Методы исследования

2.2.1 Клинические методы. Диагноз заболевания каждому обследованному выставлялся в соответствии с международной классификацией, на основании тщательного клинического, рентгенологического и бактериологического исследований.

Клиническое обследование включало в себя опрос, осмотр, сбор анамнеза и жалоб, выявление контакта с больным туберкулёзом и ВИЧ- инфицированным, проведение физикальных методов обследования.

Классификация язвенной болезни и туберкулеза легких осуществлялась в соответствии с МКБ-10. Интенсивность диспепсического синдрома оценивалась по визуально-аналоговой шкале (ВАШ), где 0 - отсутствие признака, а 10 - максимально выраженный признак.

Диагностика ЯБ базировалась на классических критериях [Василенко В.Х. и соавт., 1987; Ивашкин В.Т. и соавт., 2001] и осуществлялась с учетом клинико-эндоскопических, функциональных и морфологических данных. Верификация хронического гастрита, сопутствующего ЯБ проводилась по классификационным признакам, предложенным международной ассоциацией гастроэнтерологов [Сидней, 1990; Хьюстон, 1996], на основании эндоскопических и морфологических критериев. В соответствии с указанными классификациями степени обсемененности слизистой оболочки желудка Н. pylori, активность гастрита, инфильтративные изменения слизистой оболочки желудка, атрофия и кишечная метаплазия оценивались полуколичественно (слабые, умеренные, выраженные).

2.2.2 Лабораторные методы. Лабораторные методы исследования включали общий анализ крови с развёрнутой лейкоформулой, общий анализ мочи, биохимический анализ крови с исследованием белковых фракций, липидов, холестерина, аспарагиновой и аланиновой трансфераз, фракций билирубина, протромбинового индекса, фибриногена, исследование мокроты

на микобактерии туберкулеза методом микроскопии по Цилю-Нильсену и методом посева на стандартную среду Левенштейна - Йенсена. Все исследования проводились по общепринятым методикам.

Туберкулинодиагностика - согласно приказу МЗ РФ № 109 от 21 марта 2003 г. «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», включила пробу Манту с очищенным туберкулином PPD-L в стандартном разведении 2 ТЕ в 0,1мл (делалась на правой руке). Отрицательными результатами считались пробы Манту с размером папулы от 0 до 1 мм; сомнительными - от 2 до 4 мм; положительными - от 5 до 21 мм (слабоположительные 5-9мм; среднеположительные 10-14 мм; выраженные положительные 15-21 мм); гиперэргическими пробами считались пробы с размером папулы 22 мм и более или пробы меньшего размера с наличием везикуло-некротической реакции.

Диаскинтест® выполнялся на тыльной стороне левого предплечья согласно приказу Министерства здравоохранения РФ № 855 от 29.10.09 «О внесении изменения в приложение 4 к приказу Минздрава России от 21 марта 2003г. №109». Техника постановки аналогична пробе Манту. Ответная реакция на пробу считается: отрицательной - при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии «уколочной реакции»; сомнительной - при наличии гиперемии (любого размера без инфильтрата) или инфильтрата размером 2-4 мм; положительной - при наличии инфильтрата размером 5 мм и более; при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата реакция на препарат считается гиперергической (согласно инструкции по применению Диаскинтест®, утверждённой главным государственным санитарным врачом РФ Онищенко Г.Г. 19.06.2008 г. №01-11/99-08).

Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции на первом этапе строилась на выявлении суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. В случае получения положительного результата анализ проводился еще 2 раза (с той же

сывороткой). При получении хотя бы еще одного положительного результата сыворотки направляли в референс-лабораторию. Для подтверждения специфичности первичного положительного результата на втором этапе использовали метод иммунноблоттинга (Westernblot).

Определение H. pylori проводилось с помощью дыхательного уреазного теста и гистологически, путем изучения биоптатов слизистой оболочки тела и антрального отделов желудка, окрашенных по Романовскому-Гимзе. У части пациентов брались мазки-отпечатки со слизистой оболочки фундального отдела и тела желудка на предмет наличия H. pylori. Для определения морфологической структуры биоптаты слизистой оболочки антрального отдела и тела желудка окрашивались гематоксилином и эозином. Для определения грибов рода Candida биоптаты слизистой оболочки желудка окрашивались метиленовым синим, для определения микобактерий туберкулеза и криптоспоридий проводили окраску слизистой оболочки желудка по Цилю-Нильсену.

В идентификации антигенов цитомегаловируса в СОЖ применялся метод непрямой иммунофлуоресценции в реакции с моноклональными антителами тест-системы «Цитомегафлюоскрин», производства «Ниармедиклтд, Москва» и тест системы «Dako» по стандартной методике.

2.2.3 Инструментальные методы. Рентгенологическое

исследование легких проводилось один раз в 2 месяца и включало проведение стандартной рентгенографии в прямой и боковой проекциях, линейной томографии на оптимальных срезах в соответствии с требованиями, предъявляемыми к этой процедуре в отечественной литературе.

Определялся способ выявления туберкулёза: на профилактическом осмотре при проведении проверочной крупнокадровой (ККФ) или цифровой флюорографии, при обращении с жалобами, а также место выявления в первичном звене здравоохранения: поликлиника или стационар; срок установления диагноза.

Всем больным с диспепсическими жалобами и ЯБДК в динамике выполнялась ФГДС с исследованием морфологического материала слизистой оболочки антрального отдела желудка, соответственно, через 2, 4 и 6 недель. Больным с ЯБЖ проводили ФГДС через 4, 6 недель после начала наблюдения. При отсутствии рубцевания язвенного дефекта ФГДС выполняли 2 месяца. В соответствии с существующими рекомендациями язвы двенадцатиперстной кишки, не рубцующиеся свыше 4 недель, и язвы желудка со сроками рубцевания более 6 недель мы относили к трудно рубцующимся язвам (ТРЯ) [Маев И.В. и соавт., 2010; Масловский Л.В. и соавт., 2011]. Данный тип язв характеризуется частыми рецидивами и трудностями в консервативной терапии [SharmaM.P. etal., 2003]. Далее выполнялись ФГДС через 6 - и 12 месяцев от начала химиотерапии.

2.2.4 Социологические методы. Социологические методы исследования основывались на оценке материально-бытовых условий. Для определения черты бедности приняты рекомендации ООН [Weisfeld-AdamsE. etal., 2008]. Хорошие материально-бытовые условия включали в себя проживание в квартире со всеми удобствами и доход в семье на 1 человека

более 3 прожиточных минимумов. Удовлетворительные условия включали в себя проживание в коммунальной квартире или в частном доме без удобств и доход в семье на 1 человека от 1 до 3-ёх прожиточных минимумов. Плохие материально-бытовые условия - отсутствие жилья или доход на 1 человека в семье менее 1 прожиточного минимума. Проводился опрос пациентов с целью выяснения социального положения больного.

2.2.5 Оценка общего состояния и качества жизни. Для оценки качества жизни (КЖ) пациентов с ИТЛ мы посчитали возможным использовать тест SF-36, что нашло подтверждение в литературных источниках [Улюкин И.М.

Опросник SF-36 (Short Form) предложен Ware J.E. et al. (1992) является достаточно чувствительным, состоит из 36 стандартных вопросов. Критериями качества жизни в соответствии с тестом SF-36 являются: физическая активность, роль физических проблем в ограничении жизнедеятельности, боль, общее здоровье, жизнеспособность, социальная активность, роль эмоциональных проблем в ограничении жизнедеятельности, психическое здоровье.

Результаты исследования КЖ выражали в баллах (0 баллов - наихудшее КЖ, 100 баллов - наилучшее). Больные заполняли опросник самостоятельно.

2.2.6 Статистические методы. При обработке материала определялись средние значения, стандартное отклонение, ошибка, доверительный интервал. С учетом небольшого объема наблюдений в отдельных подгруппах, при статистических расчетах применялись формулы для малых групп. Был использован непараметрический метод статистической обработки - критерий Манна-Уитни. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в нашей диссертационной работе принимали равным за 0,05.

Изложенное показывает, что дизайн диссертации - открытое сплошное исследование типа «случай-контроль».

Математическая обработка результатов исследования проводилась с помощью статистического пакета программ «SPSS 15.0 forWINDOWS” на персональном компьютере IBM «Pentium - 4».