3.2.1. Неполовозрелые крысы.

Как указывалось ранее, для выявления влияния барбитуратов на клетки ядер основных отделов МТ головного мозга неполовозрелые животные получали фенобарбитон в дозе 30 мг/кг. Сроки эксперимента при этом составили 7, 15, 30 и 60 суток.

Полученные при микроскопическом исследовании данные подтверждаются морфометрически и результатами статистического анализа. Так, в экспериментальной группе животных по сравнению с контрольной на 7

Рис. 3.6. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 7 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Околоядерный хроматолиз.

Рис. 3.7. Микрофотография. Латеральное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 7 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг.

1. Околоядерный хроматолиз.

2. Увеличение площади клетки.

Рис. 3.8. Микрофотография. Латеральное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга крысы неполовозрелого возраста на 7 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Околоядерный хроматолиз.

2. Увеличение площади клетки и ядра.

3. Краевое расположение ядра и ядрышка.

Рис. 3.9. Микрофотография. Медиальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга крысы неполовозрелого возраста на 7 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Околоядерный хроматолиз.

2. Краевое расположение ядра и ядрышка.

3. Перицеллюлярный отек.

сутки в базо-латеральном отделе МТ головного мозга происходило увеличение площади тела клеток с 59,67 ± 0,03 мкм² до 69,91 ± 0,02 мкм² (t = 4,6; Р < 0,05), количества общей глии с 1913,04 ± 0,66 до 2496,45 ± 1,45 (t = 5,44; Р < 0,05), а также сателлитной глии с 788,21 ± 0,66 до 1161,16 ± 1,13 (t = 4,64; Р < 0,05). Изменения указанных показателей носили статистически достоверный характер. Изменения остальных показателей не являлись достоверными. В кортико-медиальном отделе МТ головного мозга на 7-е сутки эксперимента происходило увеличение площади тела клеток с 66,16 ± 0,02 мкм² до 78,81 ± 0,04 мкм² (t = 3,56; Р < 0,05) и их ядер с 4 ± 0,01 мкм² до 4,67 ± 0,01 мкм² (t = 2,53; Р < 0,05), а также, как и в базо-латеральном отделе, увеличение количества общей глии с 2610,99 ± 1,84 до 2775,59 ± 1,1 (t = 2,76; Р < 0,05). Как видно, все эти изменения цифровых показателей носят статистически достоверный характер.

Вышеприведенные данные свидетельствуют, что на 7-ые сутки эксперимента статистически достоверные изменения цифровых показателей нейронов ядер основных отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс наблюдались лишь в значениях площадей клеток в обоих отделах, а ядер клеток – только в кортико-медиальном отделе. Показатели, характеризующие количество клеток глии в ядрах указанных отделов статистически достоверно изменялись следующим образом: плотность общей глии – в обоих отделах, плотность сателлитной глии – только в базо-латеральном отделе. Следует отметить, что на 7-е сутки наиболее выраженная реакция нейронов наблюдалась в кортико-медиальном отделе МТ, а реактивность глии – в базо-латеральном отделе.

В средние сроки эксперимента (15 суток) вышеперечисленные неспецифические изменения нервных клеток изучаемых ядер сохранились. В этот период наблюдались также гиперхромные клетки при наличии набухших, имеющих вакуоли в цитоплазме клеток, с явлениями хроматолиза, величина которого увеличилась и распространилась на большую часть клеточного тела. Появлялись отдельные нейроны, в которых преобладали уже дистрофические изменения в виде сморщивания. Такие клетки уменьшались в размерах, имели вытянутые контуры тела. Иногда становились видны, на некотором расстоянии от тела клетки, отростки, которые истончены или штопорообразно извиты. Нередко вокруг нейронов группировались (до 5 и более) клетки глии (рис. 3.10-3.13).

Полученные при микроскопии визуальные данные подтверждались данными морфометрии. Так, в базо-латеральном отделе статистически достоверный характер носили изменения площади клеток с 45,71 ± 0,03 до 73,33 ± 0,02 (t = 11,268; Р < 0,05), ядерно-цитоплазматического отношения с 0,11 ± 0,002 до 0,06 ± 0,001 (t = 10,04; Р < 0,05), плотности сателлитной глии с 1202,76 ± 0,78 до 1344,08 ± 1,1 (t = 2,631; Р < 0,05), а также перинейронального индекса с 0,52 ± 0,03 до 0,66 ± 0,02 (t = 3,112; Р < 0,05).

Таким образом, на 15-е сутки статистически достоверные изменения изучаемых показателей нейронов происходили в ядрах обоих отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс, а существенные изменения показателей глии наблюдались только в ядрах базо-латерального отдела МТ. Из вышеприведенного следует, что, видимо, наиболее ранимыми были ядра базо-латерального отдела МТ головного мозга крыс неполовозрелого возраста, где появлялись статистически достоверные изменения цифровых показателей и нейронов, и глии.

Вышеперечисленные морфологические изменения в клетках ядер

Рис. 3.10. Микрофотография. Латеральное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Краевое расположение ядра и ядрышка.

3. Тотальный хроматолиз.

Рис. 3.11. Микрофотография. Кортикальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Краевое расположение ядра.

3. Сегментарный хроматолиз.

4. Гиперхроматоз.

5. Перицеллюлярный отек.

Рис. 3.12. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Краевое расположение ядра.

3. Гиперхроматоз.

4. Вакуолизация цитоплазмы.

5. Перицеллюлярный отек.

Рис. 3.13. Микрофотография. Центральное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 15 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Сморщивание нейронов.

3. Сателлитоз.

4. Перицеллюлярный отек.

основных отделов МТ головного мозга крыс данной возрастной группы особенно ярко были выражены в более длительные сроки эксперимента, то есть на 30 сутки воздействия фенобарбитона. Так, в ряде нервных клеток изучаемых ядер изменения носили обратимый характер: хроматолиз околоядерный и тотальный, набухание, наличие мелких и крупных вакуолей в цитоплазме, изменение размеров ядра и ядрышка, их эктопия, гиперхроматоз, перицеллюлярный отек. В то же время накапливались и дистрофически измененные клетки. Присутствовали сморщенные клетки, уменьшенные в размерах, которые имели четкие контуры и вытянутую веретенообразную форму. Ядра таких нейронов часто палочковидные, плохо или совсем неразличимы. На отдельных препаратах обнаруживались явления нейронофагии, клетки-тени. Вокруг нервных клеток нередко отмечалось увеличение количества макроглии (рис. 3.14-3.17).

На 30 сутки эксперимента в ядрах базо-латерального отдела МТ головного мозга неполовозрелых крыс наблюдалось увеличение: площади нервных клеток с 57,92 ± 0,07 до 67,35 ± 0,05 (t = 3,067; Р < 0,05), плотности общей глии с 2241,93 ± 2,62 до 2712,36 ± 2,66 (t = 2,689; Р < 0,05), плотности сателлитной глии с 1044,35 ± 2,33 до 1475,81 ± 3,44 (t = 2,445; Р < 0,05), перинейронального индекса с 0,46 ± 0,04 до 0,8 ± 0,11 (t = 2,438; Р < 0,05) и интерглиального коэффициента с 0,46 ± 0,04 до 0,54 ± 0,06 (t = 2,853; Р < 0,05). Указанные изменения являлись статистически достоверными.

Рис. 3.14. Микрофотография. Медиальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Увеличение площади клетки и ядра.

2. Околоядерный и тотальный хроматолиз.

3. Перицеллюлярный отек.

Рис. 3.15. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга крысы неполовозрелого возраста на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Вакуолизация цитоплазмы.

3. Перицеллюлярный отек.

Рис. 3.16. Микрофотография. Базальное ядро базо-латерального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Сморщивание.

2. Сателлитоз.

Рис. 3.17. Микрофотография. Кортикальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 30 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Клетки-тени.

показателей статистически недостоверны). Таким образом, на 30 сутки эксперимента статистически достоверные изменения цифровых показателей нейронов характерны для ядер кортико-медиального отдела МТ головного мозга крыс неполовозрелого возраста. Существенные изменения показателей глии наблюдались в ядрах обоих отделов МТ. При этом наиболее ранимыми представлялись ядра кортико-медиального отдела, где были выявлены статистически достоверные изменения цифровых показателей не только глии, но и нейронов.

При увеличении сроков эксперимента до 60 суток в нервной ткани изучаемых ядер наблюдались признаки и репаративного процесса. Морфология нейронов нормализовалась: исчезали признаки набухания, отмечалось новообразование нисслевского вещества (прежде всего в перинуклеарной зоне), восстанавливались ядро и ядрышко. Со стороны глии отмечались пролиферация и активация макроглии, перинейрональный сателлитоз (рис. 3.18). На 60-е сутки в базо-латеральном отделе МТ происходило уменьшение площади сечения ядер нейронов с 4,39 ± 0,01 до 3,73 ± 0,07 (t = 2,265; Р < 0,05) и уменьшение глиального индекса с 1,42 ± 0,06 до 1,34 ± 0,07 (t = 2,445; Р < 0,05), то есть изменения носили достоверный характер (по остальным изучаемым показателям изменения статистически недостоверны). В кортико-медиальном отделе МТ наблюдалось увеличение площади сечения нейронов с 66,3 ± 0,28 до 82,32 ± 0,06 (t = 2,042; Р < 0,05) и плотности общей глии с 2361,78 ± 2,29 до 3080,65 ± 5,85 (t = 3,063; Р < 0,05). Вышеуказанные показатели являлись статистически достоверными. По остальным морфометрическим показателям изменения не достигали достоверности.

Для более глубокого анализа обнаруженных нами в эксперименте морфологических изменений был использован корреляционный анализ. С его помощью выяснялось, как изменится взаимосвязь показателей, характеризующих состояние ядер основных отделов МТ головного мозга крыс неполовозрелого периода при воздействии фенобарбитона в дозе 30 мг/кг. Корреляционный анализ включал 2 изучаемых отдела МТ и 9 показателей

Рис. 3.18. Микрофотография. Кортикальное ядро кортико-медиального отдела миндалевидного тела головного мозга неполовозрелой крысы на 60 сутки эксперимента с фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг. Окраска по Нисслю в модификации Викторова. Увеличение 1200.

1. Гиперхроматоз.

2. Активация и пролиферация глии.

3. Сателлитоз.

клеток изучаемой структуры головного мозга. При исследовании корреляционных связей между ядрами базо-латерального и кортико-медиального отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс при интоксикации фенобарбитоном в дозе 30 мг/кг длительностью 7 суток взаимосвязь средней силы (0,3 < r < 0,7) отмечалась лишь по показателю плотности общей глии. По остальным показателям наблюдали слабую взаимосвязь (r < 0,3). Взаимосвязей сильной степени между исследуемыми отделами МТ при указанных условиях эксперимента мы не наблюдали.

На 15 сутки эксперимента сильных корреляционных связей (0,7 < r < 1,0) между отделами МТ также не было обнаружено, а средней силы связи (0,3 < r < 0,7) были установлены по показателям перинейронального индекса и глиального индекса. По остальным показателям была выявлена слабая взаимосвязь (r < 0,3).

При эксперименте с длительностью влияния фенобарбитона в дозе 30 мг/кг 30 суток связи средней силы (0,3 < r < 0,7) были отмечены по показателям плотности нейронов, глиального индекса и интерглиального коэффициента. Остальные связи были зафиксированы как слабые. Сильных связей между исследуемыми параметрами, как и в предыдущие сроки эксперимента, выявлено не было.

На 60 сутки эксперимента сильная взаимосвязь (0,7 < r < 1,0) обнаруживалась между ядрами основных отделов МТ головного мозга по плотности сателлитной глии и по показателю интерглиального коэффициента. Средней силы связи (0,3 < r < 0,7) были выявлены по плотности нейронов и показателю глиального индекса. По остальным показателям установлена слабая взаимосвязь (r < 0,3).

При сопоставлении и сравнении коэффициентов корреляции по срокам эксперимента наибольшее число сильных связей между отделами МТ головного мозга неполовозрелых крыс наблюдалось при длительности эксперимента 60 суток, связей средней силы при длительности 30 суток, а другие по длительности эксперименты изобиловали слабыми связями.

Сравнивая корреляционные связи ядер отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс контрольных и экспериментальных групп, можно отметить, что происходит изменение силы взаимосвязей, как по количеству, так и по качеству.

Анализа корреляционных связей показал следующее:

1. воздействие фенобарбитона в дозе 30 мг/кг на ядра основных отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс изменяет характер и силу взаимосвязей между основными отделами МТ головного мозга;

2. по сравнению с контрольными группами во все сроки эксперимента изменяется характер и сила взаимосвязей между ядрами отделов МТ в сторону ослабления в экспериментальных группах;

3. сильные взаимосвязи между отделами МТ головного мозга отмечались только при длительности эксперимента 60 суток;

4. средних связей было обнаружено больше, чем сильных, однако, меньше, чем слабых;

5. слабые взаимосвязи между отделами МТ головного мозга сохранялись во все сроки эксперимента.

Для выявления влияния барбитуратов на нервную ткань ядер отделов МТ головного мозга неполовозрелых крыс, экспериментальные животные получали фенобарбитон и в дозе 70 мг/кг. Полученные результаты также анализировались и сравнивались с показателями изучаемых ядер МТ головного мозга крыс контрольных групп.

Получены следующие данные. На препаратах указанной экспериментальной группы (IФ2/7), в отличие от контрольной, на 7 сутки изменения имели те же закономерности, что и при интоксикации фенобарбитоном в меньшей дозе (30 мг/кг), но носили более выраженный характер. Это выражалось выявлением большего количества клеток с признаками высокой функциональной нагрузки, а именно с признаками хроматолиза (особенно околоядерного) и с гидропическими изменениями. Нередко определялись нейроны с явлениями острого набухания, такими как: увеличение размеров клеточного тела, округление клеток, увеличение и просветление ядра, которое иногда занимало эксцентрическое положение. В некоторых клетках наблюдалось утолщение отростков, и они становились видимыми на значительном протяжении от тела клетки. Со стороны макроглии отмечалось усиление пролиферативных процессов и наблюдалось перераспределение последней вокруг нейронов, что также может свидетельствовать о повышении потребностей нейронов в связи с физиологическими изменениями (рис. 3.19-3.20).

Полученные при микроскопии данные подтверждались результатами морфометрии и статистического анализа. Так, на 7 сутки эксперимента по сравнению с контролем в базо-латеральном отделе МТ увеличивались площади клеток с 59,67 ± 0,03 до 83,33 ± 0,06 (t = 5,124; Р < 0,05) и ядерно-цитоплазматическое отношение с 0,05 ± 0,001 до 0,08 ± 0,001 (t = 5,935; Р < 0,05). Со стороны глии было выявлено увеличение количества сателлитной глии с 788,21 ± 2,81 до 1161,13 ± 1,13 (t = 2,981; Р < 0,05) и глиального коэффициента с 1,12 ± 0,04 до 1,38 ± 0,07 (t = 2,468; Р < 0,05). Указанные изменения носили статистически достоверный характер. Остальные показатели, характеризующие нервные клетки и глию, не являлись достоверными. В кортико-медиальном отделе МТ головного мозга происходило увеличение площади сечения клеток с 66,16 ± 0,04 до 89,18 ± 0,06 (t = 3,559; Р < 0,05) и их ядер с 4 ± 0,01 до 4,67 ± 0,01 (t = 2,363; Р