Определение активности дезинфицирующих средств

Метод смывов. Целью метода является выбор режима обработки дезинфицирующими средствами поверхностей в зависимости от концентрации, кратности обработки, расхода средств на 1 м2, экспозиции, температуры, вида поверхности.

Перед нанесением культуры тест-объекты подвергают механической обработке — мытью с мылом и щеткой. Клеевые поверхности и обои промывают стерильной водопроводной водой. После подсыхания поверхности располагают горизонтально и пипеткой наносят на них 2-миллиардную взвесь из расчета 0,5 мл на 100 см2. Культуру распределяют по поверхности стерильным шпателем, подсушивают при комнатной температуре (18° С). Культуру наносят накануне опыта. Дезинфицирующий раствор наносят из пульверизатора, следя за количеством израсходованной жидкости. Максимальная норма расхода не должна превышать 300—500 мл/м2. Тест-объекты оставляются до полного подсыхания. Контрольные тест-объекты, зараженные аналогично опытным штаммом, орошаются стерильной водопроводной водой (количество стерильной водопроводной воды равно количеству израсходованного дезинфицирующего средства). Пробы забираются с обработанных поверхностей (опыта и контроля) путем тщательного протирания их стерильным, слегка увлажненным тампоном или стерильной марлевой салфеткой 5x5 см2. Затем тампон или салфетку отмывают в 10 мл нейтрализатора или стерильной водопроводной водой в течение 10 мин. Отмывную жидкость с опытных поверхностей вносят в чашки Петри (в 2—3 чашки по 0,5—1 мл в каждую), заливают растопленным и остуженным агаром. Жидкость с контрольных поверхностей перед посевом разводят в 100 раз. Для равномерного распределения микроорганизмов в агаре последний перемешивают круговыми движениями после залива в чашку до застывания. Чашки инкубируют 24 ч при температуре 37° С, после чего производится подсчет колоний, определяется плотность заражения на 100 см2 и процент обеззараживания, принимая количество бактерий, снятых с контроля, за 100%.

С 100 см2 контрольной поверхности снято 148 000 микроорганизмов, а с опытных — 20 микроорганизмов.

148 000 - 100%

20 - х%

х = 0,013% выживших микроорганизмов, следовательно, процент обеззараживания опытной поверхности составляет 99,987%.

Эффективным считается средство, дающее гибель 99,99% рабочего штамма на опытных поверхностях.

Метод отпечатков. На дно чашки Петри помещается марлевый кружок, диаметр которого равен диаметру чашки. С двух сторон по краю марлевого кружка при выкраивании оставляют «стебельки» — полоски марли в 2—3 см, которые выступают за края чашки. Чтобы марля при стерилизации не скатывалась, на нее надо положить кружок фильтровальной бумаги. Затем на марлю выливают расплавленный и слегка остуженный мясо-пептонный агар или среду Эндо. После подсыхания среды без нарушения целостности и стерильности агаровые пластинки вынимают за стебельки и накладывают на исследуемые поверхности для получения отпечатков. Затем агаровые пластинки возвращают в чашку. Термостатируют 24 ч при 37° С. С одной поверхности делается не менее трех отпечатков.

Расчет производится аналогично приведенному выше.

Приложение 50

Допустимые уровни микробной обсемененности постельного и нательного белья в асептических палатах

МУ № 28-6/15-86

Предельно допустимое содержание непатогенных

микроорганизмов в лекарственных формах____________

Примечание: Интервал времени от начала изготовления раствора не должен превышать 3 ч.

Микробиологическая чистота готовых лекарственных средств

(изменения к статье ГФ XI, вып. 2 от 01.06.1996 г.)