14.2. ИОНЫ КАЛЬЦИЯ

В синапсе между болевым рецептором и ассоциативным болевым нейроном (рисунок 137) в качестве нейротрансмиттера используется глутаминовая кислота (glutamate). Когда потенциал действия достигает проксимальной терминали аксона болевого рецептора, в пресинаптиче­ской части запускается механизм регуляторного экзоцитоза глутаминовой кислоты по механизму описанному выше (рисунок 125).

Деполяризация мембраны аксона с -70 мВ до +30 мВ открывает потенциалочувствительные кальциевые каналы в мембране, и концентрация ионов кальция увеличивается от 100 нМ/л (в спокойном состоянии) до 1мкМ/л, и синаптические везикулы выбрасывают своё содержимое в синаптическую щель. В случае синапса сенсорного нейрона с ассоциативным нейроном везикулы заполнены глутаматом натрия (sodium glutamate).

В данном случае, также как и в случае нейромышечного соединения (см. п. 16.4), ионы кальция выполняют функцию внутриклеточного месенджера - вещества, повышение концентрации которого в цитозоле стимулирует специфическую для данной клетки реакцию.

Концентрация кальция в цитозоле может возрастать не только в ответ на появление потенциала действия, но и в ответ на появление во внеклеточной среде сигнальных молекул, которые часто называют трансмиттерами.

Наличие таких молекул-трансмиттеров детектируется специфичны­ми для данного типа молекул интегральными мембранными белками- рецепторами. Эти рецепторы, в ответ на присоединение специфического лиганда, запускают определённую метаболическую цепочку событий, результатом которой является высвобождение кальция из гладкого эндоплазматического ретикулума в цитозоль.

Например, в случае тромбоцитов крови такое высвобождение ионов Са²⁺ из эндоплазматического ретикулума в цитозоль тромбоцита стимули­рует процесс свёртывания крови.

Кальций из эндоплазматического ретикулума выходит через инозитол-трисфосфат-регулируемые кальциевые каналы, а инозитол трисфосфат (IP3) образуется Р-изоформой фермента фосфолипаза С (PLCP) при ферментативном гидролизе фосфолипида плазматической мембраны фосфатидилинозитол бисфосфат (PIP2) .

Для тромбоцитов химическим сигналом, свидетельствующим о необходимости инициации процесса сворачивания крови, является появление в крови молекул АДФ (рисунок 139).

Рисунок 139 - Синтез инозитол трисфосфата в ответ на связывание АДФ с мембранным рецептором

Молекулы АДФ могут оказаться в крови только в результате механического повреждения клеток. Соединение АДФ с мембранным

GPCR-рецептором на поверхности тромбоцита активизирует этот рецеп­тор и он становится GEF-белком (Guanine nucleotide Exchange Factor (рисунок 79)) для тримерного белка G_q, который обладает ГТФазной активностью и в свою очередь активирует Р-изоформу фермента фосфо­липаза С (точное название фермента - фосфоинозитид фосфолипаза С).

В отличие от ГТФазы Ran, которая управляет транспортом белков в ядро клетки (рисунок 80), тримерный белок G_q состоит из трёх субъединиц: ГТФазной субъединицы а и двух субъединиц Р и у, которые диссоциируют с субъединицы а, когда она связана с АТФ, и вновь объединяются в тримерный белок после гидролиза АТФ в АДФ.

Активированная форма фосфолипазы С как раз и катализирует указанную выше реакцию гидролиза фосфатидилинозитол бисфосфата (РІРг) с образованием инозитол трисфосфата (1Рз) в цитозоле и диацилглицерола (ДАГ) в мембране.

Таким образом, в ответ на появление в экзоплазме молекул АДФ в цитоплазме увеличивается концентрация IP3, молекулы которого активи­руют инозитол-трисфосфат управляемые кальциевые каналы (inositol trisphosphat-gated calcium channels) (рисунок 140).

Рисунок 140 - Инозитол-трисфосфат-управляемый кальциевый канал

Рост концентрации ионов кальция в цитозоле тромбоцита приводит к изменению формы клетки, тромбоциты становятся "клейкими", они начинают слипаться друг с другом, формируется сгусток крови и начинается процесс сворачивания крови в месте повреждения крове­носного сосуда.

Комбинация компонентов сигнальной цепи, состоящая из фосфатидилинозитол бисфосфата РІРг, тримерного белка G_q, Р-изоформы фосфолипазы С (PLCP) и инозитол-трисфосфат-управляемых кальциевых каналов, присутствует практически во всех эукариотических клетках.

Резкое повышение цитозольной концентрации ионов кальция является универсальным внутриклеточным сигналом, но какой из метаболических процессов будет запущен в ответ на этот сигнал, зависит от типа клетки. В секреторных клетках (например, слюнных желез или в терминалях аксонов) индуцируется секреция, а в мышечных клетках происходит сокращение саркомеров. Во всех случаях ионы кальция связываются с кальций-связывающими белками, и такие кальций-белко­вые комплексы активируют соответствующий процесс.

В клетках скелетных мышц кроме (1) мышечного сокращения, ионы кальция стимулируют также (2) гидролиз гликогена ферментом киназа гликоген-фосфорилазы, а также (3) стимулируют работу ферментов цикла Кребса в митохондриях, активируя синтез НАДФ и АТФ.

Многие клетки имеют специфические кальциевые каналы в мем­бране эндоплазматического ретикулума, которые называются рианодино­выми рецепторами. Первоначально такие каналы были обнаружены по их способности связывать растительный алкалоид рианодин вместо IP3.

В клетках скелетных мышц такие рианодиновые рецепторы физически соединены с потенциалочувствительными кальциевыми кана­лами плазматической мембраны (рисунок 141).

Когда потенциалочувствительный канал плазматической мембраны открывается, то открывается и рианодиновый рецептор мембраны эндо­плазматического ретикулума, выпуская кальций в цитозоль клетки.

Рисунок 141 — Рианодиновые рецепторы клеток скелетных мышц

В клетках других типов такой механической связи между каналами наружной мембраны и рианодиновыми рецепторами эндоплазматического ретикулума не обнаружено, а оказалось, что эти рецепторы открываются, если концентрация кальция в цитозоле превысит критическое значение.

Например, в кардиомиоцитах (клетках сердечной мышцы) деполя­ризация плазматической мембраны приводит к тому, что открываются кальциевые каналы на плазматической мембране, и ионы кальция, вошедшие в клетку из внеклеточного пространства, связываются с кальций-связывающими центрами рианодиновых рецепторов мембраны эндоплазматического ретикулума. Это приводит к тому, что открываются также и каналы рианодиновых рецепторов, и кальций из гладкого эндо­плазматического ретикулума выходит в цитозоль (рисунок 142).

После того как источник внешнего возбуждения исчезает, концен­трация кальция в цитозоле возвращается к исходному (невозбуждённому) значению. Ионы кальция выкачиваются из цитозоля (1) Са²⁺-АТФазами (и. 7.2) и (2) 3-Ыа⁺/1-Са²⁺-антипортёрами (и. 11.2).

Рисунок 142 - Рианодиновые рецепторы кардиомиоцитов