Подбор бактерий-продуцентов ЦГТазы для процессов получения циклодекстринов

Рис. 11. Схема отбора бактерий-продуцентов ЦГТазы для процессов получения циклодекстринов

клеток, где происходит их дальнейшая гидролитическая деградации до глюкозы — универсально­го источника энергии и углерода.

Культуры микроорганизмов, не продуцирующих циклодекстрины, часто не имеют систем активного транспорта через ЦПМ, не могут «переместить» циклодекстрииы внутрь своих клетки, или разрушить их снаружи, поэтому, при правильном выборе концентраций субстрата в накопи­тельной культуре они не способны к размножению. «Мешающими» в процессе получения накопи­тельной культуры являются бактерии-продуценты циклодекстринолитических активностей. В ча­стности, у некоторых микроорганизмов известны ферменты циклодекстриназы, гидролизующие циклические декстрины до линейных мальтосахаридов и глюкозы. Тем не менее, при правильном подборе состава селективной среде, и соответствующих физико-химических условий инкубации (pH, температуры, ионной силы, кислорода, лимитирующих факторов) можно получить широкий таксономический спектр диких изолятов, с необходимой циклизующей активностью.

Дополнительный анализ выделенных штаммов. Обнаруженные бактериальные изоляты цик- лодекстриногенов проходят дополнительную процедуры проверки и отбора, по очень многим па­раметрам, среди которых в первую очередь тесты на непатогенность в отношении человека и жи­вотных. Рентабельность будущего биотехнологического процесса зависит от цены компонентов оп­тимизированной среды, времени культивирования продуцента, удельной активности ЦГТазы в культуральной жидкости. Подробно изучается и сравнивается скорость протекания циклизую­щей и мешающих реакций (раскрытия кольца), определяется термостабильность ферментного препарата, его pH-оптимум, наличие мешающих (паразитных) активностей, например протеаз­ной, глюко-амилазной и бета-амилазной. Более тщательное изучение предполагает определение глубины конверсии в системе с запланированным типом и концентрациями субстрата, измерение соотношения диспропорционирующей, циклизующей и декстриногенной активностей в конкрет­ных физико-химических условиях. Использовать ЦГТазы, с высоким уровнем диспропорциониру­ющей активности нежелательно, так как выход циклических продуктов в процессе их применения падает.

10.