Среда для клеток животных

Из всех клеточных культур клетки животных наиболее требовательны к составу питательных сред. К настоящему времени известно более 400 различных прописей питательных сред, предназ­наченных для определенных типов клеток, целей и условий культивирования.

аспластывания клеток, связывания и детоксикации пирогенов, токсинов и продуктов ме- зйй, Р^а _ _клеток. Повышая вязкость среды, сыворотка снижает уровень сдвигового стресса на ^та Идлрсте с тем сыворотка содержит ингибиторы, вирусы, микоплазму, бактерии, прионы,

с^оояяые белки, способные оказывать отрицательное воздействие на процессы культивирова-

клеток и репродукцию в них целевых вирусов, качество получаемой продукции.

^яИЯ _ние некоторых конечных продуктов требует их глубокой очистки, которая весьма затрудни-

_ Из-за недостатков сыворотки и ее высокой стоимости ведутся исследования по разработке теяьна-

бессыврроточных сред, но это удалось лишь для немногих клеточных культур, причем они, как авило, растут хуже, чем на питательных средах в присутствии сыворотки крови животных.

В целом все среды делятся на ростовые и поддерживающие. Первые должны обеспечивать

активное размножение клеток либо в процессе формирования монослоя на поверхности культива- щибнных сосудов или микроносителей, либо в процессе суспензионного культивирования клеток во взвешенном состоянии. Поддерживающие среды предназначены для сохранения клеток в уже сформировавшемся монослое-или определенной концентрации клеток в суспензии. Это имеет мес­то например, при репродукции вирусов в культуре клеток.

За рубежом существует специальное производство питательных сред для культур клеток животных. Объем их производства составляет десятки миллионов литров в год. Среды выпускают также в сухом виде. В нашей стране не было создано такого производства в основном из-за отсутствия индивидуальных аминокислот высокой степени очистки. Их пытались заменить гидролизатами бел­ков. Было создано несколько прописей сред на основе кислотных или ферментативных гидролизатов белков: лактальбумина, казеина, крови и ткани животных, с/х растений, дрожжей, куриного яйца.

К настоящему времени в связи с ростом доступности аминокислот наибольшее распространение получили так называемые химически определенные среды с индивидуальными компонентами, но с сывороткой крови животных (5—10%). В процессе приготовления среды ее компоненты делят на четыре группы, растворяя их раздельно и стерилизуя разными способами:

1) комплекс солей, аминокислот, витаминов и глюкоза;

2) глутамин;

3) бикарбонат натрия;

4) сыворотка крови.

Компоненты первой группы растворяют в воде до определенной концентрации и стерилизуют тепловым, лучше непрерывным, способом.

При приготовлении среды для клеток животных требуется вода высокой степени очистки (удельное сопротивление до 18 Мом/см), достигаемой методами дистилляции, ионного обмена и об­ратного осмоса. Этой же водой рекомендуют ополаскивать внутренние полости аппаратов, предназ­наченных для приготовления питательной среды и культивирования клеток, а также использовать ее для приготавления пара, применяемого в виде «острого» для стерилизации аппаратов и неко­торых компонентов питательной среды.

2.1.2.