Выбор продуктивного штамма для процессов получения ЦГТазы
Подбор нужного штамма является довольно трудоемкой многоэтапной процедурой, примерная схема которого представлена на рис. 11.
Источники культур. Природными источниками для выделения циклодекстриногенных бактерий являются образцы почв, при этом четких рекомендаций к тому, где они должны быть отобраны, дать нельзя.
Относительная численность носителей гена ЦГТазы в почвенной микрофлоре, весьма невелика. В частности, косвенные измерения показывают, что количество бактерий P.macerans в грамме луговой почвы колеблется в пределах от 1 до 1000 бактерий, прорастающих на агаре на 107- 108 клеток прокариот, присутствующих в этом же образце и образующих колонии при высеве на питательный агар (колоние-образующих единиц или КОЕ). Несколько более высокие данные по частоте встречаемости циклодекстриногенов в почве могут быть получены для представителей рода Bacillus circulans имеющих бета-специфичную ЦГТазу.Согласно некоторым данным (К. Хорикоши, 1982), циклодекстриногенные бактерии чаще встречаются среди алкалофильных бацилл и могут быть выделены методами простого перебора уже после прямого высева почвенных суспензий на щелочной агар. В целом же, скрининг продуцентов ЦГТазы без использования накопительных культур является достаточно трудоемким занятием, так как частота встречаемости этих бактерий в почве не превышает величину ~10_3 — 10 4.
Накопительные среды. Повысить вероятность обнаружения ЦГТ-активных изолятов бактерий в природных образцах можно путем использования накопительных культур. Одним из наиболее эффективных вариантов являются процедуры скрининга на жидких и полужидких средах, содержащих сами циклические декстрины в качестве единственного источника питания. Предпочтительным субстратом является альфа-циклодекстрин, как наиболее стойкий к воздействию микробных альфа-амилаз среди других циклических гомологов.
Обогащение накопительных сред циклодекстриногенными бактериями происходит вследствие того, что макроциклические сахара могут быть ими использованы в качестве источников питания. Специфические пермеазы (транспортные белки) переносят сравнительно крупные молекулы макроциклических олигосахаридов через цитоплазматическую мембрану внутрь бактериальных
Еще по теме Выбор продуктивного штамма для процессов получения ЦГТазы:
- Подбор бактерий-продуцентов ЦГТазы для процессов получения циклодекстринов
- Процесс микробиологического получения рибофлавина с использованием генно-инженерного штамма Bac.subtilis
- Выбор штамма дрожжей
- Штаммы-продуценты аргинина и методы их получения
- Выбор математического аппарата для оценки эффективности полученных результатов и оценка качества работы математических моделей прогнозирования инфаркта миокарда в реабилитационном периоде
- 30. Процесс получения изображения
- Технологический процесс получения концентрата витамина В12
- 5.2. Выбор метода и средств для лабораторного анализа
- Влияние острого введения алкоголя на системные процессы, обеспечивающие выполнение задачи «сенсомоторного выбора»
- Циклодекстриногенные бактерии — продуценты ЦГТаз