Приготовление основного стандартного раствора для опре­деления Na

254 мг дважды перекристаллизованного NaCl растворяют­ся в 100 мл дистиллированной воды. Из основного раствора готовятся растворы разной концентрации по схеме:

По данным растворам строится калибровочная кривая и составляется таблица.

Поскольку каждая проба заливается постоянным количест­вом (10 мл) дистиллированной воды, независимо от навески, то при навеске больше 100 мг разведение будет меньше, чем 1:100, а при навеске меньше 100 мг разведение будет боль­ше, чем 1:100. В связи с этим для окончательного расчета при навеске свыше 100 мг миллиэквиваленты нужно разделить на А, где

Если навеска пота меньше 100 мг, то миллиэквиваленты нужно умножить на В, где

Параллельное определение в потовой жидкости Na и С1 дает более надежные результаты. Разница между концентра­циями Na и Cl в пробе не должна превышать 10 мэкв/л, в противном случае потовая проба повторяется. Повторяется она и при получении концентрации свыше 40 мэкв/л.

При четко налаженной и отработанной методике возмож­но определение только одного из электролитов.

Для выполнения теста необходимо собрать минимум 100 мг пота.

Повторное проведение потовой пробы также рекомендуется, если: результаты первого теста сомнительные; результаты первого теста негативные, но клинические проявления позволяют с высокой вероятностью подозревать наличие МВ.

¨Если результаты повторной потовой пробы сомнительны, но сохраняются веские клинические доказательства в пользу МВ или выявляются отдельные симптомы, характерные для МВ (например: стеаторея), рекомендуется проводить терапию, показанную больным с установленным диагнозом МВ. В этих случаях следует периодически повторять потовый тест. Уточнению диагноза может способствовать генетическое тестирование (при условии его доступности).

¨Если не удается получить требуемое количество пота, рекомендуется стимулировать секрецию потовых желез с помощью теплового воздействия, кормления во время сбора пота или физических упражнений. Не следует также забывать о необходимости коррекции дегидратации, если таковая имела место незадолго до проведения потовой пробы. В области отека объем секрета потовых желез может быть сниженным. Повторная стимуляция в одной и той же области может привести к истощению потовых желез, что приводит к повышению концентрации электролитов.

¨Концентрации натрия и хлора в поте обычно примерно одинаковые. Поэтому различия в уровнях натрия и хлора, превышающие 10 ммоль\л, должны настораживать клинициста в отношении возможности технических погрешностей при проведении пробы.

¨Показатели натрия или хлора выше 150 ммоль/л являются не достоверными (Shulz, 1969)

¨У некоторых здоровых новорожденных в первые дни жизни могут отмечаться повышенные концентрации электролитов. Кроме того, сбор пота в этот период часто затруднен. Поэтому рекомендуется проводить потовую пробу не ранее первых 7 дней после рождения, при весе ребенка не менее 3 кг. Некоторые специалисты предпочитают проводить тест детям старше месяца жизни, при возможности с проведением генетического обследования и определения хлоридов пота в динамике.

¨Концентрации натрия и хлора в поте остаются неизменными на протяжении всего детского возраста. После достижения 15-летнего возраста, уровни натрия и хлора в секрете потовых желез здоровых лиц повышаются (иногда до 60-90ммоль\л), но потовая проба в совокупности с клиническим симптомокомплексом сохраняет свое значение для диагностики МВ.

Несмотря на свою специфичность, метод по Гибсону-Куку является длительным, трудоемким и зависит от опыта проводящего персонала. В связи с этим, постоянно ведутся разработки аппаратов, которые позволили бы унифицировать методику, сократить время проведения теста и уменьшить количество пота, необходимое для постановки диагноза.