ПРОБА НА РАСТВОРИМОСТЬ

Ряд других качественных гемоглобинов могут иметь при электрофорезе ту же подвижность, что и HbS. Для их различения может помочь проба на растворимость. HbS при ряде условий имеет значительно менее выраженную расворимость, по сравнению с другими гемоглобинами.

Ниже излагается методика одной из проб на растворимость гемоглобинов.

Растворы. 1. Фосфатный буфер 2,87 М с рН 6,5. Получают растворением 289,2 г К2НР04 и 164,7 г КН2ЮЛ в 1 литре дистиллированной воды.

2. Фосфатный буфер 2,49 М. Получают смешением 86,7 мл 2,87 М буфера и 100 мл дистиллированной воды.

3. Фосфатный буфер 1,10 М. Смешивают 3,83 мл 2,87 М буфера и 100 мл дистиллированной воды

4. NaHSO3.

Методика. В отдельные пробирки налить по 4,5 мл каждого из фосфатных буферов, добавить 50 мг NaHS03, 0,5 мл 5% гемолизата исследуемой крови и оставить смесь на ночь при комнатной температуре. Утром профильтровать и исследовать на фотоэлектрокалориметре или стекгрофотометре с фильтром 540 наномикрон.

Растворимость различных гемоглобинов представлена ниже. Типы гемоглобинов Молярность буфера и процент растворимости 2,49 М 2,87 М

АА 90-95 13-20

AD 90-95 13-20

AS 25-35 5-20

SS 3-10 2-4

Можно видеть, что растворимость HbS значительно ниже, чем других нормальных и патологических вариантов.

В случаях, трудных для дифференциальной диагностики, особенно при сочетании с талассемиеи, окончательный диагноз устанавливается при помощи изучения синтеза глобиновых цепей. Учитывая, все же, что эта методика относится к диагностике талассемий, считаем возможным, здесь ее не приводить.

69