МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА

Для исследования В-системы иммунитета определяли:

- абсолютное и относительное количество В-лимфоцитов (СО 19 и М- РОЛ) в периферической крови;

- иммуноглобулины классов M,G,A в сыворотке крови;

- содержание ЦИК крупных, средних и .мелких размеров.

Определение В-лимфоцитов проводили в реакции М-

розеткообразования, которая основана на способности В-лимфоцитов, несущих на своей поверхности Ig М, реагировать с эритроцитами мыши (Петров Р.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 1997).Иммуноглобулииы М, G, А определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Manchini G. с использованием моноспецифическнх сывороток (НИИ эпидемиологии и микробиологии, Нижний Новгород). Метод основан на измерении кольца преципитации, образующегося при внесении исследуемой сыворотки в лунки, вырезанные в слое агара Difco, в котором предварительно диспергирована моноспецифическая сыворотка. Диаметр кольца преципитации прямо пропорционален концентрации исследуемого иммуноглобулина. Содержание Ig определяли относительно стандартной сыворотки крови человека с известной концентрацией Ig.

Определение ЦИК проводили по методике D. Bout et al, основанной на осаждении ЦИК в растворе пол'иэтиленгликоля (ПЭГ) с молекулярной массой 60*00. Раствор ПЭГ преципитирует иммунные комплексы и изменяет при этом плотность среды, что регистрируется фотокалориметрическим методом. Для определения содержания ЦИК брали сыворотку крови, разведенную в соотношении 1:3 боратным буфером. Крупные ЦИК определяли при добавлении в опытную пробирку 2,7 мл 2% ПЭГ в боратном буфере, средние -3,75%) ПЭГ, для определения мелких ЦИК - 5,5% ПЭГ. Результаты выражали в условных единицах оптической плотности по формуле: ЦИК, усл.сд./100 мл ~ (ОД опыт ОД контроль) X 100.

Активность комплемента сыворотки крови определяли микромётодом

9

по Л.В.Вавиловой - по 50% гемолизу (СН50 в усл. сд.), в основе которого лежит его способность вызывать лизис эритроцитов в гемолитической системе. Использовали набор реагентов, разработанных НИИ гематологии и переливания крови (Киров).

Степень иммунных расстройств (СИР) (А.М. Земсков, В.М. Земсков, 1993 г.) расценивали по формуле

((Показатель конкретного больного/ Показатель нормы)-1 )х100

Положительный результат расценивали при уменьшении и/или отсутствии СИР, при переходе СИР от депрессии к стимуляции. При сохранении исходного уровня расстройств иммунитета данные расценивались как отсутствие изменений. Сохранение дисфункции определялось при появлении или нарастании степени депрессии показателя. Следует отметить, что усреднённые показатели не всегда дают представления о том, как часто в группе обследуемых больных выявляются изменения этих показателей, выходящие за пределы интервала нормативных значений (Соловьёва Ю.Ю. с соавт., 2003). Поэтому мы считали также целесообразным изучить частоту сниженных и повышенных показателей иммунной системы у больных хроническим реактивным артритом хламидийной этиологии.