5.2. Экспресс-методы проведения потового теста.

В середине 80-х годов был разработан, внедрен в практику и начал применяться в нашем центре аппарат для скринингового полуколичественного определения хлоридов пота - CF-индикатор американской фирмы «Скандифарм», представлявший собой аппарат с двумя дисками, один из которых пропитан пилокарпином, другой – сульфатом натрия и собственно индикатор для анализа пота.

Более точными в диагностике МВ признаны экспресс-методы проведения потового теста, основанные на количественном анализе электролитов пота. Так, в Российском центре МВ наряду с «классическим» биохимическим методом (Gibbson, Cooke, 1959 г.) используются экспресс-методы проведения потового теста на аппаратах системы «Macroduct + Sweat Chek», «Nanoduct» фирмы Wescor (США) и «Sanasol-SM-01» (Венгрия).

Система «Macroduct» включает в себя аппарат для ионофореза, который работает от 2-х батарей по 9 Вт каждая, два электрода, накладываемых на предплечье, комплект пилогелевых дисков, коллекторы для сбора пота. Использование пилогелевых дисков в сочетании с автоматическим контролем за ионофорезом в цепи обеспечивает безопасный и эффективный электрофорез пилокарпина. За счет снижения влияния человеческого фактора система «Macroduct» позволяет избегать ошибок, связанных с предварительным сбором пота, выпариванием и конденсацией, что в результате позволяет собрать чистый пот. Объем пота контролируется визуально.

С 2006 года в Российском и большинстве региональных центров МВ для проведения потовой пробы используется новый для нашей страны прибор «Nanoduct», фирмы Wescor (США). Он объединяет в себе устройство для электрофореза и потовый анализатор (рис.3). Для получения результата необходимо всего 3 мкл пота. Продолжительность потовой пробы составляет около 10 минут, из которых 2,5 минуты – электрофорез. Эта модель разработана для новорожденных и детей первых месяцев жизни, но может использоваться в любом возрасте.

В отличие от классического – биохимического метода Гибсона-Кука, которым определяется непосредственно концентрация ионов хлора в поте обследуемого больного, работа потовых анализаторов «Sweat-Chek» и «Nanoduct» основана на измерении проводимости ионов пота, называемой «эквивалентной» концентрацией хлорида натрия. Результат измерений, получаемый в ммоль/л означает, что данный потовый образец имеет проводимость, эквивалентную проводимости раствора хлорида натрия с концентрацией, равной показаниям прибора. Так как проводимость определяется совокупностью всех ионов, присутствующих в потовой жидкости (калий, натрий, хлор, бикарбонат, аммоний и др.), полученный результат превышает истинную концентрацию хлоридов примерно на 15-20 ммоль/л. В связи с этим, в качестве позитивных для муковисцидоза рассматриваются результаты выше 80 ммоль/л, показатели 60-80 ммоль/л считаютс пограничными, а до 60 ммоль/л – нормальными (табл.

Таблица 8. Интерпретация результатов потового теста.

Среди всех детей, обследованных нами с помощью системы «Macroduct» и анализатора «Sweat-Chek», 5% составили пациенты с МВ, проводимость пота которых равнялась 60-80 ммоль/л, 2,5% - больные МВ с проводимостью менее 60 ммоль/л. Диагноз МВ у всех этих больных был верифицирован на основании совокупности данных, включая результаты классического потового теста и ДНК-диагностику. Мы полагаем, что в этих случаях можно говорить об атипичной форме МВ с пограничным и даже нормальным содержанием хлоридов в поте. Многолетняя мировая практика использования анализатора «Sweat-Chek» в диагностике МВ, результаты многочисленных исследований по сопоставлению данной методики с классическим методом определения концентрации хлоридов в потовой жидкости свидетельствуют о том, что измерение проводимости пота является столь же эффективным методом диагностики МВ, как и определение концентрации хлоридов.

По принципу определения проводимости ионов работает потовый анализатор модели “SM-01” производства фирмы Sanasol Meditechnika, Венгрия (рис.4). В Российском центре муковисцидоза этот анализатор используется с 2002 года. Данный аппарат объединяет в себе устройство для ионофореза и анализатор. Измерение проводится в закрытой системе, используя 1 µл пота. Также как и анализатор Sweat-Chek аппарат Sanasol пригоден для работы вне лаборатории. Нормы для него аналогичны нормативным показателям для «Sweat-Chek» и «Nanoduct».