3.2.10.2 Определение чувствительности к протегринам методом серийных разведений
Протегрины PG-1, PG-2, PG-3 - антимикробные пептиды лейкоцитов свиньи, близкие изоформы с молекулярной массой ~ 2000 Da, были получены сотрудниками отдела общей патологии Научно-исследовательского института экспериментальной медицины СЗО РАМН Кокряковым В.Н.
и Кораблевой Е.С. Для получения использовали метод кислотной экстракции с последующей очисткой с помощью обращено-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии [223].Чувствительность криптококков к суммарной фракции протегринов определяли методом серийных разведений путем совместной инкубации 1?104 кл/мл C. neoformans с различными концентрациями PG-1,2,3 в стерильном растворе фосфатно-солевого буфера (0,5; 1; 2,5; 5; 7,5 мкг/мл) [12]. После 30 мин инкубации при 370 С, 100 мкл взвеси засевали на чашки с агаром Сабуро и инкубировали 72 ч при 370 С. В контрольных образцах, вместо протегринов, использовали аналогичное количество раствора фосфатно-солевого буфера. Антифунгальную активность протегринов оценивали по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) с последующим определением минимальной фунгицидной концентрации (MFC50) для каждого штамма C. neoformans. За
величину MFC50 принимали наименьшую концентрацию суммарной фракции протегринов, при которой погибало 50% криптококков. Минимальную фунгицидную концентрацию определяли путем построения графиков зависимости фунгицидной активности протегринов от концентрации пептидов по усредненным значениям трех независимых экспериментов.
Еще по теме 3.2.10.2 Определение чувствительности к протегринам методом серийных разведений:
- 1.5 Современные методы определения чувствительности Candida spp. к противогрибковым препаратам
- 4.2 Результаты определения чувствительности возбудителей инвазивного кандидоза методом CLSI M44 - A
- 2.7 Методы определения чувствительности Candida spp. к противогрибковым препаратам in vitro
- 4.1 Результаты определения чувствительности возбудителей инвазивного кандидоза методом CLSI M27-A3.
- 2.7.2 Диско-диффузионный метод определения чувствительности - CLSI M44-A
- 3.2.10 Методы определения чувствительности C. neoformans к антифунгальным агентам различного происхождения
- Определение чувствительности к антимикробным препаратам
- 2.7.3 Определение чувствительности с помощью микробиологического анализатора Vitek 2 Compact
- Определения солевой чувствительности
- Определение чувствительности роговицы и целости ее эпителия
- 9 Определение чувствительности выделяемых микроорганизмов к антибиотикам
- 4.3 Результаты определения чувствительности возбудителей инвазивного кандидоза с помощью анализатора Vitek2 Compact
- 3.2.10.1 Определение чувствительности C. neoformans к флуконазолу и вориконазолу (CLSI M44-A)