами были разработаны способы количественной оценки процесів дегенерации и регенерации нервной ткани, а также ее ремоделирoвания в посттравматическом периоде у пациентов с повреждениями шейного отдела позвоночника.

Для оценки степени дегенерации нервной ткани в процессе ее ремоделирования в динамике нами oпределялись количественные значения содержания в сыворотке крови нейрoспецифических белков (pNF-H, MBP, anti-MAG), маркеров ремоделирования межклеточного матрикса (MMP-2, MMP-9, TIMP-1), про- (TNF_tt, IL-Ιβ, IL-6) и противoвоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов.

В качестве иммунологических маркеров регенерации нервной ткани использовали определение следующих показателей: pNF-H (альтерация аксонов) и MMP-2, MMP-9, TIMP-1 (альтерация компонентов гематоспинномозгового барьера). На основании этих параметров нами был предложен рассчетный показатель - коэффициент повреждения (К_п) нервной ткани (1):

где:

К_п - коэффициент повреждения нервной ткани;

ММР-2 - концентрация матриксной металлопротеиназы-2;

ММР-9 - концентрация матриксной металлопротеиназы-9;

TIMP-1 - концентрация тканевого ингибитора матриксной металлопротеиназы-1; pNF-H - концентрация фосфорилированного нейрофиламента-Н;

«-» - отрицательное значение, отражающее дефицит основной массы ткани и межклеточного матрикса.

В качестве иммунологических маркеров регенерации нервной ткани рассматривали уровни MBP и anti-MAG в сыворотке крови (регенерация миелиновых волокон). На основании данных параметров нами также был предложен рассчетный показатель - коэффициент восстановления (К_в) нервной ткани (2):

где:

К_в - коэффициент восстановления нервной ткани;

MBP - концентрация MBP; anti-MAG - концентрация anti-MAG;

«+» - положительное значение, отражающее префицит основной массы ткани и межклеточного матрикса.

Для повышения точности оценки процессов дегенерации нервной ткани, развивающихся при ТБ спинного мoзга в условиях MARS мы исследовали содержание про- (TNF_tt, IL-Ιβ, IL-6) и противoвоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов, учет которых позволил разработать поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа (K_mars) (3):

где:

K_mars - поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа;

IL-1 β - концентрация IL-1 β;

IL-6 - концентрация IL-6;

IL-4 - концентрация IL-4;

IL-10 - концентрация IL-10.

Полученные значения коэффициентов (формулы 1-3) рассчитывали как суммарное значение показателя состояния нервной ткани (Σ) в посттравматическом периоде следующим образом (4):

где:

Σ - суммарное значение показателя;

Кп - коэффициент повреждения;

Кв - коэффициент восстановления;

Kmars - поправочный коэффициент смешанного антагонистического ответа;

«±» - значение, усиливающее отрицательные или положительные значения суммарного показателя дегенерации нервной ткани Σ .

Значения суммарного показателя состояния нервной ткани Σ нами были оценены в динамике в основной группе пациентов (табл. 30).

Таблица 30 - Динамика суммарных показателей состояния нервной ткани у пациентов с осложненными повреждениями шейного отдела позвоночника

Согласно данным табл. 30 у больных основной группы состояние нервной ткани в остром и раннем периодах характеризовалось уменьшением явлений клеточной дегенерации и активацией внутриклеточной регенерации. Так, дегенерация нервной ткани имела наибольшую выраженность на 1-4-е сутки с момента травмы, затем происходило уменьшение суммарного показателя Σ на 7-е -14-е сутки в 1,08 раз (р_1;2