Тест-система

Биологической тест-системой во всех экспериментальных исследованиях, выполненных в рамках данной диссертационной работы, являлись лабораторные животные - крысы, линии Вистар, полученные из питомника лабораторных животных РАМН «Рапполово».

Вес животных к началу исследования составлял в среднем 200 г (таблица 6).

Таблица 6

Экспериментальные животные

Продолжение таблицы 6

Адаптация и отбор животных для исследования

Лабораторные животные до начала исследования содержались не менее 3-х дней для адаптации при групповом содержании в клетках.

Перед началом исследования животные, отвечающие критериям включения в эксперимент, были распределены на группы.

Распределение по группам

Для исключения влияния предпочтений исследователя на формирование экспериментальных групп, отбор животных осуществлялся при помощи метода модифицированной блочной рандомизации (Bland M., 2000). Для этого всех поступивших из питомника животных случайным образом помещали в ячейки блока рандомизации (число ячеек блока рандомизации кратно числу групп в эксперименте). Далее, пользуясь генератором случайных чисел (статистическая программа Statistica 6.0), получали перечень данных содержащий номера ячеек с животными и соответствующие им номера групп, куда в дальнейшем были размещены животные (Altman D.G. et al., 1999).

Идентификация животных

Маркировка клетки кодировала пол животных, породу, дату индукции патологии, дату начала введения препаратов, название группы. Каждому отобранному в исследование животному был присвоен индивидуальный номер. Индивидуальная маркировка животных была проведена методом отметки на хвосте.

Содержание животных

Животные содержались в стандартных условиях в соответствии с:

• Санитарно-эпидемиологическими правилами СП 2.2.1.3218-14 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)» (утв.

постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 29 августа 2014 г. № 51).

• Национальным стандартом Российской Федерации ГОСТ Р-53434-2009 «Принципы надлежащей лабораторной практики».

• Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях.

• Приказом Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 23 августа 2010 г.

В период акклиматизации и эксперимента животных содержали в стандартных прозрачных пластиковых клетках со стальными решетчатыми крышками с кормовым углублением (площадь пола 1696 см2). В каждой клетке животные были размещены таким образом, чтобы площадь пола на одно животное была не менее 250 см² в соответствии с Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях.

Уборка клеток и смена подстила производилась минимум 2 раза в неделю.

В период адаптации животных кормили комбикормом «Корм для содержания лабораторных животных» ПК-120-1, приготовленным по ГОСТ Р 50258-92 в соответствии с нормами, утвержденными приказом МЗ СССР №755 от 12.08.77 г.

Животные получали воду, соответствующую ГОСТу «Вода питьевая» 2874­82. Корм и вода давались ad libitum в кормовое углубление стальной решетчатой крышки клетки.

В качестве подстила использовали древесные гранулы (ООО «Биосфера», Санкт-Петербург, Россия).

Животные содержались в контролируемых условиях окружающей среды (20-26°C и относительной влажности воздуха 30-70%). Световой режим составлял 12 часов света и 12 часов темноты. При изменении погодных условий воздухообмен в помещении контролировался с помощью анемометра и путем

измерения содержания в воздухе углекислого газа и аммиака. Устанавливали режим проветривания, обеспечивающий около 15 объемов помещения в час, концентрацию CO₂не более 0,15 объемных %, аммиака — не более 10 мг/м³.

Температура и влажность воздуха регистрировались ежедневно. Никаких существенных отклонений этих параметров в период адаптации и в ходе экспериментов не произошло.

2.3.