2 Взятие и доставка проб

2.1 При взятии проб следует соблюдать условия, позволяющие предупредить загрязнение их посторонней микрофлорой. В этих целях пробы спермы и смывы из препуциального мешка производителя берут только после соответствующей подготовки самого производителя, а также манекена, инструментария, используемого при взятии спермы, и манежа, где эту работу проводят.

2.2 Пробу спермы получают от производителей только при помощи асептически подготовленной искусственной вагины. Из спермоприемника пробу берут в стерильной мере или стерильной комнате (боксе) при помощи стерильной стеклянной пипетки из средней части эякулята при слегка приподнятой крышке спермоприемника, переносят ее в сухой стерильный флакон (пробирку, колбу) и закрывают пробкой над пламенем спиртовки. Желательны склянки с притертой пробкой. Можно также использовать и резиновые пробки, обернутые пергаментной бумагой и простерилизованные вместе с флаконами.

2.3 Для получения смыва в полость препуция вводят при помощи стерильного шприца и резиновой трубки 10 мл стерильного физиологического (0,85%) раствора натрия хлорида, правой рукой зажимают кожу у входа в препуций вместе с резиновой трубкой, а левой — проводят легкий массаж в течение 1-2 минут, перемещая раствор в полости. После этого пробу смыва насасывают поршнем шприца через резиновую трубку и переносящее в стерильные склянки.

2.4 Для исследования на стерильность, инструментов, полистироловых пипеток и т.п. смыв с них берут в настольной стерильной камере или стерильной комнате (боксе). При взятии смыва с пипеток наружную поверхность полиэтиленового мешочка, в котором упакованы пипетки, обрабатывают тампоном, смоченным 70^о спиртом.

2.5 Для взятия смыва с внутренней стороны пипетки на ее конец надевают стерильный полиэтиленовый или резиновый баллончик, с помощью которого через ту же пипетку набирают 1 мл стерильного физиологического раствора хлористого натрия и промывают пипетку 3-5 раз. Раствор хлористого натрия для этой цели расфасовывают в пробирки по 1 мл и заранее стерилизуют.

2.6 Для получения смыва с наружной поверхности пипетки (инструмента) стерильным пинцетом берут марлевый тампон диаметром 7-8 см, смачивают его стерильным физиологическим раствором хлористого натрия и тщательно протирают наружную поверхность пипетки, удерживая ее пинцетом. После этого тампон помещают в чашку с МПА (мясопептонным агаром) на 3-5 минут (тампон можно оставлять в чашке до конца инкубации) и инкубируют при температуре 37-37,5°С в течение 24 часов.

2.7 Если смыв с поверхности инструментов приходится брать непосредственно в рабочих комнатах станций или пунктов искусственного осеменения, то заготавливают специально смонтированные пробирки. Для этого на конец деревянной палочки или металлической проволоки, предварительно пропущенной через ватно-марлевую пробку, фиксируют марлевый тампон диаметром 7-8 см. Пробками с тампонами закрывают пробирки и стерилизуют их. В день получения смыва в каждую пробирку с тампоном наливают по 1-2 мл стерильного физиологического раствора хлорида натрия так, чтобы марлевый тампон находился над уровнем жидкости. Перед взятием смыва пробирки наклоняют и увлажняют тампон. Затем тампоном быстро протирают поверхность инструмента и помещают в ту же пробирку.

2.8 Для получения смыва с внутренней поверхности искусственной вагины к последней присоединяют с обоих концов стерильные спермоприемники. Один конец вагины приоткрывают и вливают 5 мл физиологического раствора. Легкими движениями вагину вращают и слегка встряхивают.

2.9 Пробы для исследования направляют в лабораторию в объеме: неразбавленной спермы — не менее 1 мл; вазелина, химических реактивов, смыва, сред и т.п: — 15-10 мл или граммов. На пробирки (флаконы) наклеивают этикетки с указанием номера пробы и доставляют в лабораторию в термосе или ящике. Если время транспортировки проб до лаборатории будет превышать 2 часа, то в термос необходимо положить лед, на который кладут флаконы, обернутые ватой (температура 2-4°С). С момента взятия проб до начала исследования допускается их хранение не более 6 часов при температуре 2-4^оС и не более двух часов при более высокой температуре. Замороженную сперму транспортируют в термосе с жидким азотом.

2.10 К каждой пробе, направляемой в лабораторию, прилагают сопроводительный документ и опись (приложение 1). В сопроводительном документе указывают:

1) наименование учреждения, которое отправляет пробы;

2) количество направляемых проб;

3) год, месяц, число и час взятия спермы;

4) какими методами и в каких условиях взяты пробы;

5) сведения об использовании производителя и его ветеринарно-санитарной обработки;

6) для какой цели направляются пробы;

7) характер упаковки и способ транспортировки проб;

8) опись проб;

9) должность и адрес лица, взявшего пробу, и его подпись.

Опись проб составляют в 3 экземплярах.