Модуль 2. Преимплантационная профилактика наследственных болезней.

Комплексная цель: Ознакомиться с преимплантационной генетической диагностикой (ПГД), как методом профилактики наследственной патологии. Рассмотреть этапы проведения ПГД. Изучить лабораторные методы исследований, применяемые для преимплантационной диагностики.

Идея применения методов преимплантационной генетики в клинической практике возникла давно. Еще в 1967 г. R.Edwards и R.Gardner успешно определяли пол у эмбрионов кролика, находящихся на стадии бластоцисты, и затем переносили их в полость матки. Уже тогда эти ученые предсказывали применение аналогичных технологий у человека во избежание передачи наследственных заболеваний от родителей детям. Однако это стало возможным лишь в начале 90-х годов, когда была разработана техника полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая позволяла определять мутации в единичных клетках. Первыми ПЦР для преимплантационной генетической диагностики (ПГД) в клинической практике применили А.Handyside и соавт. в 1990 г. С помощью ПЦР они детектировали специфические последовательности для хромосомы Y при определении пола эмбрионов у супружеских пар с Х-сцепленными заболеваниями. Однако из-за риска постановки неправильного диагноза при определении пола эмбрионов от ПЦР постепенно стали отказываться в пользу другого метода - флюоресцентной (нерадиоактивной) гибридизации in situ (FISH). Его преимущество заключалось в том, что можно было одновременно детектировать как X-, так и Y-хромосомы, и, как следствие, появилась возможность определять не только пол эмбрионов, но и анеуплоидии половых хромосом. С тех пор за достаточно короткое время разработано много модификаций ПЦР и FISH, расширяется область применения этих методов в ПГД.

На сегодняшний день при преимплантационной диагностике осуществляется диагностика моногенных и хромосомных дефектов у ооцитов и эмбриона. Преимплантационная диагностика разработана для женщин, имеющих высокий риск рождения детей с наследственной патологией, как альтернативный метод пренатальной диагностики.

При ПГД из эмбриона извлекают одну или две клетки, а затем проводят их генетический анализ методом FISH (fluorescent in situ hybridization) на анеуплоидии, транслокации и другие структурные патологии. Другой тип диагностики - полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая применяется для диагностики моногенных заболеваний. ПЦР проходит в два этапа:

1) биопсия эмбриона и фиксация бластомера;

2) генетическая диагностика.