ВЫЯВЛЕНИЕ ФЕТАЛЬНЫХ КЛЕТОК (F-КЛЕТКИ) В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ

Необходимая аппаратура н техника.

Аппаратура. 1. Предметные стекла. 2. Водяная баня. 3. Аппарат для окраски мазков крови. 4. Микроскоп. 5. 80% спирт. 6- 0,1М раствор лимонной кислоты.

67

Методика. 1. На предметное стекло нанести каплю крови больного. Быстро сделать из него тонкие мазки. В ряде случаев возникает необходимость разводить каплю физраствором 1:1.

Дать высохнуть мазкам на воздухе в течение 20 минут

2. Фиксировать мазки 80% спиртом 5 минут. Сполоснуть дистиллированной водой и высушить на воздухе.

3. Поставить аппарат для окраски мазков в водяную баню при 37°С.

4. Смешать 37,7 мл 0,1 М раствора лимонной кислоты и с 12,3 мл 0,2 М Na^HPO^. определить рН и довести его до 3,3 при необходимости добавляя лимонную кислоту или раствор Na^PC), Залить смесь в аппарат для окраски мазков.

5. Когда температура раствора достигнет 37°С, погрузить в него фиксированные мазки. Непререрывно помешивая, инукбировать в нем мазки в течение 5 минут.

6. Через 5 минут вынуть мазки, сполоснуть водопроводной водой и высушить.

7. Окрасить раствором гематоксилина Гарриса 2 минуты и вновь сполоснуть водопроводной водой. Докрасить раствором эозина 2 минуты. Сполоснуть водопроводной водой и высушить.

8. Исследовать под микроскопом - вначале на малом увеличении, затем под иммерсионным объективом.

Результаты. Нормальные эритроциты видны как бледные серо-розовые «тени» на заднем плане, тогда как F-клетки выделяются как темные структуры (рис. 15).

Рис. 15. Хорошо видны темные F-клетки (эритроциты с HbF) и «тени» эритроцитов (светлые клетки) с нормальным НЬ. Окуляр 7, объектив 90 (собственные оригинальный препарат и фото).

68

Фетальные клетки в крови могут обнаруживаться и при так называемом наследственном персистировании HbF (163). При этой патологии HbF, как правило, распределяется в F клетках неравномерно (117).