МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ КЛЕЩЕЙ ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ТРАНСМИССИВНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Для исследования зараженности клещей различными возбудителями заболеваний человека или животных применяют постановку биологической пробы, посев, люминесцентно-серологический метод и прямую микроскопию препаратов из исследуемых клещей после соответствующей окраски.

Биологическая проба пригодна для выявления зараженности как живых, так и мертвціх клещей. B первом случае исследуемых клещей подсаживают на животное, чувствительное к данному возбудителю. B зависимости от целей исследования клещей высаживают по одному на каждое животное или группами в несколько особей. Один из недостатков этого метода состоит в том, что кормление на животном зараженных клещей не во всех случаях приводит к заболеванию животных и, таким образом, возбудитель, присутствующий в переносчике, может остаться необнаруженным без проведения дополнительных серологических исследований.

При суспензионном исследовании убитых клещей C помощью биопробы возможность выделения возбудителя из переносчиков возрастает. B этом случае исследуемую группу (пул) клещей дважды промывают в стерильном физиологическом растворе, затем на несколько секунд опускают в 70° этиловый спирт, .затем снова промывают специальным физиологическим раствором и растирают в фарфоровой ступке, добавляя физиологический раствор, фосфатную буферную смесь или другой раствор, способствующий сохранению в суспензии искомого возбудителя. B некоторых случаях обмывание клещей (особенно мелких) в спирте; не проводят, так как даже кратковременный контакт со спиртом губительно действует на пекоторые виды возбуди-

телей. Вместо этого к суспензии добавляют небольшие количества антибиотиков, подавляющих вульгарную микрофлору и не вызывающих отмирания изучаемого возбудителя (500 ЕД пенициллина и 250 ЕД стрептомицина на 1 см3). B тех случаях, когда растирают взрослых клещей с твердым хитиновым покровом, в ступку полезно положить немного стерильного кварцевого песка; при этом можно получить более равномерное и полное эмульгирование объектов.

Количество клещей, взятых в одну пробу для эмульгирования, зависит не только от целей опыта, но и от вида и фаз'ы развития клещей. Взрослых голодных иксодовых или аргасовых клещей берут обычно по- 10 экземпляров на одно растирание. B случае исследования нимф их количество доводят до 20—50. Гамазовых или дичинок краснотелковых клещей берут до 100 экземпляров в 1 пул. .В некоторых случаях, когда наряду с качественным исследованием необходимо выяснить количественные показатели, клещей, подвергаемых исследованию, взвешивают нааналитических или торзионных весахипроизводят расчет объема суспензии, полученной из клещей, .на1 мг веса растертых клещей.

Полученную при растирании суспензию после отстаивания в пробирке при температуре около 0° или после короткого центрифугирования вводят животным под кожу, внутрибрюшинно, в мозгилидругим способом, взависимостиот вида возбудителя, который предполагают обндружить. ВиДы клещей, питающихся кратковременно, испытывают иногда на зараженность путем кормления на развивающихся куриных эмбрионах, вскрыв яичную скорлупу.

Животных, взятых для . постановки биопробы, содержат в зависимости от целей и условий опыта индивидуально в банках или клетках, или группами. Наблюдения проводят с учетом длины инкубационного периода заболевания, вызываемого введенным возбудителем, или сроков выработки антител к данному возбудителю (если животное мало чувствительно к нему и четкой клиники при заражении наблюдать не удается). Павших животных вскрывают и исследуют в соответствии с целями опыта, характером возбудителя и вызываемых им поражений.

Иногда, вследствие незначительной дозы возбудителя, вводимого с заражающей суспензией животному, на первом пассаже выявить специфический агент не удается; в этом случае производят так называемые «слепые» пассажи, т. e. заражение очередных партий животных того же вида материалом, взятым от животных, зараженных исходной исследуемой суспензией. Материал (органы, кровь) берут от животных, на которых была поставлена первичная биопроба, в период предполагаемого максимального размножения в них возбудителя.

а могут произойти вследствие травмы (например, при внутримозговом заражении) или от размножения неспецифической (вульгарной) микрофлоры. Для исключения ошибки пассажи сопровождаются бактериологическими пробами.

Посев на искусственные питательные среды применяется при поисках в органах клещей возбудителей бактериальной природы. C этой целью может быть произведен посев эмульсии, приготовленный из всего клеща или из отдельных его органов, для чего производится вскрытие и препаровка нужного органа. Прямое выделение из клещей риккетсий и вирусов на культурах тканей затруднительно ввиду зараженности поверхности тела и внутренних органов клещей различными видами посторонних возбудителей, вызывающих быстрое нарушение роста тканевой культуры. Для того, чтобы перевести возбудителя из клеща на культуру ткани, необходим предварительный пассаж возбудителя через лабораторное теплокровное животное, от которого уже берут материал для заражения культуры ткани.

Люминесцентно-серологический метод может быть применен в тех случаях, когда имеются специфические люминесцирующие сыворотки для выявления соответствующих видов возбудителей в органах и тканях клещей. Этот метод подкупает своей быстротой и относительно высокой специфичностью, хотя элемент субъективизма при оценке интенсивности свечения микробных клеток под люминесцентным микроскопом на препарате, обработанном специфической диагностической сывороткой, при этом исключить трудно.

Более подробное описание методов бактериологического и вирусологического исследования переносчиков приводится в специальных руководствах (см. список литературы).