Діагностика саркоцистозу

Діагноз на саркоцистоз ставлять комплексно. Враховують епізоотичні дані, клінічні ознаки, результати мікроскопічних та серологічних досліджень.

Діагноз підтверджують результатами лабораторних досліджень.

Метод Фюллеборна (метод флотації, або спливання). У склянку вносять 5 г фекалій і, помішуючи скляною або дерев’яною паличкою, добавляють насичений розчин кухонної солі (на одну частину фекалій 15-20 частин розчину солі). Для його приготування у 1 л окропу розчиняють 400 г солі. Отриманий розчин фільтрують крізь марлю або вату та після охолодження використовують. Густина такого розчину становить 1,2. Суспензію фекалій фільтрують крізь металеві або марлеві ситечка в іншу склянку і відстоюють упродовж 40-50 хв (іноді достатньо 30 хв). Ооцисти з невеликою щільністю спливають. За допомогою металевої петлі діаметром не більш як 1 см кілька крапель (частіше три) рідини переносять з поверхневого шару на предметне скло, після чого досліджують під мікроскопом (рис. 17).

Для дослідження фекалій методом флотації можна використовувати й інші флотаційні рідини (наприклад, насичений розчин сульфату магнію, насичені розчини гіпосульфіту натрію та інших солей).

Рис. 17. Послідовність маніпуляцій (а-е) при дослідженні фекалій свиней методом Фюллеборна.

Метод Дарлінга. Фекалії змішують з водою і центрифугують упродовж 1-2 хв. Після цього рідину з пробірки зливають, а до осаду добавляють суміш однакових кількостей гліцерину і насиченого розчину кухонної солі. Його ретельно перемішують і знову центрифугують 1-2 хв. При повторному центрифугуванні ооцисти саркоцист спливають на поверхню.

Враховують також патологоанатомічні зміни. При розтині з уражених ділянок кишечника роблять глибокі зскрібки зі слизової оболонки, у першу чергу клубової кишки. Їх розміщують на предметному склі, накривають покривним, здавлюють і досліджують як незабарвлені препарати, так і пофарбовані за методом Романовського. При мікроскопії виявляють ендогенні стадії розвитку саркоцист (мікро- та макрогамети, зиготи).

При розтині трупів і ветеринарно-санітарній експертизі туш свиней цисти збудників хвороби знаходять у м’язах стравоходу, язика, серця, діафрагми, очеревини, а також у скелетній мускулатурі (рис. 18). При дослідженні м’язів для виявлення мікроцист

Рис. 18. Sarcocystis suicanis у м’язах свині.

використовують компресоріум.

Попередньо зрізи фарбують фарбою Гімзи за методом Романовського, розчинами метиленового синього, генціанвіолету або азур -еозином. Саркоцисти фарбуються у блакитний або темно-синій колір.

Розроблено метод фарбування за А.Г. Кокоріною. Перед проведенням компресійного методу на зрізи наносять 2-3 краплі суміші з рівних частин 0,5 %-го водного розчину метиленового блакитного й льодяної оцтової кислоти. Потім, через 3-5 хвилин, зрізи освітлюють 2-3 краплями 25 %-го розчину нашатирного спирту. Після компресації матеріал розглядають під малим збільшенням мікроскопу. На блакитному фоні м’язової тканини мікроцисти саркоцист мають темно-синій колір.

Можна застосовувати люмінесцентний метод діагностики саркоцистозу. Внаслідок дії ультрафіолетових променів збудники хвороби в темряві флуоресціюють помаранчевим кольором. Тушу оглядають в темному приміщенні за допомогою люмінескопа, в якому джерелом ультрафіолетових променів є ртутно-кварцова лампа.

Розроблено ефективний метод перетравлення м’язових тканин в штучному шлунковому соку.

Гістологічні дослідження проводять загальноприйнятим методом з фіксацією шматочків м’язів, паренхіматозних органів, стінки кишечнику в 10 %-вому розчині формаліну та фарбуванням гематоксилін-еозином.

Серологічні методи діагностики високо специфічні й можуть використовуватися для діагностики саркоцистозу (реакції непрямої імунофлюоресценції, IFA, ELISA та ін.). Позитивні результати отримано при застосуванні полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Для постановки реакцій потрібні антигени, які готують за різними методиками з паразитів. Антигени вводять тваринам внутрішньошкірно у дозах 0,1-0,2 мл. При позитивній реакції у місці введення антигену через певний час (5 хв - рання реакція, 24 год - пізня реакція) розвивається запалення і потовщення складки шкіри.

Саркоцистоз потрібно відрізняти від трихінельозу свиней. Навколо спірально закрученої личинки трихінели у м’язах формується капсула лимоноподібної форми, розміри якої не перевищують 0,68 мм у довжину і 0,37 мм у ширину.

7.5.