ВЛИЯНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА НЕКОТОРЫЕ СВОЙСТВА ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ

Помимо определения влияния некоторых экологических факторов на различные аспекты распространения вибрионов Эль-Тор (показатели интенсивности сезонность, длительность выделения), изучению подверглись некоторые их свойства: морфология колоний, агглютинабельность холерными RO-, О- и типоспецифическими сыворотками, лизис фагом Эль- Тор, гемолитическая активность по Грейгу, вирулентность (по фаговому тесту и определенная на кроликах-сосунках).

Изменение морфологии колоний вибрионов (появление зернистости, мутности, уменьшение размеров, врастание в агар) отмечалось среди штаммов вибрионов, выделенных от гидробионтов,— в 1,3 раза чаше, чем у выделенных из пре­сных водоемов, в 2,9 раза чаще, чем среди штаммов, выде­ленных из сточных вод, и в 5 раз чаще, чем среди штаммов, выделенных из морской воды.

Вибрионы Эль-Тор с такими проявлениями изменчивости, как агглютинабельность холерной RO-сывороткой, снижение агглютинабельности О-холерной и типоспецифическими хо­лерными сыворотками, чаще встречались среди штаммов, выделенных из морской воды (в 52,4; 43,6 и 10,9 раза соот­ветственно), чем среди вибрионов, выделенных из воды пре­сных водоемов. Среди штаммов, выделенных из морской воды, по сравнению с выделенными из других экосистем, более чем на 10% реже проявлялась резистентность к бактериофагу Эль- Тор. Результаты изучения перечисленных свойств вибрионов Эль-Тор, выделяемых на протяжении 19 лет из различных экосистем на территории СССР, представлены в табл. 42.

Различия в частоте изменчивости вибрионов Эль-Тор по всем перечисленным признакам зависят не только от объек­тов выделения, но и от климатогеографических областей и зон. Так, вибрионы с измененной морфологией колоний чаще выделяли на территориях континентальной Западно- Сибирской климатогеографической области (из пресных водоемов 24,5%, из сточных вод 9,8%), континентальной Восточно-Сибирской области (соответственно 10,4 и 7,0%), мусонной Дальневосточной области (соответственно 4,7 и 20,0%), а также в области Поволжья (соответственно 13,7 и 3,6%).

Таблица 42

Изменчивость некоторых свойств вибрионов Эль-Тор, выделенных на территории Советского Союза из различных экосистем с 1970 по 1988 г.

областей и зон (зоны — Белорусская ССР, Украинская ССР, Молдавская ССР; области — Атлантико-Арктическая, Закав­казье, континентальная Южно-Туранская) такие вибрионы, независимо от экосистемы, не выделяли на протяжении всех лет наблюдения.

Штаммы вибриона Эль-Тор, агглютинирующиеся РО-хо- лерной сывороткой, чаще встречались среди штаммов Эль- Тор, выделенных из сточных вод в зоне Белорусской CCP (16,6%) и континентальной Северо-Туранской области (17,3%), а также среди штаммов, выделенных из морской воды на территории этой области (33,3%) и континентальной Восточ­но-Европейской области (54,8%).

Что касается вибрионов Эль-Тор со сниженной агглютина- бельностью холерными О- и типоспецифическими сыворот­ками, то наиболее часто они встречались среди штаммов, выделенных из сточных вод в Белорусской ССР, из морской воды — на территории континентальной Восточно-Европей­ской, из пресных водоемов континентальной Северо-Туран­ской, из сточных вод — континентальной Западно-Сибирской климатогеографических областей. На остальных территориях, за редкими исключениями, количество штаммов с такими признаками изменчивости было примерно одинаковым, при этом чаще встречались штаммы со сниженной агглютинабель- ностью типоспецифическими сыворотками, чем О-холерной сывороткой.

За исключением штаммов вибриона Эль-Тор, выделенных из сточных вод на территории муссонной Дальневосточной климатогеографической области и от гидробионтов —• на тер­ритории континентальной Восточно-Европейской области, у остальных штаммов этих микроорганизмов, независимо от экосистем и климатогеографических областей, с разной час­тотой выявлялась резистентность к бактериофагу Эль-Тор — от 0,6 до 100,0%.

По частоте встречаемости таких штаммов, выделенных из воды пресных водоемов, административные территории СССР можно было разделить на 4 группы.

К первой группе, в которой количество фагорезистентных штаммов вибрионов Эль-Тор не превышало 5,0%, относятся Волго-Вятский район, Западная и Восточная Сибирь, Даль­ний Восток.

Вторая группа территорий, в пределах которых фагорезис­тентные штаммы составили 20,0—40,0%, включает Белорус­скую ССР, Киргизскую ССР, Таджикскую ССР, Азербайд­жанскую ССР, Грузинскую ССР, Армянскую ССР, Каракал­пакскую АССР, Чимкентскую область Казахстана.

В третьей группе территорий (Северный Кавказ, Калмыц­кая АССР, Молдавская ССР, Астраханская область, Алма- Атинская, Талды-Курганская, Кзыл-Ординская и Уральская области Казахской ССР) количество фагорезистентных штам­мов вибриона Эль-Тор составило 50,0—60,0%.

Украинская ССР, Туркменская ССР, Узбекская CCP и • Гурьевская область Казахской CCP составляют четвертую группу территорий, на которых фагорезистентные штаммы составили 61,0—80,0% от общего числа выделенных штаммов вибриона Эль-Тор.

Данные о частоте встречаемости признаков изменчивости вибрионов Эль-Тор по перечисленным выше свойствам по всем экосистемам и климатогеографическим областям за все годы наблюдений приведены в табл. 43. По этому же принципу в этой таблице помещены результаты изучения гемолитичес­кой активности и вирулентности вибрионов Эль-Тор, выде­ленных из объектов окружающей среды.

Существенные различия в свойствах вибрионов Эль-Тор выявлены также и по годам их выделения. Например, до 1974 г. ни в одной из экосистем не выделяли штаммы, агглютинирующиеся холерной RO-сывороткой. Затем в не­больших количествах (до 0,6%) они начали выделяться из воды поверхностных водоемов, а в 1987—1988 гг. удельное содержание таких штаммов достигло 4,1%, а среди выде­ленных из сточных вод —4,9%. Существенные различия выявлены в количестве штаммов вибрионов Эль-Тор, выде­ленных в различные годы из воды пресных водоемов и сточных вод, со сниженной агглютинабельностью холерны-

Частота встречаемости штаммов вибрионов Эль-Тор с измененными

Таблица 43

свойствами по климатогеографическим областям, зонам и экосистемам (в %)

ми О- и типоспецифическими сыворотками, а также рези­стентных к бактериофагу Эль-Тор.

Особенно наглядно тенденция к увеличению частоты выде­ления прослеживается при анализе показателей изменчивости

свойств вибрионов Эль-Тор, выделенных из всех объектов окружающей среды, независимо от климатогеографических областей, за 19 лет наблюдения.

Некоторые свойства вибрионов Эль-Тор, выделенных из различных объектов окружающей среды на территории СССР с 1970 по 1988 г.

удельного содержания штаммов вибрионов со сниженной аг- глютинабельностью О-холерной и типоспецифическими сы­воротками — с 1982 г. и увеличение удельного содержания штаммов вибрионов, резистентных к бактериофагу Эль-Тор — с 1979 г. (табл. 44).

Проведенный анализ свидетельствует о наличии прямой зависимости между напряженностью эпидемической обста­новки по холере и удельным содержанием штаммов вибри­онов Эль-Тор, выделяемых из объектов окружающей среды,

с приведенными выше признаками изменчивости. Наглядно такую зависимость можно проиллюстрировать на примерах отдельных административных территорий. Например, в Ро­стовской области в годы интенсивных вспышек холеры (1973, 1974) относительное количество штаммов вибриона Эль- Тор, выделенных из воды поверхностных водоемов и сточ­ных вод, со сниженной агглютинабельностью холерными О- и типоспецифическими сыворотками составило 8,75%, а в годы между вспышками и при спорадической заболевае­мости — 16,78%; количество штаммов, резистентных к бак­териофагу Эль-Тор, составляло соответственно 0,4 и 8,76%, а агглютинирующихся холерной RO-сывороткой — соответ­ственно 0,8 и 0,0%.

Аналогичный анализ проведен по суммарным материалам, полученным в Ростовской, Донецкой, Одесской, Крымской, Саратовской областях и Азербайджанской ССР, на террито­рии которых с 1971 по 1978 г. из воды поверхностных водо­емов и сточных вод на фоне различной по интенсивности эпидемической обстановки по холере в общей сложности было выделено и изучено 3503 штамма вибриона Эль-Тор. Резуль­таты этого анализа представлены в табл. 45.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что в годы интенсивных вспышек холеры в обеих экосистемах отсутство­вали вибрионы Эль-Тор с измененной морфологией коло­ний, обнаружено значительно меньшее относительное содер­жание штаммов, резистентных к бактериофагу Эль-Тор и лизирующихся бактериофагом в разведении выше цельного, однако чаще, чем в годы после ликвидации вспышек холеры и на территориях, где случаев инфицирования людей не было выявлено, выделяли штаммы, агглютинирующиеся RO-холер- ной сывороткой и с измененной биохимической активно­стью.

Примерно такие же соотношения в относительном содержа­нии штаммов вибриона Эль-Тор с различными свойствами в зависимости от эпидемической обстановки выявлены А.Ф. Пи­нигиным, А.С. Марамовичем, В.С. Ганиным в регионах Сиби­ри и Дальнего Востока (табл. 46).

Естественно, что при изучении свойств вибрионов Эль- Тор, выделяемых из объектов окружающей среды на террито­риях различных климатогеографических областей, особое вни­мание обращалось на определение их вирулентности, в том числе гемолитической активности как одной из основных составляющих вирулентности. Необходимость такого определе­ния диктовалась неодинаковой эпидемической значимостью вибрионов Эль-Тор в зависимости от степени их вирулентно­сти. Подтверждением этому служат результаты проведенного анализа по различным климатогеографическим областям и зонам, на основании которого установлена четкая взаимоза-

Свойства вибрионов Эль-Тор, выделенных из воды поверхностных водоемов и сточных вод на фоне различной по интенсивности * эпидемической обстановке по холере в южном регионе европейской территории СССР в 1971—1978 гг.

висимость степени вирулентности вибрионов Эль-Тор, выде­ляемых из объектов окружающей среды, и напряженности эпидемической обстановки по холере. Например, на террито­рии Туркменской CCP из числа штаммов вибриона Эль-Тор, выделенных из воды поверхностных водоемов и сточных вод,

не было гемолизотрицательных, вирулентных, а 30,7% были слабовирулентными. На территории этой республики регист­рировали только спорадические случаи заболевания холерой и вибриононос ите л ьства.

В зоне Северного Кавказа вспышки холеры отмечались на фоне подавляющего числа (97,0%) гемолизотрицательных штаммов вибриона Эль-Тор, выделенных из объектов окружа­ющей среды, 90,0% из них были вирулентными, а 10,0% — слабовирулентными. При спорадических случаях заболевания холерой в данной зоне эти показатели составили соответ­ственно 83,1; 82,7 и 1%, а при отсутствии больных и вибри- ононосителей — 15,8; 0 и 11,7%. Примерно такие же соотно­шения при соответствующей эпидемической обстановке по холере выявлены по другим климатогеографическим областям и зонам. Результаты изучения вирулентности и гемолитичес­кой активности вибрионов Эль-Тор, выделенных из объектов окружающей среды, по четырем климатогеографическим об­ластям и зонам представлены в табл. 47.

Обращают на себя внимание также различия в относитель­ном содержании штаммов вибриона Эль-Тор с разной гемо­литической активностью и вирулентностью в зависимости от экосистемы, из которой они выделены. Так, чаще всего гемо- лизотрицательные и вирулентные штаммы (за все годы на­блюдений на территории СССР) выделяли из сточных вод, а наиболее редко — от гидробионтов (табл. 48).

Как отмечено выше, начиная с 1982 г. существенно увели­чилось количество штаммов вибриона Эль-Тор, выделяемых из объектов окружающей среды, агглютинирующихся RO-холер- ной сывороткой, со сниженной агглютинабельностью холер­ными О- и типоспецифическими сыворотками, резистентных к бактериофагу Эль-Тор. В этот же период наметилась отчетливая тенденция к снижению относительного содержания гемолизот­рицательных, а с 1976 г,— вирулентных штаммов этих микро­организмов (табл. 49). Надо полагать, что это связано со сни­жением интенсивности эпидемической обстановки по холере на подавляющем большинстве административных территорий СССР, начиная со второй половины 70-х годов.

Установлено влияние физико-химических и санитарно-бак­териологических факторов воды поверхностных водоемов на некоторые свойства обитающих в них вибрионов Эль-Тор. При этом, чтобы исключить влияние эпидемической обстановки, соответствующий анализ свойств вибрионов Эль-Тор, физи­ко-химических и санитарно-бактериологических показателей проводился по водоемам, находящимся в черте одного горо­да, или на территориях с идентичной эпидемической обста­новкой по холере.

В Ростове-на-Дону сопоставлены физико-химические и санитарно-бактериологические показатели двух рек— Дона и

Свойства вибрионов Эль-Тор, выделенных из воды поверхностных по холере в Сибири и на

Темерника со свойствами выделяемых из них вибрионов Эль- Тор. Физико-химические и санитарно-бактериологические показатели этих рек изучались в месяцы выделения из них вибрионов Эль-Тор. Эти показатели в указанных реках сильно различались (табл. 50). По загрязнению органическими и неор­ганическими веществами р.Дон умеренно загрязнена и отно­сится к 3-му классу чистоты воды, а р.Темерник — сильно загрязненная, относится к 5-му классу чистоты воды. Свой­ства штаммов вибриона Эль-Тор, выделенных из Дона и Темерника, характеризовались следующими показателями (со­ответственно): количество вирулентных штаммов — 74,5 и 69,1%; гемолизотрицательных — 99,1 и 87,1%; с типичной морфоло­гией колоний —71,9 и 57,1%; со сниженной агглютинабель- ностью холерными О- и типоспецифическими сыворотками — 1,6 и 12,1%, резистентных к бактериофагу Эль-Тор —8,3 и 5,5%, не ферментирующих крахмал — 9,9 и 20,9%. Статисти­чески установлено, что достоверным является преимуществен­ное выделение типичных штаммов из Дона, а не ферменти­рующих крахмал — из Темерника (р > 0,05).

водоемов и сточных вод при различной эпидемической обстановке Дальнем Востоке в 1970—1988 гг.

Сопоставлены также экологические факторы двух однотип­ных экосистем, расположенных в Горной Тянь-Шаньской климатогеографической области — Капчагайского водохрани­лища (Алма-Атинская область) и Акжарского водохранилища (Чимкентская область). Результаты физико-химических и са­нитарно-бактериологических исследований этих водоемов пред­ставлены в табл. 50.

Как видно из приведенных в таблице данных, по большин­ству изученных показателей выявлены существенные различия. Количество вирулентных штаммов вибриона Эль-Тор, выде­ленных из Капчагайского водохранилища, составило 9,7%, а из Акжарского — 2,3%, гемолизотрицательных культур соот­ветственно 40,0 и 62,6%, резистентных к бактериофагу Эль- Тор 63,2 и 50,4%, а со сниженной агглютинабельностью ти­поспецифическими холерными сыворотками — 2,16 и 0,57%.

Результаты проведенного анализа свидетельствуют о том, что экологические факторы в каждом конкретном водоеме могут оказывать определенное влияние на ряд свойств вибри­онов Эль-Тор.

Гемолитическая активность и вирулентность (по фаговому тесту и на крольчатах) вибрионов Эль-Тор, выделенных из разных объектов окружающей среды при различных эпидемических ситуациях

Многочисленными исследованиями установлено, что при длительном переживании в объектах окружающей среды у холерных вибрионов наблюдается выраженная изменчивость морфологических, биохимических и серологических свойств,

Гемолитическая активность и вирулентность вибрионов Эль-Тор, выделенных из различных объектов окружающей среды на территории СССР

Таблица 49

Показатели гемолитической активности и вирулентности вибрионов Эль-Тор, выделенных на территории СССР из объектов окружающей среды с 1970 по 1988 г.

Результаты исследований физико-химического состава и санитарно-биологических показателей воды поверхностных водоемов в сезоны выделения из них вибрионов Эль-Тор

вирулентности, а также некоторых других свойств [Злато- горов С.И., 1910; Заболотный Д.К., 1957; Бароян О.В., Партер Д.Р., 1975; Смоликова Л.М. и др., 1977; Милю­тин В.Н. и др., 1981, и др.]. Поэтому выделение и иден­тификация холерных вибрионов с измененными биологи­ческими свойствами связаны со значительными трудно­стями, так как направленность и диапазон изменчивости этих микроорганизмов в различных экосистемах, особен-

но в межэпидемическии сезон, остаются недостаточно изученными.

Установлено, что после ликвидации вспышки холеры и понижения температуры воды поверхностных водоемов ниже 18 °С у сохранившихся там вибрионов Эль-Тор отмечались существенные изменения различных биологических свойств, вследствие чего обнаружить их обычными бактериологически­ми методами не представляется возможным. Подтверждением сказанному является обнаружение в воде Дона в 1976 г,— через 1 мес после выделения последней типичной культуры — 3 штаммов вибриона Эль-Тор в L-форме [Смоликова JLM. и др., 1977]. Еще в более поздние сроки из этого же водоема в том же году был выделен 31 штамм вибрионов в L-форме. Один из них идентифицирован как Эль-Тор, а 30 отнесены к холерным вибрионам не 01 группы [Ломов Ю.М., Голубко­ва Л.А., Прозоровский С.В., 1978]. В связи с указанными на­ходками возникло предположение о возможности перехода типичных вибрионов Эль-Тор в L-форму в воде поверхност­ных водоемов под влиянием еще неизвестных факторов. Реаль­ность этого была подтверждена в специально проведенных экспериментах, в результате которых установлено сохранение холерогенности при резко измененной морфологии колоний вследствие процесса L-трансформации, наблюдавшегося при длительном сохранении в воде типичных штаммов вибриона Эль-Тор. Так, штамм вибриона Эль-Тор 3119 серовара Огава, обладавший типичными свойствами, чувствительностью к холерным диагностическим фагам и холерогенностью для кроликов-сосунков в дозе IO³, засевали в простерил изо ванные автоклавированием пробы воды из Дона. Через 5 мес после контаминации в 1 из 5 проб, хранившейся при комнатной температуре, наряду с типичными колониями вибриона Эль- Тор в посевах были обнаружены 3 очень мелкие, плотные, с вдавленным центром, вросшие в агар колонии. Их морфоло­гия не отличалась от L-форм вибрионов, полученных под влиянием пенициллина. Культуры из этих колоний сохраня­ли типичные биохимические свойства, агглютинировались до 1/8 титра холерной О-сывороткой, до полутитра — сывороткой Огава, а сыворотками Инаба и RO — в разведении 1:100. В РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом по­ложительные результаты с исходным и измененным штамма­ми получены при концентрации IO⁵микробных клеток (м.к.).

В результате изменчивости полученный вариант штамма вибриона Эль-Тор утратил чувствительность к бактериофагу Эль-Тор. При внутрикишечном заражении кроликов-сосунков в дозе IO⁵м.к. гибель животных наступала через 24—48 ч с развитием четко выраженного холерогенного синдрома. У пав­ших животных толстый отдел кишечника был сильно растя­нут и заполнен слегка опалесцирующей жидкостью. При по­

севе содержимого кишечника на пластинках агара выросли колонии только с измененной морфологией, однако в мазках из этих колоний в подавляющем большинстве обнаруживались подвижные и неподвижные вибрионы. Следует отметить, что при изучении реверсии L-форм неоднократно наблюдалась подобная морфология колоний у культур-ревертантов первых пассажей. При этом показана возможность быстрого восста­новления вирулентности при реверсии даже условно стабиль­ных L-форм холерных вибрионов [Ломов Ю.М. и др., 1977; Ломов Ю.М., 1987].

Учитывая, что описанные выше случаи выделения L-форм вибрионов Эль-Тор из речной воды в естественных условиях приходились на осеннее и зимнее время при низкой темпера­туре воды (от 10—12 до 3—4 °С), а выделение типичных форм обычно имело место при достижении температуры воды 16— 18 °С, возникла 2-я гипотеза: не является ли изменение тем­пературы именно тем фактором, который способствует ревер­сии L-форм вибрионов, длительно сохраняющихся в воде при низких температурах, в исходную форму. Это представляется весьма правомерным, если учесть, что физико-химические свойства воды Дона в различные сезоны года практически не подвергались сколько-нибудь существенным колебаниям.

C целью проверки данной гипотезы были поставлены спе­циальные опыты в политермостате, конструкция которого позволяла одномоментно хранить более 20 проб воды при температуре от 2 до 28 ⁰C. При этом каждая предыдущая проба имела температуру на 1 ⁰C ниже, чем последующая. В резуль­тате было показано, что в среде, бедной органическими ве­ществами, близкой по физико-химическому составу к речной воде, L-формы вибрионов Эль-Тор способны сохранять жиз­неспособность без реверсии в бактериальные формы в течение 30 дней (срок наблюдения) при температуре до 18 °С. При температуре 18 ^oC и выше уже через сутки была отмечена реверсия L-форм в бактериальную форму.

Приведенные результаты экспериментальных исследований и натурных наблюдений подтверждают возможность L-транс- формации вибрионов Эль-Тор в воде поверхностных водо­емов, длительное их сохранение при низких температурах в межэпидемический сезон и реверсию в исходную бактериаль­ную форму при температуре воды выше 18 °С. Однако не исключено, что наряду с L-трансформацией вибрионы Эль- Тор в межэпидемический сезон в воде поверхностных водо­емов могут формировать и другие формы изменчивости. Не исключена возможность контаминации поверхностных водо­емов L-формами холерных вибрионов, которые могут попа­дать туда со сточными водами и длительно сохраняться при низкой температуре воды. Этот путь особенно реален в мест­ностях, где произошло временное укоренение холеры, и об­

условлен наличием невыявленных вибриононосителей, в том числе носителей L-форм холерного вибриона, наличие кото­рых у переболевших холерой на Филиппинах было доказано K-Kotera и соавт. (1972). Реальность такого пути была показана при обследовании переболевших холерой. Так, в Ростове-на- Дону в январе 1977 г. у Ч., переболевшего холерой летом 1976 г., из желчи был выделен холерный вибрион не Ol груп­пы 50-го серовара. При заражении кроликов-сосунков с целью определения холерогенных свойств этого штамма в посевах на агаровых пластинах содержимого кишечника одного из 8 кроль­чат на 3-й день инкубации среди типичных колоний исходно­го штамма были обнаружены 2 колонии, морфологически сходные с колониями L-форм вибриона: мелкие (1—1,5 мм в диаметре), пигментированные, вросшие в агар. Под микро­скопом колонии имели вид складчатых, радиально исчерчен­ных образований. В мазках, приготовленных из этих колоний, обнаруживались крупные и мелкие шарообразные тела. При изучении ультраструктур клеток в электронном микроскопе обнаруживались шаровидные и палочковидные клетки с де­фектами клеточной стенки. Ферментативная активность этих культур была замедленной, но типичной для рода вибрионов. Культуры не агглютинировались холерными сыворотками и не лизировались холерными диагностическими фагами. По мере старения этих колоний на 5-7-й день по краю появился рост в виде прозрачного голубоватого ободка. Посев материала из этого ободка дал рост культуры, которая была идентифици­рована как вибрион Эль-Тор серовара Огава, холерогенной для кроликов-сосунков в дозе IO⁴микробных клеток и виру­лентной по фаговому тесту.

Анализ этого материала в сопоставлении с данными экс­периментальных исследований позволяет утверждать о выде­лении от вибриононосителя Ч. штамма, в популяции которого имелись L-формы фибриона Эль-Тор. Сравнительно кратко­временное — до 2 сут — пребывание вибрионов в кишечнике кролика-сосунка если и могло способствовать L-трансформа- ции части популяции вибрионов, то только в начальной ста­дии. Высевы таких культур на обычные питательные среды приводят, как правило, к быстрой реверсии с образованием уже на первом пассаже бактериальных форм.

Четыре штамма вибрионов Эль-Тор в виде нестабильных L-форм были выделены в том же году в межэпидемический сезон из воды Дона в Ростове-на-Дону. Они имели резко выраженную атипичную морфологию колоний (мелкие, врос­шие в агар, складчатые, желтоватого цвета). В процессе пас­сажей на питательных средах (на 5—15 пассажах) указанные культуры отщепляли колонии с типичной для вибрионов Эль- Тор морфологией. В атипичных колониях преобладали гетеро­морфные и шаровидные клетки с вакуолями. При исследова­

нии в электронном микроскопе ультратонких срезов в подав­ляющем большинстве случаев обнаруживались клетки с де­фектами клеточных стенок в виде отслоения их на всем про­тяжении либо наличие лишь фрагментов клеточной стенки. L-формы этих культур не обладали подвижностью, однако она восстанавливалась после реверсии их в бактериальную форму. Как L-формы культур, так и ревертанты положительно реагировали в пробе с оксидазой, окисляли и ферментирова­ли глюкозу, обладали лизин- и орнитиндекарбоксилазой и не обладали аргининдегидрогеназой. Однако ферментативная ак­тивность L-форм была замедленной и повышалась в процессе пассажей. По биохимической активности штаммы относились к I группе Хейберга, не ферментировали маннит и инозит, образовывали ацетилметилкарбинол и вызывали лизис бара­ньих эритроцитов. L-формы культур слабо агглютинировались холерными и Инаба сыворотками (в основном в разведениях 1:100—1:200), тогда как у ревертантов способность к агглю­тинации указанными сыворотками возросла до 1:400—1:800. Культуры L-форм и их ревертанты были резистентны к диаг­ностическим холерным фагам C и Эль-Тор. Лишь некоторые субкультуры 2 штаммов оказались слабо чувствительными к поливалентному и фагам ХДФ-5. В результате пассажей в петле кишечника кроликов-сосунков у одного из штаммов появи­лась чувствительность к холерному фагу С. При заражении кроликов-сосунков культурами в L-форме и их ревертантами холерогенного или энтеропатогенного эффекта не отмечалось Однако ревертанты 3 штаммов размножались в кишечнике экспериментальных животных, а ревертанты 4-го штамма не размножались [Смоликова Л.М. и др., 1977].

Обращает на себя внимание, что все случаи выделения вибрионов Эль-Тор как от человека, так и из воды реки приходились на межэпидемический сезон — в период между вспышками холеры.

Данные, полученные при выделении L-форм вибрионов Эль-Тор, свидетельствуют о том, что в определенных усло­виях они могут иметь эпидемиологическое значение, в част­ности, способствуя сохранению холерных вибрионов в меж­эпидемический сезон, а возможно, и временному укорене­нию холеры на той или иной территории.