Проверка на канцерогенность.

Эти дорогостоящие исследова­ния, длящиеся от 2 до 3 лет и требующие большого количества лабораторных животных для получения статистически достовер-

яых данных, обычно проводят на крысах.

Химические соединения, вызывающие обратную мутацию, встречаются достаточно часто, например, таким действием обла­дают многие соединения с жесткой структурой. В известном тесте Ames используют мутанты безоболочечного типа бакте­рий, так как углеводная оболочка может мешать свободной диффузии лекарственного вещества. Обычно проводят двойной тест с использованием S9 микросомальной фракции печени кры­сы с тем, чтобы проверить возможность образования канцеро­генных метаболитов при действии на вещество оксидаз со смешанными функциями (разд. 3.5.1).

Однако этот тест иногда дает и неверные результаты (как положительные, так и отрицательные). По этому тесту канцеро­генны два природных вещества, встречающиеся в животных клетках — цистеин и глутатион, хотя известно, что оба эти сое­динения играют определенную роль в предотвращении канцеро­генеза [Glatt, Protic-Sabljic, Oesch, 1983]. Диоксин, чья ярко выраженная биологическая активность носит мутагенный харак­тер (по крайней мере, на чувствительных линиях мышей), по этому тесту не классифицируется как мутаген.

В настоящее время предпринимаются попытки совместить тест Амеса со вторым экспресс-тестом, таким как количествен­ный анализ повреждения хромосом человека с использованием лимфоцитов, культивированных в крови. При параллельном про­ведении обоих тестов точный ответ можно получить через 6 нед. Широко используется альтернативный тест трансформации кле­ток Styles [Purchase et al., 1976], основанный на биологической особенности клеток тканей млекопитающих: они не могут расти на полутвердом агаре, так как эта среда мешает им контактиро­вать друг с другом, а в таких условиях клетки погибают. Однако если химическое соединение может вызывать трансформацию клеток (разд. 13.5), то его добавление к среде приводит к росту

изолированных клеток. Для этого теста Syres использовал клетки печени человека и почек хомяка. В некоторых случаях результаты этого теста противоположены получаемым по тесту Ames. Например, по тесту Ames 2-аминонафталин канцерогенен, а масляный желтый — нет, тогда как по тесту Стайлса — нао­борот (хотя известно, что оба эти соединения канцерогенны для человека).

Существует широко распространенное мнение, что каждый мутаген — это потенциальный канцероген. Однако следует пом­нить, что мутагенность, определяемая по тесту Ames (способ­ность вызывать эффект сдвига рамки), отличается от мутаген­ности, которой обладают раковые клетки (неограниченный рост и ускорение клеточного цикла). Известны серии соединений, в которых при усилении канцерогенных свойств ослабляются мутагенные и наоборот. Такова, например, серия из 15 производ­ных анилиновых ипритов (13.53) [Leo et al., 1981]. Мутагенные свойства этих соединений определяли по тесту Ames (с инкуба­цией и без инкубации в S9 микросомальной фракции печени), а канцерогенные-—по способности увеличивать число опухолей в легких у линии мышей, склонных к таким опухолям (шестиме­сячный тест). Самым сильным мутагеном и самым слабым кан­церогеном оказалось 4-феноксипроизводное, тогда как для 3,5- диуреидо-аналога (—NH—СО—NH₂)2 было установлено проти­воположное.