Применение аллергена туберкулезного рекомбинантного для выявления и диагностики туберкулеза у детей с ВИЧ-инфекцией

Последние 10 лет в мировой практике активно используются новые ди­агностические тест-системы, разработанные на основе синтетических пепти­дов белков ESAT6 (early secreted antigenic target) CFP10 (culture filtrate protein), основанные на проводении количественной оценки выброса интер­ферона Y из лимфоцитов цельной крови, полученной от больного, под воз­действием антигенов от M.

В Российской Федерации, начиная с 2009 года (Приказ МЗ СР РФ № 855 от 29 октября 2009г.), широко используется отечественный препарат - аллерген туберкулезный рекомбинантный для внутрикожного введения, со­держащий белок ESAT6-CFP10 (коммерческое название препарата - ДИА- СКИНТЕСТ^®). Испытание данного теста показало, что препарат обладает высокой чувствительностью и специфичностью при идентификации инфици­рования M. Tuberculosis и не дает положительных результатов при сенсиби­лизации организма микобактериями вакцинного штаммом БЦЖ и нетуберку­лезными микобактериями [41,106]. Кроме того, многими исследованиями по­казано, что положительный результат на введение ДИАСКИНТЕСТА^® сви­детельствует об активно метаболизирующей микробной популяции в орга­низме (активная туберкулезная инфекция), что повышает риск развития ло­кального туберкулеза[101,112, 116].

В рамках нашего исследования на базе одного из домов ребенка для де­тей, больных ВИЧ-инфекцией, оставшихся без попечения родителей (г.С.- Петербург), в соответствии с Приказом МЗ и СР № 855 и инструкцией по применению препарата ДИАСКИНТЕСТ^®, 29 детям в возрасте от 2 до 6 лет обоего пола (12 девочек и 17 мальчиков) помимо туберкулиновой пробы Манту с 2ТЕ была проведена проба с аллергеном туберкулезным рекомби­нантным (ДИАСКИНТЕСТ®). Ни у кого из детей заболевания туберкулеза на момент исследования не было. У всех детей на момент проведения проб был сохранный иммунный статус, среднее значение CD4 Т-лимфоцитов со­ставило 1200± 340 кл/мкл, медиана составила 1230 клеток.

Результаты иммунологических проб представлены в таблице 4.18.

Таблица 4.18

Результаты пробы Манту с 2 ТЕ и с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® у детей, больных ВИЧ-инфекцией

Из 29 детей положительные реакции на пробу Манту определялись у 14 (48,3%) детей. Положительная реакция расценена как проявление поствакци­нальной аллергии у 12 детей, поскольку появилась через год после проведен­ной вакцинации БЦЖ (инфильтрат был в пределах 5-10 мм в диаметре), ин­фекционной аллергии (инфицирование МБТ) - у 2 детей в возрасте 6 лет.

Проба с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® была отрицательной у всех 29 детей, больных ВИЧ-инфекцией, но не больных туберкулезом, что соответ­ствует литературным данным и подтверждает значимость пробы с ДИА- СКИНТЕСТОМ в выявлении активной туберкулезной инфекции (нет ложно­положительных реакций).

Результаты пробы с аллергеном туберкулезным в сравнении с резуль­татами пробы Манту с 2ТЕ детей с ВИЧ-инфекцией, больных туберкулезом представлены в табл. 4.19.

Таблица 4.19

Результаты пробы с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® у детей, больных ВИЧ-инфекцией, сочетанным с туберкулезом

Проба с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® была проведена 45 детям с по­ложительной реакцией на пробу Манту с 2 ТЕ.

Результаты реакций на аллерген туберкулезный рекомбинантный у де­тей с туберкулезом, сочетанным с ВИЧ-инфекцией, практически совпадают с результатами на туберкулин. Положительная реакция на ДИАСКИНТЕСТ® определялись у 48,9% и у 55,6% детей - на туберкулин (p>0,05), отрицатель­ных результатов было 51,5% и 44,4% соответственно. При положительных результатах проб высокий уровень специфической сенсибилизации (гиперер- гические реакции) несколько чаще выявлялся на ДИАСКИНТЕСТ^® - (28,9%), чем на туберкулин (15,6%). Средние значения результатов проб в мм досто­верно не различались (p>0,05).

При положительных результатах проб высокий уровень специфической сенсибилизации (гиперергические реакции) несколько чаще выявлялся на ДИАСКИНТЕСТ^® - (28,9%), чем на туберкулин (15,6%). Средние значения результатов проб в мм достоверно не различались (p>0,05).

Как было показано выше, доля отрицательных туберкулиновых проб зависит от иммунного статуса больного и отчасти от формы заболевания (при диссеминированном и генерализованном туберкулезе частота отрица­тельных реакций была большей).

Мы провели анализ результатов пробы с препаратом ДИАСКИН- ТЕСТ® в зависимости от формы процесса и иммунного статуса у детей с ВИЧ-инфекцией (таблицы 4.20 и 4.21).

У детей с диссеминированными процессами доля отрицательных реак­ций на ДИАСКИНТЕСТ® была значительно выше, чем у детей при доста­точно ограниченной протяженности поражения (ВГЛУ, ПТК, другие) - 85,7% и 35,5% (ОШ=12,0; ДИ 8,07-22,7), как и доля отрицательных реакций на туберкулин - 85,7% и 25,8% (что соответствует данным, приведенным в табл. 4.20).

Таблица 4.20

Характер чувствительности на ДИАСКИНТЕСТ® у больных ВИЧ- инфекцией при различных клинических формах туберкулеза (n = 45)

Анализ результатов характера чувствительности на ДИАСКИНТЕСТ^® у больных туберкулезом, сочетанным с ВИЧ-инфекцией в зависимости от содержания CD4 лимфоцитов в периферической крови (таблица 4.21) пока­зал, что чувствительность к препарату ДИАСКИНТЕСТ^® зависела от числа CD4 лимфоцитов, по аналогии с чувствительностью к туберкулину. Среди детей с положительным ДИАСКИНТЕСТОМ доля положительных реакций уменьшалась с углублением иммунодефицита и составляла при CD4>500 кл/мкл - 77,3%, при CD4>350 кл/мкл - 18,2%, при CD4500 кл/мкл - 72,0%, при СD4>350 кл/мкл - 20,0%, при СD4500 кл/мкл до 60,0% - с содержанием СD4350 кл/мкл (ОШ=13,04; ДИ 10,7-21,4) и до 85,7% - с содержанием СD4