Введение
Актуальность проблемы» Липиды микроорганизмов давно привлекают внимание исследователей* Особенно возрос интерес к изучению про цессов липогенеза за последние годы. В первую очередь это вызвано возможностью практического использования микробных липидов.
В свете задач, намеченных ХХУІ съездом КПСС и Продовольственной программой, необходимым является замена пищевых растительных масел, расходуемых на технические нужды, жирозаменителями, вырабатываемыми из непищевого сырья. В связи с этим, проблема получения липидов с использованием в процессах биотехнологии микроорганизмов вполне актуальна. В раде отраслей народного хозяйства ( пищевой, кондитерской, медицинской и др.) широко применяются растительные фосфатиды, и существует необходимость использования аналогичных фосфолипидов из других природных источников. В качестве перспективных продуцентов липидов можно рассматривать мицелиальные грибы, обладающие высокой липогенной активностью, а также составом жирных кис лот и фосфолипидов близким растительным маслам. Физиологический подход к регулированию процессов липогенеза у грибов может быть ис пользован для направленного синтеза и получения липидов нужного со става.другой аспект проблемы связан с исследованием функциональной роли липидов в клетке. Изучение физиологических особенностей микро организмов, как указывал академик В.Н.Шапошников ( I960), включает не только констатацию образования определенных продуктов, но и выяснение их биологического смысла. В настоящее время липиды рассмат риваются как физиологически активный компонент клетки: они играют важную роль в функционировании биомембран, в процессах регуляции метаболизма и адаптации клеток в изменяющимся условиям обитания. Выяснению функциональной значимости липидного компонента клетки посвящены исследования динамичности мембранных липидов в различных физиологических условиях* Работы в этой области выполнены как с клетками животных тканей, так и с представителями микроорганизмов, главным образом, прокариотной организации.
У мицелиальных грибов вопросы взаимосвязи липогенеза, в частности синтеза полярных липидов, с физиологическими особенностями культур практически не изучены. Эта проблема включает исследование состава липидов микроорганизмов в связи с условиями их существования, в том числе, зависимость процессов липогенеза от различного снабжения клеток источниками питания (С, Я,Р и др.). Наибольшее количество работ посвящено изучению влияния углеродного и азотного питания на синтез липидов у грибов. Сведения о влиянии фосфатов на процессы липогенеза малочисленны. Известно, что фосфор является определяющим элементом в важнейших процессах жизнедеятельности, протекающих в клетке: функционировании систем преобразования энергии, синтезе фосфолипидов, вторичных метаболитов и др. В связи с этим, заслуживает внимания изучение синтеза липидов грибами в условиях различного обеспечения фосфатами.Цель и задачи исследования. Целью данной работы являлось изучение процессов липогенеза в связи с особенностями развития некоторых представителей мицелиальных грибов на средах с различным содержанием фосфатов.
В работе были поставлены следующие экспериментальные задачи:
1. Изучить на примере triiporo. влияние экзоген
ного фосфора на синтез клеточных липидов, в том числе полярных, являющихся основным компонентом липидного слоя мембран.
2. Определить характер влияния концентрации фосфатов в среде на состав и содержание жирных кислот в липидах IrLspora.
3. Выявить взвимосвязь процессов липогенеза с другими физиолого биохимическими и морфологическими особенностями клеток гриба в зависимости от различного обеспечения фосфатами.
4. Исследовать наряду с липидами 6£. trispora. фракционный и жирнокислотный состав липидов у представителей других таксонов грибов при культивировании на средах с различным содержанием фосфатов.
5. Учитывая возможное практическое использование липидов, провести испытание полученных нами образцов грибных липидов совмесвно с Институтом питания АМН СССР и ЦНЙПИ.
Научная новизна работы.
В результате изучения процессов липоген неза у ряда мицелиальных грибов, решены следующие задачи:- впервые у мицелиальных грибов выявлены особенности липогенеза, обусловленные различной обеспеченностью клеток фосфатами;
- обнаружено, что в процессе синтеза липидов de nova в клетках В£ trispora образуются ранее не описанные гликолипиды, отличные от цереброзидов. Показано, что дефицит фосфатов в среде стимулирует синтез гликолипидов, которые являются в этих условиях преобладающими компонентами мембранных липидов, при одновременном значительном снижении доли фосфолипидов в составе полярных липидов;
- аналогичные по хроматографической подвижности фракции глико
липидов обнаружены в составе полярных липидов грибов рр. £ntomo- pkthora, maria., Cu.rvuSa.rla, Asperyiltus, РепісіМіит,
- впервые наблюдали электронно-микроскопическую картину модификации мембранного аппарата клетки (эндоплазматический ретикулум) и клеточной стенки Bd.trispora в процессе цитодифференциации гриба на средах с различным содержанием фосфатов;
- впервые у исследуемого гриба описаны фракции лтолифосфатов (ПФ). При этом, установлена обратная корреляция между уровнем высокомолекулярных ПФ 4-ой фракции (ПФ4) и потреблением глюкозы из среды, а также сопряженность синтеза ПФ^ с синтезом гликолипидов. Присутствие последних в составе полярных липидовгаррелировало с накоплением полисахаридов (нейтральных сахаров). На основании выявленных корреляций предполагается одна из возможных функций гликолипидов в клетке, а именно, участие этих соединений в синтезе полисахаридов;
- предложена математическая модель для описания зависимости синтеза обнаруженных у BP tnzpora. глинолипидов от концентрации фосфора в среде и свободного ортофосфата в мицелии;
- показано, что у грибов с преобладающим синтезом пальмитиновой и линолевой (Cjg.g) жирных кислот, содержание Cjg.g кис
лоты зависит от уровня фосфора в среде и фосфолипидов в клетках.
Таким образом, установлено, что фосфор может быть регулятором синтеза полярных липидов и некоторых жирных кислот у мицелиальных грибов.
Практическая ценность работы. Показано, что увеличение концентрации фосфатов в среде способствует преимущественному синтезу фосфолипидов в составе полярных липидов на фоне усиленного липоге- неза. При этом, ненасыщенность липидов заметно повышается. Полученные результаты могут быть применены в случае использования dt.tnsporo, как продуцента липидов, в частности фосфолипидов, для получения пищевых и медицинских препаратов. Отсутствие токсичности липидов гриба показано в Институте питания АМН СССР.
Результаты по влиянию концентрации фосфатов в среде на синтез р -каротина могут быть использованы в практике получения ф -каротина из мицелия BE.trlsporo..
Данные о повышенном синтезе полисахаридов в клетках BP trisporo. при дефиците фосфатов в среде целесообразно учитывать в процессах получения грибных полисахаридов, привлекающих все больший интерес, в частности, как антикоагулянты крови и возможные противоонкоген- ные агенты.
Показана пригодность липидов, выделенных из отходов антибиотического производства (биомасса PenLcitfaujv сЬґу$о$епитпосле полу-
-ІО-
чения пенициллина) для использования в технических целях.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены на Меж
дународном симпозиуме ФЕМО "Регуляция микробного метаболизма факторами внешней среды" (Пущино-на-Оке, июнь 1983г.), на научно-теоретической конференции молодых ученых-микробиологов (Ташкент, ноябрь 1983 г.), на Всесоюзном семинаре "закономерности роста микроорганизмов" (Пущино-на-Оке, декабрь 1983 г.),на совещании по цитологии микроорганизмов (Пущино-на-Оке, декабрь 1984 г.).
Публикации. По материалам диссертации имеется 7 публикаций.
Еще по теме Введение:
- Эндолимфатическое введение
- 218. Методики введения лекарственных веществ в глаза
- Введение зондового питания
- Протокол по подкожному введению препарата
- Введение
- Техника введения готового питания в герметичной упаковке
- Введение
- Введение
- Введение
- 4.1 Введение
- 2.2.1. Длительность, пути введения и дозы препаратов
- 2. Парентеральное введение препаратов железа