Состояние печени

Основным местом метаболизма большинства лекарственных средств является печень, поэтому она рассматривается как орган, наиболее под­верженный действию препаратов. В гепатоцитах представлен набор ферментов, осуществляющих окисление большинства лекарственных средств.

Методы оценки функционального состояния печени многочисленны. Основным критерием их использования является достоверная оценка всех основных функций печени у экспериментальных животных.

Исследование белковообразующей функции печени основывается на определении соотношений между отдельными фракциями. Для этой це­ли может быть использован метод электрофореза. При условии одно­временного определения общего белка сыворотки крови этот метод по­зволяет выражать данные протеинограммы не в относительных, а в аб­солютных величинах, что дает более объективную информацию. Изме­нения в содержании общего белка сыворотки крови, как и сдвиги в со­отношении белковых фракций, соответствуют выраженным поражени­ям печеночной паренхимы. Однако следует иметь в виду, что сдвиги в

соотношении белковых фракций могут быть связаны не только с пора­жениями печени.

Одним из нарушений синтетической функции печени является сни­жение образования протромбина, поэтому определение протромбина является очень важным исследованием для суждения о состоянии син­тетической функции печени при хроническом введении веществ.

Известные в настоящее время исследования липоидной функции пе­чени (определение холестерина в крови) позволяют констатировать из­менения при тяжелых поражениях печени. Большей чувствительностью обладает тест на содержание (накопление) липидов в паренхиме печени.

Среди методов исследования углеводной функции печени главное значение принадлежит нагрузке галактозой, метаболизм которой осу­ществляется исключительно печенью; определение содержания глико­гена в печени позволяет обнаружить изменение лишь при действии вы­соких концентраций токсических веществ.

Все методы исследования пигментной функции печени основаны на определении способности печени к превращению и экскреции пигмен­тов, однако следует отметить, что билирубинемия и билирубинурия встречаются только в далеко зашедших случаях гепатопатии. По дан­ным ряда исследователей, более чувствительным показателем состоя­ния пигментной функции печени является содержание уробилина или копропорфирина в моче.

Печень не только главное место биотрансформации ксенобиотиков, но и орган экскреции, поэтому исследование состояния экскреторной функции печени является очень важным при оценке гепатотоксичности лекарственных веществ. Для этого используется целый ряд тестов, ос­нованных на нагрузке веществами, удаляемыми из системы общего кровотока с желчью. Из многочисленных тестов в настоящее время в токсикологии наиболее широко используется гексеналовая проба, когда детоксицируюшая функция печени оценивается по длительности сна животных после введения гексенала.

Для выявления патологии печени имеют большое значение исследо­вания энзимов крови. В токсикологической практике широко исследу­ются аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (ACT), щелочная фосфатаза, фруктозофосфатальдолаза, холинэстераза и др. Ценность этих исследований состоит в том, что при них не требу­ется введения животным дополнительных веществ

Большую информацию как диагностический тест при лекарственных поражениях печени может дать определение содержания желчных ки­слот в плазме крови.

Используются и некоторые интегральные показатели, как, например, изменение весовых коэффициентов печени. Большая роль при оценке гепатотоксичности в экспериментальной токсикологии отводится пато­морфологическим исследованиям.

Сравнительные морфобиохимические исследования показывают, что даже в период повышенной устойчивости организма к химическому агенту в клетках печени, одной из основных барьерных систем, обна­руживаются изменения, которые в дальнейшем могут прогрессировать и приводить к снижению резистентности и развитию патологических сдвигов как на клеточно-тканевом, так и на организменном уровне.

По нашим многолетним наблюдениям, наиболее частыми при­знаками токсического повреждения печени лекарственными препа­ратами являются белковая (зернистая и гидропическая) дистрофия гепа­тоцитов и их липидная инфильтрация. Воздействие гепатотропных ядов с различными точками приложения вызывает преимущественно повре­ждение светлых клеток, что коррелирует со снижением антитоксиче­ской функции органа. Структура темных гепатоцитов в основном оста­ется интактной [21]. Известно, что степень поражения печени токсиче­ским агентом зависит от активности микросомальных ферментов. Су­ществует прямая связь между гистологическими изменениями в печени, скоростью элиминации вещества и активностью печеночных фермен­тов, метаболизирующих ксенобиотики [274]. Вопросу роли микросо­мальных ферментов печени (их индукции или ингибирования) в прояв­лении гепатотоксического действия лекарственных средств посвящены многочисленные исследования.

Учитывая многогранную роль печени в метаболизме, обезврежи­вании и экскреции лекарственных препаратов, необходимо исследовать функциональное состояние и структуру ткани печени при изучении без­вредности нового лекарственного препарата. Его влияние на печень может варьировать в зависимости от способа поступления в организм, поэтому гепатотоксичность необходимо оценивать при всех путях вве­дения вещества экспериментальным животным.

Приводим минимальный перечень тестов контроля функционального состояния печени, рекомендованный Минздравом России [113].

• Гексеналовый сон

• Бромсульфалеиновая проба

• Общий белок сыворотки крови

• Белковые фракции сыворотки крови

• Общий холестерин сыворотки крови

• Сахар крови

• Активность щелочной фосфатазы

• Активность трансаминаз крови

• Желчные кислоты

При обнаружении каких-либо отклонений в показателях функции или структуры печени необходимо определить значимость выявленной патологии и степень ее обратимости.

Комплексный подход к изучению гепатотоксичности можно проде­монстрировать на примере исследования хронической токсичности ан­тибактериальных препаратов диоксидина и хиноксидина на крысах.

Диоксидин при подкожном введении крысам в дозе 10 мг/кг в тече­ние 3 мес. не оказывал влияния на биохимические показатели крови, однако было обнаружено удлинение времени гексеналового сна. При увеличении дозы препарата до 20 мг/кг через 3 мес. применения в крови определились более низкие, чем в контроле, показатели активности ще­лочной фосфатазы и аланиновой трансаминазы. Длительность гексена­лового сна также была выше, чем в контрольной группе сравнения. Эти изменения носили обратимый характер и не наблюдались у животных после прекращения введения препарата.

Введение диоксидина в дозе 250 мг/кг приводило к изменениям в биохимических показателях крови уже через неделю применения. У крыс, кроме перечисленных выше изменений, отмечалось низкое со­держание белка в крови. Все выявленные изменения носили стойкий характер и определялись через неделю после прекращения введения препарата.

Хиноксидин вызывал аналогичные изменения биохимических пока­зателей в сыворотке крови при более длительном введении.

Патоморфологические исследования ткани печени показали, что при длительном подкожном введении (3 мес.) даже в дозе 10 мг/кг диокси­дин вызывает у части животных капиллярное полнокровие и небольшие признаки белковой и жировой дистрофии, которые не определяются у животных, обследованных после прекращения введения препарата.

Увеличение дозы диоксидина до 50 мг/кг уже через 6 нед приводит к появлению в печени признаков белковой и жировой дистрофии. При дальнейшем увеличении дозы диоксидина патологический процесс в печени развивается через более короткий срок. Однако следует отме­тить, что после прекращения введения препарата структура гепатоцитов восстанавливается.

Аналогичное гепатотоксическое действие оказывает и хиноксидин,

но для его проявления требуется более продолжительное введение пре­парата.

Таким образом, комплексный подход к оценке влияния лекарст­венного средства на печень позволяет выявить патологию, установить дозовую зависимость данного эффекта и степень его обратимости. На основании анализа полученных данных делается прогноз возможной гепатотоксичности препарата при использовании его в клинике, реко­мендуются противопоказания и ограничения при его использовании.

2.2.2.2.