V-3.1. ИССЛЕДОВАНИЯ НА ТКАНЕВЫХ ПРЕПАРАТАХ И КУЛЬТУРАХ НЕЙРОНОВ

В первых публикациях по церебролизину было продемонстрировано влияние гидролизатов из мозга на рост нервных волокон в культуре. На эмбрионах крыс установлено сопоставимое с влиянием природного Ростового фактора нервов (NGF) воздействие ЦР на число и размеры нейронов, скорость и фазы митоза.

исследование одним из первых подтвердило, что в составе ЦР и гидролизатов из мозга присутствуют физиологически активные факторы, непосредственно влияющие на рост эмбриональных нейронов (Lindner et al. 1975).

Sommer & Quandt (1973), используя электронную микроскопию, получили результаты, ценность которых становится все более очевидной с пониманием современных механизмов нейрональной патологии. Было установлено, что ЦР ускоряет развитие мозга у молодых крыс; этот феномен сопровождается активацией и пролиферацией глиальных элементов и ранней дифференцировкой кортикальных структур и, соответственно, стимулированным развитием цитоархитектуры мозга. Ранние ламинарные образования эндоплазматического ретикулума и большое число вновь возникающих рибосом были отчетливо документированы электронной микроскопией. Одновременно выявлялась активация и пролиферация митохондрий и рибосом в структурах гипофиза, сопровождавшаяся увеличенной продукцией секреторных гранул.

На эксплантатах мозга и периферических нервов куриных эмбрионов и постнатальных цыплят было установлено, что ЦР стимулировал клеточную миграцию в зонах роста в гиппокампе и в тригеминальном ганглии. Потенцируя созревание и дифференцировку нейронов, ЦР на треть увеличивал число рибосом в нейронах. В контрольных опытах с пирацетамом и мекломеноксатом было установлено тормозящее действие препарата на дифференцировку нейронов и рост волокон.

В последующих гистохимических исследованиях изучались ультраструктурные изменения нейрогенеза – число гранулярных нейронов в зубчатой бороздке гиппокампа, цитоархитектоника клеток, структура дендритов и дендритных разветвлений.

Проведено сравнительное изучение влияния ЦР и интерлейкина-1 на функцию клеток микроглии. Активация микроглии культуры клеток крысиного мозга вызывалась in vitro липополисахаридом. Результаты показали, что ЦР обладал выраженной нейроиммунотрофической активностью, снижая развитие воспалительных явлений в ткани и препятствуя гибели нейрональных структур. Сравнение с NGF, BDNF и NT-3 показало большую эффективность действия ЦР (Lombardi et al. 1999; Alvarez et al. 2000).

На культурах нейронов дорзального корневого ганглия, цилиарного ганглия и симпатического ствола 10-дневных куриных эмбрионов ЦР (препарат FPF-1070) значительно усиливал нейрогенез. Его выраженность была различной в исследованных группах нейронов. Результаты свидетельствовали, таким образом, о специфической, субпопуляционной нейротрофной активности ЦР (Satou et al. 2000).

Вводимый "пожилым" крысам, возраста 24-х месяцев, ЦР увеличивал синаптическую плотность нейронов (тест на иммунореактивность синаптофизина) в гиппокампе, зубчатой извилине и энторинальной коре мозга (Reinprecht et al.1999).

На модели цитотоксического стресса, вызываемого пониженным содержанием сыворотки в инкубате, установлено стимулирующее влияние ЦР на аксональный рост клеток телэнцефалона, максимально выраженное в 4-8 сутки развития эмбриона. Препарат защищал нейроны от

дегенерации, моделируемой в искусственной среде с ограниченным содержанием аминокислот

(Hartbauer et al. 2001).

На культуре прогениторных клеток зубчатого ядра крысы Y.Tatebayashi и соавт. исследовали значение нейротрофических факторов среды на развитие аксональной поляризации нейронов. Природный Фактор роста фибробластов (FGF) имитировал элементы нейродегенеративной феноменологии: дозозависимо снижал уровень цитоскелетного белка, связанного с микротрубочками (МАР2), и увеличивал уровень белка tau. Вводимый животным i.p. ЦР, напротив, значительно стимулировал дифференцировку структур прогениторных клеток гиппокампа и снижал показатели спонтанного апоптоза, препятствуя, таким образом, эффектам FGF. Одновременно было продемонстрировано позитивное влияние ЦР на физиологические показатели ориентировки и запоминания в водном лабиринте Морриса. Исследования на культуре нервных клеток позволили сделать общий вывод о том, что ЦР способствует модуляции микроокружения развивающихся клеток гиппокампа, увеличению нейрогенеза и функциональному созреванию нейрональной сети за счет тормозящего влияния на апоптические процессы (Tatebayashi et al. 2003).