ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Клеточные механизмы инициации и развития атеросклероза у человека затрагивают многие аспекты межклеточных взаимодействий. Неслучайно, сотни тысяч работ были опубликованы; десятки теорий возникновения этого заболевания и их модификаций были предложены в разные годы, по мере развития уровня научных исследований.

Между тем, основные участники атеросклеротического процесса на уровне сосудистой стенки остаются неизменными. Это эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки и клетки гематогенного происхождения. Именно эти три клеточных типа определяют в конечном итоге и нормальное функционирование сосудистой стенки и особенности развития патологического процесса в ней.

Относительно неизменным сохранился и постулат о том, что начальные стадии атеросклероза, будь то атеросклероз экспериментальный или "спонтанный", связаны с функциональными перестройками эндотелия и нарушением его взаимодействия с клетками периферической крови. Сейчас уже все реже говорят о "повреждении" эндотелия и все чаще о его "дисфункции", хотя сам термин "повреждение" нет-нет да мелькнет на страницах обзоров и экспериментальных работ.

Говоря об участии клеток гематогенного происхождения в развитии атеросклероза и других форм сосудистой патологии, следует иметь в виду, что взаимодействие ЭК-лейкоцит строго подчинено определенным законам и попросту невозможно, если не будут соблюдены некоторые условия. Так, ни одна клетка крови, независимо от ее происхождения, не попадет в субэндотелиальное пространство, не пройдя каскад межклеточных взаимодействий с ЭК. Иными словами, вся последующая цепь событий возможна только при наличии участков функционально измененного, активированного эндотелия. Более того, даже после прохождения сквозь эндотелий, клетка крови не останется в интиме, если на то не будет веских оснований, т.е.

Целью данного исследования была попытка изучения некоторых механизмов генеза сосудистой патологии, включая атеросклероз, с позиции сосудистого эндотелия. К моменту начала работы уже было известно, что эндотелий магистральных артериальных сосудов человека представлен гетерогенной

популяцией клеток различного размера, формы, ядерности и плоидности. В конце 70-х - начале 80-х годов о явлении морфологической гетерогенности эндотелия впервые заговорили, как о явлении, возможно связанном с атеросклерозом. Однако последующие исследования не выявили сколь-нибудь существенных функциональных отличий многоядерных ЭК от остальной массы клеток, что значительно поколебало надежды на то, что искомый морфологический базис атеросклероза найден. Впрочем, сегодня никто из исследователей не взял на себя ответственность и за то, чтобы полностью исключить возможное участие подобных клеток в патогенезе заболевания.

Тем не менее, интерес к морфологической гетерогенности эндотелия сохранился. Одной из причин этого можно считать данные, касающиеся частоты встречаемости различных форм этой гетерогенности в различных участках одного и того же сосуда, в частности, в зонах с различной статистической предрасположенностью к атеросклерозу. Речь идет о существовании особой, кластеризованной, формы организации монослоя клеток. Возникновение кластеризации ЭК можно, по всей видимости, отнести к одной из стадий развития гетерогенности эндотелия вообще. Складывается впечатление, что рано или поздно кластеризация клеток может возникнуть практически в любом участке сосуда. Интересно, однако, то, что в определенный период жизни она возникает практически только в зонах, предрасположенных к развитию заболевания, еще до появления морфологических изменений интимы; уже существующие атеросклеротические бляшки также окружены полями кластеризованного эндотелия.

Подтверждением данного предположения можно считать следующие факты: и накопление многоядерных ЭК, и снижение пролиферативной активности клеток, и пониженная способность клеток к длительному субкультивированию, и падение относительного содержания т.н. "камбиальных" ЭК являются неотъемлемой характеристикой эндотелия в зонах ВПА.

Выявление в составе эндотелия популяции камбиальных ЭК интересно само по себе. В силу терминологических изменений, произошедших в последние несколько лет, сегодня эту популяцию можно назвать "колониеобразующими единицами эндотелия" или "тканевыми клетками предшественниками". С одной

стороны, их присутствие позволяет рассматривать эндотелий как ткань, регенерация которой осуществляется специальной клеточной популяцией, тогда как основная масса клеток находится в дифференцированном состоянии и выполняет ряд специфических функций. С другой, - их существование позволяет рассматривать кластеры клеток, выявляемые in situ, как возможный продукт их жизнедеятельности, т.е. говорить о клональном происхождении отдельных клеточных популяций. Наконец, использование техники культивирования, основанной на получении дискретных клеточных колоний, впервые позволило in vitro воспроизвести кластеризованный монослой, состоящий из морфологически и функционально рахзичающихся клеточных популяций.

Использованный методический прием позволил установить, что клеточные популяции, входящие в состав отдельных кластеров, могут существенно различаться по целому ряду функциональных параметров. Прежде всего, это относится к спонтанной и индуцированной цитокинами экспрессии различных классов молекул клеточной адгезии.

Аналогичная сигуация складывается, по-видимому, и со вторым условием накопления лейкоцитов в субэндотелиальной интиме: синтезом и депонированием отдельных компонентов, входящих в состав базальной мембраны, и секрецией различных растворимых гуморальные факторов. В этой связи следует отметить, что некоторые из клеточных клонов были способны депонировать в составе внеклеточного матрикса тромбоспондин - белок не только являющийся хемоаттрактантом для зрелых и низкодифференцированных форм гематогенных клеток, но и способствующий пролиферации последних. Различия в синтезе гуморальных факторов становятся очевидными при со-культивировании клональных клеточных популяций с ГМК, а также при анализе секреции различных цитокинов в культуральную среду.

Таким образом, нельзя исключить, что достаточно протяженные участки сосудистой стенки могут быть покрыты клетками-потомками, имеющими (сохранившими) в разной степени выраженности про-воспалительные параметры метаболизма материнской клетки. Данная концепция привлекательна тем, что

позволяет объяснить и преимущественную топографию атеросклероза в зонах ВПА, и локальность развития атеросклеротических поражений в виде ограниченных образований.

Среди факторов, способных влиять на функциональное состояние эндотелия, определенное внимание было уделено агентам вирусной природы, в частности, вирусу простого герпеса 1 типа - ВПГ-1 - одному из наиболее распространенных в человеческой популяции вирусов. В ходе работы выяснилось, что сосудистый эндотелий полностью соответствует свойствам ткани-мишени для ВПГ-1.

Последние годы ознаменовались открытием еще одного потенциального участника процессов, имеющих место при атерогенезе. Циркулирующие в крови клетки-предшественники гемопоэтического и стромального ряда дифференцировки вполне подходят на роль клеточного элемента, способного формировать локальные участки атеросклеротического перерождения. Поскольку стволовые клетки используют при взаимодействии с ЭК те же клеточные механизмы, что и зрелые формы клеток [Levesque et al, 1995; Voermans et al, 2000; Whetton, Graham, 1999], они, по-видимому, также могут адгезировать на активированный эндотелий и проникать в субэндотелиальное пространство. Исследования, проводимые в НИИ экспериментальной кардиологии с 80-х годов, позволили впервые обнаружить в интиме аорты человека не только описанные ранее клеточные элементы, но и гемопоэтические и стромальные КОЕ [Соболева и др., 1989; Romanov et al, 1995; Soboleva etal, 1995,1999].

Данные о присутствии в интиме гемопоэтических и стромальных клеток- предшественников позволяют объяснить сразу два парадокса, связанных с результатами исследования пролиферации интимальных клеток, описанными в работах многих авторов.

Описанная последовательность событий представляется наиболее вероятной, впрочем, нельзя исключить и еще один механизм с участием стволовых клеток. Источником клеток-предшественников и/или созревающих форм клеток гематогенного происхождения может быть не периферическая кровь, а сама интима, сохранившая зарезервированные "дремлющие" стволовые клетки, попавшие туда в период внутриутробного развития плода (Tavian et al, 1996]. В данном случае, роль запускающего их пролиферацию и дифференцировку фактора может выполнять микроокружение, сформированное в результате воспалительного, репаративного или иного процесса.

Как бы то ни было, существованием подобных клеточных элементов можно объяснить возникновение большинства известных форм атеросклеротического поражения, таких как фиброз, липофиброз, образование хряще- и костсподобных структур, кальцификацию и т.д. [Romanov et al, 2003]. Это еще раз подтверждает, что атеросклероз - заболевание, затрагивающее многие аспекты жизнедеятельности организма, и, по всей видимости, заболевание системное.